溫和的高濃度樣品濃縮、脫鹽裝置 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾杯 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾裝置對(duì)于高濃度(達(dá) 百分之十)達(dá)分子溶液快速濃縮和脫鹽提供了的可行方法。做蛋白濃縮時(shí),向超濾裝置中導(dǎo)入氣壓,大于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)將被截留在容器內(nèi),水及小于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)(如鹽分)會(huì)被過(guò)濾并排出。加壓拌式設(shè)計(jì)防止?jié)饪s的樣品發(fā)生沉淀,比離心超濾溫和,對(duì)于高濃度、易沉淀樣品的進(jìn)一步濃縮同時(shí)脫鹽等應(yīng)用是比較好選擇。配套選擇的超濾膜可以滅菌并經(jīng)處理后反復(fù)使用,更為經(jīng)濟(jì)。益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。常州超濾濃縮管參數(shù)特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 高產(chǎn):...
Centrifree?過(guò)濾器 Centrifree? 過(guò)濾器擁有研究及體外診斷證書(shū)(美國(guó)適用),是為臨床研究實(shí)驗(yàn)室的樣品制備而設(shè)計(jì)的,能夠快速、高效地通過(guò)超濾去除小體積(0.15–1.0 mL)血清、血漿等生物樣品中的蛋白未結(jié)合的小分子溶質(zhì)。數(shù)分鐘之內(nèi)完成精確的分離,樣品終體積約為 10μL;不會(huì)發(fā)生樣品稀釋、pH 值變化、離子成分變化或未結(jié)合小分子溶質(zhì)濃縮等情況。這種產(chǎn)品使用的是低吸附的再生纖維素膜,親水膜和 O 型圈,不含增塑劑,確保獲得較好的樣品回收效果。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用: 分離血清、血漿等生物學(xué)樣品中未 吸附的小分子物質(zhì) 精確的藥物結(jié)合實(shí)驗(yàn)樣品制備使用 去除生物樣品中的蛋白質(zhì)等...
用超濾對(duì)分子進(jìn)行分級(jí) 通過(guò)選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實(shí)際。事實(shí)上,膜的規(guī)格描述是基于截留而非通過(guò) 的性質(zhì)。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中,采用 100k NMWL 濾膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但這時(shí)比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過(guò)濾膜, 75kDa 的分子截留率為 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留?;旌系? 溶液中的各 種成分通過(guò)膜并不像單一成分的溶液那么簡(jiǎn)單和容易。實(shí) 踐中,如果要分離兩種大分子,它們之間的分子量差異應(yīng)該達(dá)到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 規(guī)格在兩種蛋白之間,則可達(dá)到比較理想的 分離...
雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時(shí)節(jié)省過(guò)濾時(shí)間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì),表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級(jí),有時(shí)也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見(jiàn),實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí) 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過(guò)的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí),孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過(guò)率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)...
蛋白親和純化(無(wú)需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心,總耗時(shí)~75分鐘(含60分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹(shù)脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹(shù)脂。(柱床)樹(shù)脂量≥ 500μL時(shí)采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。買超濾濃縮管找益啟生物公司。無(wú)錫默...
Centrifree?過(guò)濾器 Centrifree? 過(guò)濾器擁有研究及體外診斷證書(shū)(美國(guó)適用),是為臨床研究實(shí)驗(yàn)室的樣品制備而設(shè)計(jì)的,能夠快速、高效地通過(guò)超濾去除小體積(0.15–1.0 mL)血清、血漿等生物樣品中的蛋白未結(jié)合的小分子溶質(zhì)。數(shù)分鐘之內(nèi)完成精確的分離,樣品終體積約為 10μL;不會(huì)發(fā)生樣品稀釋、pH 值變化、離子成分變化或未結(jié)合小分子溶質(zhì)濃縮等情況。這種產(chǎn)品使用的是低吸附的再生纖維素膜,親水膜和 O 型圈,不含增塑劑,確保獲得較好的樣品回收效果。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用: 分離血清、血漿等生物學(xué)樣品中未 吸附的小分子物質(zhì) 精確的藥物結(jié)合實(shí)驗(yàn)樣品制備使用 去除生物樣品中的蛋白質(zhì)等...
Amicon? Pro純化超濾管簡(jiǎn)明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時(shí)~100分鐘(含65分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹(shù)脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無(wú)菌處理...
Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而精細(xì),蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少? 按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對(duì)滅菌處理的具體方法沒(méi)有做相關(guān)的測(cè)試,所以無(wú)法提供更進(jìn)一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計(jì),不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用...
操作模式 常規(guī)與切向流 : 常規(guī)溶液過(guò)濾(NFF)中液體在壓力或真空驅(qū)動(dòng)下直接流 過(guò)膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過(guò)膜流出。NFF 常 用于無(wú)菌過(guò)濾、澄清預(yù)過(guò)濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過(guò)濾(TFF) 液體流過(guò)時(shí)與膜表面呈一定角度,被膜阻擋的大顆粒物不會(huì)累積在膜表 面,而且還會(huì)被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,而現(xiàn)在,TFF 技術(shù)被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設(shè)計(jì)中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。超濾濃縮管的系列有很多。徐匯區(qū)默克離心濃...
多臺(tái)同時(shí)操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺(tái)操作連接裝置可以同時(shí)運(yùn)行多達(dá)3個(gè)超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對(duì)在有機(jī)溶劑中的樣品進(jìn)行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會(huì)降低碳氟化合物材質(zhì) O 形圈的使用壽命。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學(xué)兼容性超濾膜 可預(yù)裝膜后進(jìn)行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預(yù)切膜片 應(yīng)用: 帶有有機(jī)成分的樣品的濃縮、換液對(duì)于不同的需求我們...
離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時(shí)樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時(shí),原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時(shí)很多樣而復(fù)雜,過(guò)濾的過(guò)程中很重要的一點(diǎn)是操作過(guò)程不應(yīng)給樣品帶來(lái)新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請(qǐng)參考產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)或垂詢技術(shù)支持專線 ?;厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),但膜的很多特性會(huì)對(duì)這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截...
超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學(xué)性質(zhì)、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會(huì)透過(guò),因此在大分子樣品處理中得到了應(yīng)用。膠狀或微粒狀物質(zhì)也能夠被截留。UF膜既可以用于透過(guò)樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經(jīng)過(guò)膜處理可以達(dá)到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對(duì)于樣品更溫和,沒(méi)有發(fā)生容易導(dǎo)致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時(shí)可以完成對(duì)溶質(zhì)的除鹽。超濾的...
如果能確保用同樣的超濾管對(duì)其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個(gè)目的蛋白的原因。有時(shí)蛋白會(huì)因其本身的一些特性(構(gòu)象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級(jí)別的超濾管(如原本選用30k,此時(shí)可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過(guò)液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來(lái)確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請(qǐng)參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問(wèn)題的解釋。Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽!江蘇Merck超濾濃縮管聯(lián)系電話高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一...
核苷酸截留分子量(NCO) 超濾膜的 NMWL 是用球形蛋白標(biāo)定的,適合各種蛋白研究,但在核酸 和多糖純化時(shí)則要考慮更多因素。這些分子的棒狀的三維結(jié)構(gòu)容易漏 過(guò),相對(duì)于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更小)。所以選擇 濾膜是更多考慮的是核苷酸長(zhǎng)度而非分子量。 濃差極化 濃差極化實(shí)質(zhì)是溶質(zhì)累積在膜表面造成的堵塞,產(chǎn)生除了膜本身截留分 子量以外的過(guò)濾限制。當(dāng)溶質(zhì)濃度較高時(shí),會(huì)形成相當(dāng)于第二層濾膜作 用的膠體層,干擾分子通過(guò)濾膜,同時(shí)降低流速。pH 值、緩沖液的成分 也會(huì)影響目的分子的狀態(tài)而使?jié)獠顦O化現(xiàn)象加劇或減輕。超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。青浦區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管哪家...
離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時(shí)樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時(shí),原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時(shí)很多樣而復(fù)雜,過(guò)濾的過(guò)程中很重要的一點(diǎn)是操作過(guò)程不應(yīng)給樣品帶來(lái)新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請(qǐng)參考產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)或垂詢技術(shù)支持專線 ?;厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),但膜的很多特性會(huì)對(duì)這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ...
特別推薦應(yīng)用(提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告作為參考) Microcon?超濾管: Microcon?PCR 級(jí)超濾管: ? 法醫(yī)鑒定分析的DNA樣品制備 ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 體外合成mRNA的純化 ? 以人mRNA或總RNA制備熒光DNA探針 ? 游離標(biāo)記物的去除 ? 納克級(jí)核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 ? 替代乙醇沉淀,離心法高效濃縮基因組DNA 應(yīng)用指南 典型應(yīng)用 肽及生長(zhǎng)因子濃縮 蛋白濃縮與脫鹽 電泳等操作前的蛋白樣品濃縮 HPLC前去除蛋白 組織培養(yǎng)抽提物和細(xì)胞裂解液中大分子成分的純化 生物樣本濃縮(抗原,抗體,酶等) 從含有SD...
通量(超濾效率)及其影響因素 超濾過(guò)程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積,使用高 NMWL 濾膜可以增加通量,但同時(shí) 會(huì)降低回收率。選擇膜和裝置時(shí)需要同時(shí)考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多,包括: 壓力:較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進(jìn)行超濾時(shí),流量隨著跨膜壓力 (TMP)的增大而增加。正壓條件下操作,如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯, 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***,通量會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái),甚 至可能隨著壓力的增加而降低。超濾濃縮管哪家比較靠譜?嘉定區(qū)Merck離心濃縮管商家抗體標(biāo)記 適合25-20...
默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計(jì),一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、核酸、病-毒-或顆粒物,抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品,Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn)化,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,使研究者處理樣品時(shí)倍感輕松。 這款A(yù)micon Ultra 15 mL離心式過(guò)濾器借助10 kDa NMWL的濾膜可以進(jìn)行蛋白濃縮。Amicon Ultra離心式過(guò)濾器是蛋白純化、蛋白濃縮和脫鹽的理想工具。 Amicon? Ultra 超濾管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn): 有效濃縮同時(shí)保證高的蛋白回收率 1.合理的死體積設(shè)計(jì) 2...
近年來(lái)隨著分離純化技術(shù)的提高,關(guān)于外泌小體的研究成果頗豐;這進(jìn)一步吸引了越來(lái)越多領(lǐng)域的課題將外泌體納入研究對(duì)象。研究的前提是方便、高效、標(biāo)準(zhǔn)化地分離純化外泌小體。經(jīng)過(guò)近20年的探索,已經(jīng)建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實(shí)踐中大家逐漸認(rèn)識(shí)到根據(jù)下游研究對(duì)樣品的要求,以及起始樣品的規(guī)模、數(shù)量,可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設(shè)備和試劑盒,對(duì)操作人員也沒(méi)有特別的經(jīng)驗(yàn)要求,超濾法后來(lái)居上,成為實(shí)驗(yàn)室中制備外泌體的通用方法。益啟生物公司專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。嘉定區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系方式微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì),表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾...
用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預(yù)切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來(lái)對(duì)較為稀釋的溶液進(jìn)行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的,微觀結(jié)構(gòu)緊密,確保對(duì)蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規(guī)截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對(duì)于大體積、高濃度(如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL)的樣品進(jìn)行脫鹽和濃縮,Biomax?聚苯醚砜(PES)超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養(yǎng)基等,都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *...
上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹(shù)脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化。 用Protei...
Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮(3kDa 細(xì)胞色素 C, 10kDa 細(xì)胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG), 測(cè)定在離心一定時(shí)間后的回收率。數(shù)據(jù)顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產(chǎn)品,默克密理博生命科學(xué)部網(wǎng) 站上提供選擇指引,您需要按照提 示進(jìn)行選擇,**終會(huì)選出一款產(chǎn)品。 為每次實(shí)驗(yàn)選擇**合適的, 您也能快速成為超濾高手!超濾濃縮管直銷公司。浦東新區(qū)默克...
截留 截留有時(shí)也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導(dǎo)致排阻增加。比如,有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化,而另一些則發(fā)生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn),我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先,再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。嘉定區(qū)離心濃縮管訂購(gòu)用超濾對(duì)分子進(jìn)行分級(jí) 通過(guò)選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在...
多臺(tái)同時(shí)操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺(tái)操作連接裝置可以同時(shí)運(yùn)行多達(dá)3個(gè)超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對(duì)在有機(jī)溶劑中的樣品進(jìn)行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會(huì)降低碳氟化合物材質(zhì) O 形圈的使用壽命。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學(xué)兼容性超濾膜 可預(yù)裝膜后進(jìn)行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預(yù)切膜片 應(yīng)用: 帶有有機(jī)成分的樣品的濃縮、換液您知道益啟生物公司...
特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 高產(chǎn):沒(méi)有樣品轉(zhuǎn)移,損失更少 溫和:特別的滲濾設(shè)計(jì)使換液過(guò)程更溫和 快速:從細(xì)胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進(jìn)行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液超濾濃縮管直銷公司。徐匯區(qū)默克超濾濃縮管參數(shù)Millipore超濾濃縮管設(shè)有反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)...
近年來(lái)隨著分離純化技術(shù)的提高,關(guān)于外泌小體的研究成果頗豐;這進(jìn)一步吸引了越來(lái)越多領(lǐng)域的課題將外泌體納入研究對(duì)象。研究的前提是方便、高效、標(biāo)準(zhǔn)化地分離純化外泌小體。經(jīng)過(guò)近20年的探索,已經(jīng)建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實(shí)踐中大家逐漸認(rèn)識(shí)到根據(jù)下游研究對(duì)樣品的要求,以及起始樣品的規(guī)模、數(shù)量,可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設(shè)備和試劑盒,對(duì)操作人員也沒(méi)有特別的經(jīng)驗(yàn)要求,超濾法后來(lái)居上,成為實(shí)驗(yàn)室中制備外泌體的通用方法。益啟生物公司作為上海一家專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。閔行區(qū)默克2ml超濾濃縮管參數(shù)截留 截留有時(shí)也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子...
提供的超濾管是沒(méi)有經(jīng)過(guò)去內(nèi)***處理的,同時(shí)由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過(guò)程中是無(wú)法去除的。可在實(shí)驗(yàn)前通過(guò)先用0.5M NaOH預(yù)清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對(duì)Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過(guò)的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對(duì)于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng),對(duì)于這種情況,可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對(duì)超濾管進(jìn)行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra ...
將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內(nèi)加入預(yù)先準(zhǔn)備好的1.5 mL含有染料的反應(yīng)混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優(yōu)化選做:將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時(shí)濃縮。 8. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標(biāo)記好的抗體。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì),滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-20...