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蘇州細胞支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨

來源: 發(fā)布時間:2024-06-15

支原體是細胞外生存的 小微生物,是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.2~0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。
1、支原體存在于我們周圍,他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中
2、可透過一般的濾膜,所以不要寄希望于過濾可以清楚支原體污染的液體
支原體對培養(yǎng)細胞的污染發(fā)生率高,據(jù)估計平均發(fā)生率在60%左右。同時又非常隱秘,早期不容易被發(fā)現(xiàn),除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。支原體因為個頭小,能穿過0.22微米濾器,并且在實驗室內(nèi)會潛在的擴散。支原體污染使得用被污染的細胞樣本做的實驗完全失去意義和價值。
支原體去除的原理是什么?蘇州細胞支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨

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預(yù)防細胞培養(yǎng)過程中的支原體污染至關(guān)重要,因為一旦發(fā)生污染,可能會嚴重影響實驗結(jié)果和細胞的生長。以下是一些有效的預(yù)防措施:
1. 無菌操作:始終在無菌條件下進行細胞培養(yǎng)操作,包括使用無菌的移液器、手套和其他實驗室器材。
2. 個人防護:穿戴適當(dāng)?shù)膫€人防護裝備,如實驗服、手套和口罩,以減少污染的風(fēng)險。
3. 細胞培養(yǎng)室的清潔:保持實驗室和細胞培養(yǎng)室的清潔,定期進行消毒處理。
4. 培養(yǎng)箱的維護:定期清潔和消毒CO2培養(yǎng)箱,避免飛濺和溢出,并維持嚴格的清潔計劃。
5. 使用無支原體污染的試劑:使用經(jīng)過檢測確認無支原體污染的培養(yǎng)基、血清和其他添加物。
6. 細胞的檢測:定期對細胞進行支原體污染的檢測,尤其是在引入新的細胞系或傳代細胞之前。
7. 培養(yǎng)基和試劑的過濾:使用0.22μm或更小孔徑的濾膜過濾所有細胞培養(yǎng)用液體,以阻止支原體的通過。
8. 使用抗*素預(yù)防:雖然抗*素不能作為常規(guī)預(yù)防手段,但在某些情況下,可以考慮使用抗*素作為預(yù)防措施,尤其是在高風(fēng)險操作中。
杭州細胞支原體檢測方法LAMP法支原體去除試劑會影響細胞的生長狀態(tài)嘛?

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支原體去除試劑使用后,對支原體的檢測可能會有影響。一些支原體去除試劑通過特異性地與支原體膜結(jié)合、改變支原體膜的通透性來殺死支原體,而對真核細胞幾乎沒有影響。然而,某些情況下,去除試劑可能會對細胞的活力和形態(tài)產(chǎn)生一定的影響,尤其是在去除劑作用期間。此外,如果去除劑的效果不徹底,可能會導(dǎo)致細胞再次被支原體污染。

需要注意的是,某些支原體去除試劑可能會在去除支原體的過程中導(dǎo)致支原體膜溶解,從而釋放出支原體的DNA,這可能會在隨后的支原體核酸檢測中引起假陽性結(jié)果。因此,在去除支原體后,建議在繼續(xù)正常傳代培養(yǎng)幾代細胞后再進行支原體檢測,以確保檢測結(jié)果的準確性。

方法

靈敏度

優(yōu)勢

劣勢

培養(yǎng)法

☆☆☆

ü 便捷

ü 便宜

ü 金標準

ü 費勞力

ü 耗時長

ü 需要特定的培養(yǎng)基

ü 特定支原體種類需要特定的培養(yǎng)基

DNA染色

(DAPI or Hoescht)

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 可能難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 可能假陽性可能性

間接染色

☆☆☆

ü 迅速

ü 便宜

ü 易檢測

ü 費時

ü 需要細胞系指示

ELISA

☆☆

ü 迅速

ü 客觀,易判讀結(jié)果

ü 可以鑒別支原體種屬

ü 受抗體限制

ü 價格高

免疫染色

☆☆

ü 迅速

ü 可檢測支原體種屬

ü 價格略高

ü 可檢測的支原體種屬有限

放射自顯影

☆☆

ü 迅速

ü 難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 費勞力

生物發(fā)光

☆☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

PCR

☆☆☆

ü 便宜

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

Real-Time PCR

☆☆☆

ü 便捷

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 結(jié)果可靠

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

LAMP

☆☆

ü 便捷

ü 無需DNA提取

ü *需10min左右的實驗操作時間

ü 具有特異性

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性 支原體的檢測方法有哪些?

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細胞被支原體污染后可能會出現(xiàn)以下幾種情況:
1. 生長速度變慢:支原體污染的細胞生長速度可能會減慢,甚至停止生長。
2. 形態(tài)改變:部分細胞可能會變圓,從培養(yǎng)瓶壁脫落。有些細胞在支原體污染后,形態(tài)變化可能不明顯,但有些細胞可能會出現(xiàn)體積增大、細胞碎片增多等現(xiàn)象。
3. 培養(yǎng)液pH變化:支原體污染的細胞可能導(dǎo)致培養(yǎng)液pH值變化明顯,更換培養(yǎng)液后幾小時內(nèi)變酸(顏色變黃)。
4. 細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積:在某些情況下,細胞與細胞間隙可能出現(xiàn)膜狀沉積,影響細胞的正常生長和傳代。
5. 細胞功能受損:支原體污染可能會影響細胞的代謝和功能,如影響細胞蛋白質(zhì)、DNA、RNA的合成。
6. 染色體畸變:支原體污染可能會導(dǎo)致細胞染色體斷裂、數(shù)目減少,出現(xiàn)雙著絲點染色體、環(huán)狀染色體等異常。
7. 免疫細胞產(chǎn)量受影響:對于巨噬細胞等免疫細胞的培養(yǎng),支原體污染可能會抑制干擾素的合成和降低其活性。
8. 細胞培養(yǎng)環(huán)境的污染:污染的細胞可能成為實驗室的污染源,影響工作區(qū)域、培養(yǎng)箱和液氮罐等。
9. 實驗結(jié)果的不確定性:使用被支原體污染的細胞進行實驗可能會得到不準確的結(jié)果,影響科研的可靠性。
支原體污染和黑膠蟲污染有什么區(qū)別?杭州細胞培養(yǎng)支原體去除現(xiàn)貨

細胞庫支原體檢測的必要性?蘇州細胞支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨

巢式PCR法和一步法恒溫支原體檢測試劑盒各有優(yōu)缺點,具體哪個更好要根據(jù)實驗需求和條件來決定。
1. 巢式PCR法通過兩輪PCR擴增來提高檢測的特異性和靈敏度。它的優(yōu)點是:
2. 特異性強,可以減少假陽性結(jié)果。
3. 靈敏度高,可以檢測到很低數(shù)量的支原體。
4. 通過設(shè)計多對引物,可以覆蓋多種支原體種類。
不過巢式PCR法也存在一些缺點:
1. 操作復(fù)雜,需要兩輪PCR反應(yīng)。
2. 容易受到PCR抑制物的影響,產(chǎn)生假陰性結(jié)果。
3. 反應(yīng)后需要開蓋電泳檢測,增加了污染的風(fēng)險。
而一步法恒溫支原體檢測試劑盒采用等溫擴增技術(shù),具有以下優(yōu)點:
1. 操作簡便,只需一次反應(yīng)即可完成檢測。
2. 靈敏度和特異性也很高,可檢出10個拷貝以上的支原體污染。
3. 反應(yīng)后無需開蓋,減少了污染的風(fēng)險。
但一步法試劑盒的缺點是:
1. 靈敏度雖高,但可能略低于巢式PCR法。
2. 價格可能比巢式PCR試劑盒要高。
蘇州細胞支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨

上海世途科生物(CYTOCH)是一家生命科學(xué)上游工具類企業(yè)。聚焦于細胞生物學(xué)相關(guān)的化學(xué)技術(shù)及相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)與生產(chǎn),產(chǎn)品覆蓋細胞培養(yǎng)產(chǎn)品如胎牛血清,支原體檢測,支原體去除試劑等,細胞轉(zhuǎn)染產(chǎn)品如轉(zhuǎn)染試劑,及細胞檢測產(chǎn)品如增殖凋亡檢測,報告基因等多個科研場景,給終端客戶提供良好的產(chǎn)品以及服務(wù)。

CYTOCH世途科生物正穩(wěn)步前行,致力于將自己打造成為全球客戶信賴的中國生命科學(xué)工具品牌,助力全球科研工作者在生命科學(xué)的探索之旅中不斷取得突破。