支原體是細胞外生存的 小微生物,是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.2~0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。 1、支原體存在于我們周圍,他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中 2、可透過一般的濾膜,所以不要寄希望于過濾可以清楚支原體污染的液體 支原體對培養(yǎng)細胞的污染發(fā)生率高,據(jù)估計平均發(fā)生率在60%左右。同時又非常隱秘,早期不容易被發(fā)現(xiàn),除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。支原體因為個頭小,能穿過0.22微米濾器,并且在實驗室內(nèi)會潛在的擴散。支原體污染使得用被污染的細胞樣本做的實驗完全失去意義和價值。 細胞培養(yǎng)中,支...
支原體還可以寄生在動植物體內(nèi),與宿主之間形成微妙的關(guān)系。在人體中,支原體有時會引起各種疾病。比如支原體肺炎,會讓患者出現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱、乏力等癥狀,給人們的生活帶來諸多不便。支原體的常常具有一定的隱蔽性。由于其初期癥狀可能并不明顯,很容易被人們忽視。然而,隨著的發(fā)展,可能會引發(fā)更嚴重的健康問題。因此,對于支原體的早期診斷和及時顯得尤為重要。在科學(xué)研究領(lǐng)域,支原體也引起了眾多科學(xué)家的濃厚興趣。他們深入研究支原體的生物學(xué)特性、致病機制以及與其他生物的相互作用。通過不斷的探索,我們對支原體的認識逐漸加深,也為更好地應(yīng)對支原體帶來的挑戰(zhàn)提供了有力的支持。總之,支原體作為微生物世界中的一員,雖然微小,卻蘊含...
細胞培養(yǎng)中建議使用支原體檢測的原因主要有以下幾點: 1. 支原體污染率高:常規(guī)細胞培養(yǎng)中支原體污染率保守估計在15-35%之間。 2. 影響實驗結(jié)果:支原體污染會嚴重干擾實驗結(jié)果的可信度,影響培養(yǎng)細胞的形態(tài)和生理特征。 3. 難以用光學(xué)顯微鏡檢測:支原體是極小的細菌,其細胞膜周圍沒有細胞壁,無法用光學(xué)顯微鏡檢測到。 4. 難以消滅:支原體能夠迅速滲透整個實驗室,一旦污染很難徹底消滅。 5. 影響產(chǎn)品質(zhì)量:支原體污染會影響細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量,監(jiān)管機構(gòu)推薦檢測所有細胞培養(yǎng)產(chǎn)物中是否存在支原體。 6. 保證實驗準確性:定期進行支原體檢測和去除,確保無支原體存在...
對于同一個樣品,如果一步法恒溫試劑盒檢測結(jié)果為陽性,而PCR檢測為陰性,可能的原因包括: 1. 檢測的支原體種類不同:一步法恒溫試劑盒可能檢測的支原體種類更多,例如可以涵蓋27種支原體,而PCR檢測可能只針對常見的12種支原體進行檢測。因此,如果樣品中污染的支原體種類不在PCR檢測的范圍內(nèi),就可能出現(xiàn)一步法檢測為陽性而PCR檢測為陰性的情況。 2. 靈敏度的差異:PCR方法的靈敏度可能高于一步法恒溫檢測法。PCR可以檢測到低至單個拷貝的支原體,而一步法恒溫檢測可能需要更高的支原體拷貝數(shù),例如10^3^個拷貝。如果樣品中支原體的數(shù)量低于一步法檢測的靈敏度閾值,PCR檢測可能無法檢...
患者會出現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱、乏力等癥狀,給身體帶來不適,影響日常生活。在細胞培養(yǎng)領(lǐng)域,支原體更是一個令人頭疼的問題。如果細胞培養(yǎng)體系被支原體污染,會對實驗結(jié)果產(chǎn)生嚴重的干擾。被污染的細胞可能生長異常、代謝改變,甚至死亡。這不僅浪費了大量的時間和資源,還可能導(dǎo)致錯誤的科學(xué)結(jié)論。然而,支原體并非只有負面作用。在自然界中,它們也可能在某些生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)揮著積極的作用。比如,支原體可能參與一些有機物的分解和轉(zhuǎn)化過程,對維持生態(tài)平衡有一定的貢獻。支原體檢測假陽性的原因?上海細胞培養(yǎng)支原體去除多少錢 支原體去除后對細胞檢測的影響主要取決于去除方法和去除后的處理。以下是一些可能的影響: 1. 去除方法的影響...
患者會出現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱、乏力等癥狀,給身體帶來不適,影響日常生活。在細胞培養(yǎng)領(lǐng)域,支原體更是一個令人頭疼的問題。如果細胞培養(yǎng)體系被支原體污染,會對實驗結(jié)果產(chǎn)生嚴重的干擾。被污染的細胞可能生長異常、代謝改變,甚至死亡。這不僅浪費了大量的時間和資源,還可能導(dǎo)致錯誤的科學(xué)結(jié)論。然而,支原體并非只有負面作用。在自然界中,它們也可能在某些生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)揮著積極的作用。比如,支原體可能參與一些有機物的分解和轉(zhuǎn)化過程,對維持生態(tài)平衡有一定的貢獻。細胞培養(yǎng)中,支原體檢測的重要性?廣州細胞支原體檢測方法bst 對于同一個樣品,如果一步法恒溫試劑盒檢測結(jié)果為陽性,而PCR檢測為陰性,可能的原因包括: 1. 檢...
在人體中,支原體可以引起多種疾病。例如,支原體肺炎就是一種較為常見的由支原體引發(fā)的疾病?;颊呖赡軙霈F(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、乏力等癥狀,嚴重影響生活質(zhì)量和身體健康。支原體的傳播途徑也較為多樣。它可以通過空氣飛沫傳播,在人群密集的場所,如學(xué)校、辦公室等容易造成小規(guī)模的流行。此外,接觸被支原體污染的物品也可能導(dǎo)致。然而,支原體并非只有負面作用。在一些特定的環(huán)境中,支原體也可能與其他生物形成共生關(guān)系,發(fā)揮著積極的作用。例如,在一些土壤環(huán)境中,支原體可能參與有機物的分解和轉(zhuǎn)化,對生態(tài)系統(tǒng)的平衡起著一定的調(diào)節(jié)作用。對于支原體,我們既不能輕視它的危害,也不能忽視它在生態(tài)系統(tǒng)中的潛在價值。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進步,我們...
患者會出現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱、乏力等癥狀,給身體帶來不適,影響日常生活。在細胞培養(yǎng)領(lǐng)域,支原體更是一個令人頭疼的問題。如果細胞培養(yǎng)體系被支原體污染,會對實驗結(jié)果產(chǎn)生嚴重的干擾。被污染的細胞可能生長異常、代謝改變,甚至死亡。這不僅浪費了大量的時間和資源,還可能導(dǎo)致錯誤的科學(xué)結(jié)論。然而,支原體并非只有負面作用。在自然界中,它們也可能在某些生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)揮著積極的作用。比如,支原體可能參與一些有機物的分解和轉(zhuǎn)化過程,對維持生態(tài)平衡有一定的貢獻。支原體污染之后是直接丟棄還是重新培養(yǎng)?細胞支原體預(yù)防現(xiàn)貨 細胞被支原體污染后可能會出現(xiàn)以下幾種情況: 1. 生長速度變慢:支原體污染的細胞生長速度可能會減慢,甚...
一步法快速支原體檢測的原理主要基于等溫擴增技術(shù),這是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。以下是具體的步驟和原理: 1. 等溫擴增技術(shù):一步法快速支原體檢測試劑盒利用LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification,環(huán)介導(dǎo)等溫擴增)技術(shù)或類似的等溫擴增技術(shù)。這些技術(shù)允許在恒定溫度下進行DNA的快速擴增,通常在60-65°C之間。 2. 特異性引物:該方法使用設(shè)計好的特異性引物,這些引物靶向支原體DNA的保守區(qū)域。引物的設(shè)計確保了擴增過程的特異性,從而減少非目標序列的擴增。 3. 快速擴增:在適宜的條件下,等溫擴增技術(shù)可以在15...
支原體檢測的樣本既可以是細胞,也可以是培養(yǎng)基。在細胞培養(yǎng)中,支原體污染是常見的問題,因此需要對細胞和培養(yǎng)基進行檢測。細胞庫、病毒種子批、對照細胞以及臨床用細胞等都需要進行支原體檢查,這通常包括培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法(DNA染色法)。同時,病毒類疫苗的病毒收獲液、原液也采用培養(yǎng)法檢查支原體,必要時,也可以采用指示細胞培養(yǎng)法篩選培養(yǎng)基。 此外,支原體檢測的培養(yǎng)基推薦使用支原體肉湯培養(yǎng)基和精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基等,這些培養(yǎng)基可用于檢測藥品和生物制品中的支原體。在進行支原體檢測時,需要取培養(yǎng)物樣品接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上。 因此,支原體檢測的樣本既可以是細胞,...
支原體去除的原理通常涉及以下幾個方面: 1. 抗*素作用:使用特定的抗*素制劑來抑制支原體的生長和繁殖。例如,含有喹諾酮類、四環(huán)素衍生物類和大環(huán)內(nèi)酯類抗*素的混合制劑,這些抗*素能夠抑制支原體的DNA和蛋白合成。 2. 破壞細胞膜:支原體去除劑中的抑菌肽(AMPs)成分通過破壞支原體細胞膜的完整性,導(dǎo)致支原體細胞死亡。 3. 抑制DNA復(fù)制:支原體去除劑通過抑制支原體DNA回旋酶活性,有效抑制支原體DNA的復(fù)制,從遺傳物質(zhì)著手徹底殺滅支原體。 4. 協(xié)同作用:某些支原體去除劑利用抑菌肽(AMPs)和穿膜肽(CPPs)的協(xié)同作用來除去支原體,穿膜肽能夠幫助抑菌...
支原體的預(yù)防可通過以下方式: 1. 控制污染源:通過定期檢測和去除細胞培養(yǎng)中的支原體污染,確保細胞培養(yǎng)體系內(nèi)無支原體存在,從而獲得準確有效的實驗數(shù)據(jù)。 2. 改善無菌操作技術(shù):通過提高實驗人員的操作技術(shù)和意識,避免在細胞培養(yǎng)過程中引入支原體污染。 3. 使用無菌設(shè)備和耗材:使用無菌的細胞培養(yǎng)設(shè)備和耗材,如無菌培養(yǎng)基、血清等,減少支原體污染的風險。 4. 定期消毒和清潔:對實驗室環(huán)境進行定期的消毒和清潔,包括工作臺、培養(yǎng)箱等,以減少支原體的潛在污染。 5. 使用預(yù)防性試劑:使用專門針對支原體的預(yù)防性試劑,如加入細胞培養(yǎng)基中的預(yù)防劑、超凈臺噴霧、水浴鍋預(yù)防和細胞培...
支原體去除試劑在清*支原體的過程中可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑,它通過與支原體膜特異性結(jié)合,改變支原體膜的通透性,從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會對細胞的活力和形態(tài)有一定的影響,但由于它不能穿過真核細胞的細胞膜,因此不會改變細胞的任何特性。支原體被清*后,細胞在后續(xù)的傳代過程中能快速恢復(fù)其正常的生長和增殖狀態(tài),細胞后續(xù)的生長增殖幾乎無影響。 此外,該產(chǎn)品不含抗*素,不會使支原體發(fā)生耐藥反應(yīng),細胞毒性小。然而,需要注意的是,不同細胞對支原體去除試劑的耐受程度有所差異,可以根據(jù)實驗結(jié)果適當調(diào)整細胞量和處理條件。在某些情況下,...
支原體去除試劑使用后,對支原體的檢測可能會有影響。一些支原體去除試劑通過特異性地與支原體膜結(jié)合、改變支原體膜的通透性來殺死支原體,而對真核細胞幾乎沒有影響。然而,某些情況下,去除試劑可能會對細胞的活力和形態(tài)產(chǎn)生一定的影響,尤其是在去除劑作用期間。此外,如果去除劑的效果不徹底,可能會導(dǎo)致細胞再次被支原體污染。 需要注意的是,某些支原體去除試劑可能會在去除支原體的過程中導(dǎo)致支原體膜溶解,從而釋放出支原體的DNA,這可能會在隨后的支原體核酸檢測中引起假陽性結(jié)果。因此,在去除支原體后,建議在繼續(xù)正常傳代培養(yǎng)幾代細胞后再進行支原體檢測,以確保檢測結(jié)果的準確性。 細胞培養(yǎng)支原體污染怎么...
細胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響,具體包括: 1. 細胞生長受影響:支原體污染可能導(dǎo)致細胞生長速度減慢,甚至停滯。 2. 細胞形態(tài)改變:支原體感*的細胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變,如細胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。 3. 細胞功能改變:支原體污染會影響細胞的代謝、增殖、分化等生理功能。 4. 細胞產(chǎn)物改變:支原體感*可能影響細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、細胞因子等生物活性物質(zhì)的表達和分泌。 5. 實驗結(jié)果不準確:支原體污染會干擾實驗結(jié)果的準確性,導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)不可靠。 6. 實驗重復(fù)性差:支原體污染的細胞培養(yǎng)批次間差異大,影響實驗的重復(fù)性。 ...
細胞培養(yǎng)中支原體難以徹底消滅的原因主要包括以下幾點: 1. 無細胞壁結(jié)構(gòu):支原體是沒有細胞壁的微生物,這使得許多作用于細胞壁的抗*素對支原體無效。 2. 微小體積:支原體體積小,能夠穿過常規(guī)的除菌濾膜,例如0.20微米甚至0.10微米的濾膜。 3. 隱匿性:支原體污染初期很難被察覺,它們在普通光學(xué)顯微鏡下幾乎不可見,因此細胞被支原體污染后,前期很難被發(fā)現(xiàn)。 4. 傳播途徑多樣:支原體可以通過細胞培養(yǎng)物、細胞懸液、細胞培養(yǎng)用具等途徑迅速傳播。 5. 污染源 :支原體污染源包括細胞間的交叉污染、操作人員的口腔、皮膚,以及細胞培養(yǎng)用的組分如血清、培養(yǎng)液等。...
支原體是細胞外生存的 小微生物,是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.2~0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。 1、支原體存在于我們周圍,他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中 2、可透過一般的濾膜,所以不要寄希望于過濾可以清楚支原體污染的液體 支原體對培養(yǎng)細胞的污染發(fā)生率高,據(jù)估計平均發(fā)生率在60%左右。同時又非常隱秘,早期不容易被發(fā)現(xiàn),除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。支原體因為個頭小,能穿過0.22微米濾器,并且在實驗室內(nèi)會潛在的擴散。支原體污染使得用被污染的細胞樣本做的實驗完全失去意義和價值。 支原體去除的原...
LAMP法,即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法(Loop-mediated isothermal amplification),在支原體檢測中的應(yīng)用具有以下特點和應(yīng)用場景: 1. 日常監(jiān)測:由于LAMP法的快速和簡便性,它適用于生物實驗室的日常監(jiān)測,可以及時檢測出支原體的存在,確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。 2. 疾病診斷:LAMP法已被成功應(yīng)用于SARS、禽流感、HIV等疾病的檢測中,并在2009年甲型H1N1流感事件中發(fā)揮了重要作用。 3. 臨床應(yīng)用:LAMP法在臨床樣本的檢測中顯示出了快速、高靈敏度和穩(wěn)定性,可以用于檢測實驗室樣本及臨床樣本中的支原體。 4. 多病原體檢...
支原體污染和黑膠蟲污染是兩種不同類型的細胞培養(yǎng)污染,它們具有各自的特點和區(qū)別: 支原體污染:在相差顯微鏡下,支原體呈暗色微小顆粒位于細胞表面和細胞之間。 黑膠蟲污染:在高倍鏡下,被黑膠蟲污染的細胞膜會變得模糊不清,邊界不清晰,有粗糙感。 污染的影響: 支原體污染:可能導(dǎo)致細胞增殖緩慢,甚至從培養(yǎng)器皿脫落,影響細胞的DNA、RNA及蛋白表達。 黑膠蟲污染:與細胞競爭性生長,開始時對細胞沒有什么影響,但當數(shù)量多時,細胞生長會受到影響直至死亡。 污染的來源: 支原體污染:可能來源于工作環(huán)境的污染、操作者本身、培養(yǎng)基的...
方法 靈敏度 優(yōu)勢 劣勢 培養(yǎng)法 ☆☆☆ ü 便捷 ü 便宜 ü 金標準 ü 費勞力 ü 耗時長 ...
支原體預(yù)防的主要成分通常是指用于預(yù)防支原體污染的抗*素或化學(xué)試劑。在細胞培養(yǎng)中,預(yù)防支原體污染的措施包括在培養(yǎng)基中添加抗*素,以及采取其他預(yù)防措施來保持實驗室環(huán)境的清潔和無菌操作。以下是一些用于預(yù)防支原體污染的主要成分: 1. 四環(huán)素類抗*素:這類抗*素對支原體具有抑制作用,常用于治*和預(yù)防支原體感*。 2. 大環(huán)內(nèi)酯類抗*素:例如羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素等,用于治*肺炎支原體感*。 3. 喹諾酮類藥物:如氧氟沙星、司帕沙星等,也用于治*肺炎支原體感*。 4. 其他抗*素:例如氨基糖苷類、氯霉素等,對支原體有較小的抑制作用。 支原體去除試劑使用之后,對...
檢測新鮮培養(yǎng)基是否有支原體污染,可以采用以下五種方案: 1. 培養(yǎng)法:這是一種傳統(tǒng)且可靠的方法,通過將培養(yǎng)基接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上,觀察是否有支原體生長。這種方法較為耗時,但成本較低。 2. 熒光染色法:使用特定的熒光染料(如Hoechst 33258)對細胞進行染色,然后在熒光顯微鏡下觀察。如果存在支原體污染,可以看到細胞表面或細胞間隙中支原體DNA的熒光染色。 3. PCR法:通過設(shè)計針對支原體特定序列的引物,利用PCR技術(shù)特異性擴增目標DNA。PCR產(chǎn)物通過瓊脂糖凝膠電泳進行檢測,如果出現(xiàn)條帶則表明存在支原體污染。 4. 電鏡觀察法:使...
qPCR法,即定量聚合酶鏈式反應(yīng)(Quantitative Polymerase Chain Reaction)法,是一種高度靈敏和特異的分子生物學(xué)技術(shù),用于檢測和定量DNA序列。在支原體檢測中,qPCR法的原理主要包括以下幾個步驟: 1. DNA提?。菏紫葟拇郎y樣本中提取DNA,這可能包括細胞培養(yǎng)上清液或組織樣本中的支原體DNA。 2. 設(shè)計特異性引物:針對支原體的保守DNA序列,如16S rRNA基因,設(shè)計特異性的DNA引物。 3. 熒光標記探針:使用熒光標記的探針,該探針與目標DNA序列互補,能夠在PCR擴增過程中與擴增的DNA結(jié)合。 4. Ct值確定:Ct值...
支原體去除后對細胞檢測的影響主要取決于去除方法和去除后的處理。以下是一些可能的影響: 1. 去除方法的影響:不同的支原體去除方法可能對細胞檢測產(chǎn)生不同的影響。例如,一些去除方法可能會對細胞的代謝和增殖產(chǎn)生暫時性的影響,這可能會影響某些類型的細胞檢測。 2. 去除后的處理:去除支原體后,細胞可能需要一段時間來恢復(fù)其正常的生理狀態(tài)。在這段時間內(nèi),細胞的某些特性可能與去除前不同,這可能會影響細胞檢測的結(jié)果。 3. 細胞恢復(fù)情況:如果細胞在去除支原體后能夠成功恢復(fù),那么它們在檢測中的表現(xiàn)可能會與未受污染的細胞相似。然而,如果細胞恢復(fù)不完全,可能會影響檢測結(jié)果的準確性。 4....
支原體檢測實驗方法需要考慮以下幾個關(guān)鍵點: 1. 樣本的采集與處理:確保樣本的采集和處理過程符合無菌操作規(guī)范,避免交叉污染。 2. 實驗操作的標準化:制定詳細的實驗操作流程,包括樣本接種、培養(yǎng)條件、觀察時間點等,以保證實驗的可重復(fù)性和準確性。 3. 使用適當?shù)呐囵B(yǎng)基:根據(jù)支原體的特性選擇合適的培養(yǎng)基,如支原體肉湯4. 培養(yǎng)基、精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基等,并確保培養(yǎng)基的靈敏度和特異性。 5. 設(shè)置對照組:實驗中應(yīng)包括陽性對照和陰性對照,以驗證實驗方法的有效性和排除假陽性或假陰性結(jié)果。 細胞培養(yǎng)中污染了支原體會怎么樣?南京支原體預(yù)防價格 細胞培養(yǎng)中建議使用支原體檢測的原...
LAMP法,即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification),是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測有以下特性: 快速高效:LAMP技術(shù)可以在1小時內(nèi)把幾拷貝的目的序列迅速擴增到10^9^~10^10^拷貝,擴增效率高。 簡便性:LAMP技術(shù)不需要進行模板的預(yù)變性,減少了PCR技術(shù)升降溫帶來的影響以及對昂貴、精密實驗儀器的要求,同時擴增效率高,可以在較短時間內(nèi)完成檢測。 LAMP法因其快速、高效、特異、靈敏和經(jīng)濟等優(yōu)點,已經(jīng)應(yīng)用于病原菌、寄生蟲、病毒、疾病和轉(zhuǎn)基因產(chǎn)...
一步法快速支原體檢測的原理主要基于等溫擴增技術(shù),這是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。以下是具體的步驟和原理: 1. 等溫擴增技術(shù):一步法快速支原體檢測試劑盒利用LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification,環(huán)介導(dǎo)等溫擴增)技術(shù)或類似的等溫擴增技術(shù)。這些技術(shù)允許在恒定溫度下進行DNA的快速擴增,通常在60-65°C之間。 2. 特異性引物:該方法使用設(shè)計好的特異性引物,這些引物靶向支原體DNA的保守區(qū)域。引物的設(shè)計確保了擴增過程的特異性,從而減少非目標序列的擴增。 3. 快速擴增:在適宜的條件下,等溫擴增技術(shù)可以在15...
支原體是細胞外生存的 小微生物,是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.2~0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。 1、支原體存在于我們周圍,他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中 2、可透過一般的濾膜,所以不要寄希望于過濾可以清楚支原體污染的液體 支原體對培養(yǎng)細胞的污染發(fā)生率高,據(jù)估計平均發(fā)生率在60%左右。同時又非常隱秘,早期不容易被發(fā)現(xiàn),除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。支原體因為個頭小,能穿過0.22微米濾器,并且在實驗室內(nèi)會潛在的擴散。支原體污染使得用被污染的細胞樣本做的實驗完全失去意義和價值。 細胞培養(yǎng)中支原...
細胞被支原體污染后可能會出現(xiàn)以下幾種情況: 1. 生長速度變慢:支原體污染的細胞生長速度可能會減慢,甚至停止生長。 2. 形態(tài)改變:部分細胞可能會變圓,從培養(yǎng)瓶壁脫落。有些細胞在支原體污染后,形態(tài)變化可能不明顯,但有些細胞可能會出現(xiàn)體積增大、細胞碎片增多等現(xiàn)象。 3. 培養(yǎng)液pH變化:支原體污染的細胞可能導(dǎo)致培養(yǎng)液pH值變化明顯,更換培養(yǎng)液后幾小時內(nèi)變酸(顏色變黃)。 4. 細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積:在某些情況下,細胞與細胞間隙可能出現(xiàn)膜狀沉積,影響細胞的正常生長和傳代。 5. 細胞功能受損:支原體污染可能會影響細胞的代謝和功能,如影響細胞蛋白質(zhì)、DNA、RNA的...
預(yù)防細胞培養(yǎng)過程中的支原體污染至關(guān)重要,因為一旦發(fā)生污染,可能會嚴重影響實驗結(jié)果和細胞的生長。以下是一些有效的預(yù)防措施: 1. 無菌操作:始終在無菌條件下進行細胞培養(yǎng)操作,包括使用無菌的移液器、手套和其他實驗室器材。 2. 個人防護:穿戴適當?shù)膫€人防護裝備,如實驗服、手套和口罩,以減少污染的風險。 3. 細胞培養(yǎng)室的清潔:保持實驗室和細胞培養(yǎng)室的清潔,定期進行消毒處理。 4. 培養(yǎng)箱的維護:定期清潔和消毒CO2培養(yǎng)箱,避免飛濺和溢出,并維持嚴格的清潔計劃。 5. 使用無支原體污染的試劑:使用經(jīng)過檢測確認無支原體污染的培養(yǎng)基、血清和其他添加物。 ...