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福建褐藻寡糖檢測方法

來源: 發(fā)布時間:2023-03-02

糖類物質(zhì)按照分子聚合度的大小可以分為單糖、寡糖和多糖。由一個分子構(gòu) 成的糖稱為單糖,一般來說2~20個分子構(gòu)成的短鏈糖苷稱為寡糖或者低聚糖,100 個以上的稱為多糖。寡糖可以由多糖通過 酶解、酸水解和氧化降解等方法而獲得,制取比較方便,來源也非常普遍,結(jié)構(gòu) 和功能也各不相同,在應用中無毒無污染,在環(huán)境中可以自行降解,已經(jīng)證明, 寡糖具有多種生物活性,能夠調(diào)節(jié)植物的生長,誘導植物抗逆性的產(chǎn)生,目前, 寡糖類誘抗劑的研究已成為植物誘抗劑研究的熱點。寡糖主要的構(gòu)成單元為五碳糖和六碳糖,其中以六碳糖居多。即葡萄糖、半 乳糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖等。有這些單糖經(jīng)過聚合以直鏈或者支鏈 的形式形成多種結(jié)構(gòu)和功能各異的多糖。據(jù)報道,目前已經(jīng)確定的寡糖已有上千 種。動植物的結(jié)構(gòu)多糖具有非常復雜的結(jié)構(gòu),在合適的條件下又可以進行降解, 產(chǎn)生許多結(jié)構(gòu)不同、大小不一的寡糖片段,具有多種功能活性,Albersheim 等(1985)將這些具有多種生物活性的寡糖被統(tǒng)稱為寡糖素。褐藻寡糖是一種由褐藻多糖(褐藻膠)經(jīng)過裂合酶降解而獲得的小分子量片段。福建褐藻寡糖檢測方法

    褐藻寡糖在植物生長中的使用,可以增強植物對外界環(huán)境的適應能力,對提高作物產(chǎn)量及品質(zhì)也具有非常重要的意義,同時褐藻寡糖本身在環(huán)境中自然降解,無殘留無污染,可以減少化肥和農(nóng)藥的使用,提高了環(huán)保效益。由于褐藻寡糖是由褐藻膠降解得到的小分子量片段,不同的降解方法或不同的降解酶會導致褐藻寡糖的分子量大小不同,分子量大小的不同可能會在促進植物生長方面有不同的效果。而目前有關于褐藻寡糖促進植物生長的研究比較少,且目前未有關于不同分子量褐藻寡糖促進植物生長的報道。黃瓜是我國重要的蔬菜作物,促進生長的環(huán)保肥料的研發(fā)和應用對黃瓜的生產(chǎn)實踐具有重要的意義。本研究通過探究不同分子量的褐藻寡糖在促進黃瓜幼苗的生長方面的作用,旨在發(fā)掘褐藻寡糖更多的生物功能。 福建褐藻寡糖檢測方法褐藻寡糖能夠與植物的細胞壁進行結(jié)合,又可以穿過細胞壁進入細胞內(nèi)部與細胞膜進行結(jié)合。

褐藻寡糖對POD及其同工酶的影響POD是植物體內(nèi)重要抗逆酶類之一,能夠催化乙烯生物合成,參與氧自由基消除反應,其活力高低通常是表征植物抗逆性能關鍵指標之一。噴施ADO后進行低溫脅迫,濃度為0.05%,0.20%,0.30%ADO組能夠顯著提高POD活力,同工酶譜帶寬度增加,顏色加深,表明POD含量受到ADO誘導而增加;并且0.20%和0.30%濃度組還能夠誘導產(chǎn)生POD同工酶新譜帶,以0.20%濃度ADO誘導效果好;0.10%濃度ADO組24h內(nèi)POD變化幅度較小且處于較低水。48h后迅速升高,表明葉片內(nèi)氧自由基含量升高,細胞開始受到損傷;高濃度1.00%ADO組隨低溫脅迫時間延長細胞損傷加劇,POD活力不斷降低。

褐藻寡糖對煙C葉片葉綠素含量的影響葉綠素是高等植物進行光合作用的主要成分,葉綠素損失或者破壞會嚴重影響植物生長發(fā)育進程,在某種程度上葉綠素含量多少表征著植物健康程度。圖3和圖4是煙C葉片中葉綠素a和葉綠素b在噴施褐藻寡糖后的變化結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn):經(jīng)過6h低溫脅迫,水處理組葉綠素a和b含量分別下降了23.9%和6.0%,隨著時間延長,2種葉綠素含量繼續(xù)減少,48h后分別只有對照的51.2%和78.3%,說明在低溫脅迫下,水處理組葉綠素受到低溫損傷破壞,且隨著時間延長,破壞不斷加劇。在2種葉綠素中,葉綠素a比葉綠素b更容易受到低溫破壞。噴施了0.05%~0.30%褐藻寡糖后進行低溫脅迫,煙C葉片葉綠素a和b含量比水處理組有不同程度升高,表明此濃度范圍內(nèi)寡糖能夠減輕低溫對葉綠素的損傷,其中以0.20%寡糖溶液效果明顯,但0.10%褐藻寡糖處理組在48h時葉綠素a和b的含量都有較大幅度下降,表明葉綠素受到破壞損傷;高濃度1.00%褐藻寡糖對煙C起破壞作用,與對照組相比,葉綠素a和b含量都有較大幅度減少,隨時間延長,二者含量繼續(xù)降低,表明煙C葉綠素損傷加劇。褐藻寡糖與作物細胞作用后還可以在細胞的信號轉(zhuǎn)導過程中,對細胞的生物活性進行調(diào)節(jié),增強植物抗病能力。

褐藻寡糖已被 證實對草本植物具有明顯的提質(zhì)、抗逆效果,如水稻、小麥等(張運紅等, 2016b; 張運紅等, 2017; 荊華和王 康健, 2018, 北方水稻, 48(3): 22-24.)。褐藻寡糖的抗逆機理推測為:褐藻寡糖通過蛋白質(zhì)磷酸化與去磷酸化, 使細胞核內(nèi)相關抗逆基因激發(fā),提高抗逆酶系活力,進而促進木質(zhì)素合成、植保素合成和脅迫激S產(chǎn)生, 調(diào)節(jié)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的產(chǎn)生(游離脯氨酸, 可溶性糖等)。通過滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)降低活性氧及質(zhì)膜過氧化,并維 持細胞滲透壓穩(wěn)定,進而提高翅堿蓬的抗鹽脅迫能力。褐藻寡糖水溶性好,易于被吸收利用,也是重要的信號分子,能夠參與植物的生長調(diào)節(jié)和誘導抗病的過程。浙江褐藻寡糖 4糖

褐藻寡糖誘導植物抗病毒病是AOS促進植物體內(nèi)SA含量增加,促使植物體內(nèi)活性氧的產(chǎn)生,增強植物抵抗病毒。福建褐藻寡糖檢測方法

褐藻寡糖對煙C細胞內(nèi)游離脯氨酸含量的影響研究發(fā)現(xiàn),幾乎所有逆境脅迫都能夠造成植物體內(nèi)游離脯氨酸積累。在植物體內(nèi),脯氨酸是作為1種滲透保護劑參與植物抗逆過程,緩解植物因低溫傷害造成的滲透脅迫,因此檢測植物體內(nèi)游離內(nèi)脯氨酸含量,可以在一定程度上判斷植物遭受逆境脅迫危害程度。圖5是煙C葉片游離脯氨酸含量變化。由圖可知,水處理組經(jīng)低溫脅迫后,游離脯氨酸含量短時間內(nèi)劇烈增加,6h時為空白對照的4倍,隨著低溫處理時間延長,游離脯氨酸積累加劇,48h后是空白對照的11.8倍。噴施寡糖后進行低溫脅迫,0.05%~0.30%褐藻寡糖能夠明顯降低煙草體內(nèi)游離脯氨酸積累,0.10%褐藻寡糖在24h以內(nèi)效果比較好,但48h時游離脯氨酸含量明顯升高。1.00%褐藻寡糖短時間內(nèi)使煙C葉片內(nèi)游離脯氨酸含量劇烈增加,隨著時間延長積累不斷加劇,表明較高濃度褐藻寡糖溶液會對煙C細胞產(chǎn)生毒副作用,低溫下更加劇了細胞損傷破壞。福建褐藻寡糖檢測方法

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