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河南醫(yī)藥級褐藻寡糖

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-08

褐藻寡糖已被 證實(shí)對草本植物具有明顯的提質(zhì)、抗逆效果,如水稻、小麥等(張運(yùn)紅等, 2016b; 張運(yùn)紅等, 2017; 荊華和王 康健, 2018, 北方水稻, 48(3): 22-24.)。褐藻寡糖的抗逆機(jī)理推測為:褐藻寡糖通過蛋白質(zhì)磷酸化與去磷酸化, 使細(xì)胞核內(nèi)相關(guān)抗逆基因激發(fā),提高抗逆酶系活力,進(jìn)而促進(jìn)木質(zhì)素合成、植保素合成和脅迫激S產(chǎn)生, 調(diào)節(jié)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的產(chǎn)生(游離脯氨酸, 可溶性糖等)。通過滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)降低活性氧及質(zhì)膜過氧化,并維 持細(xì)胞滲透壓穩(wěn)定,進(jìn)而提高翅堿蓬的抗鹽脅迫能力。褐藻寡糖作為激發(fā)子與植物細(xì)胞結(jié)合后相互作用,引發(fā)植物的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,植物細(xì)胞膜發(fā)生電位變化。河南醫(yī)藥級褐藻寡糖

    對初步純化的褐藻膠裂解酶進(jìn)行了酶學(xué)性質(zhì)研究,酶的適反應(yīng)條件為50℃、pH8,在4~40℃、pH6~8范圍內(nèi)酶活力較穩(wěn)定;Ca2+、Mg2+和Fe2+等離子對該酶有促進(jìn)作用,EDTA、Ba2+、Zn2+等有抑制作用。通過優(yōu)化獲得褐藻膠的好酶解條件,在底物濃度、加酶量、體系、45℃條件下反應(yīng)32h時(shí),還原糖生成量為。以提取的褐藻多糖為原材料,按照此酶解工藝大量制備褐藻寡糖,通過Bio-GelP2凝膠色譜柱分離純化,得到不同聚合度的7個(gè)寡糖組分F1-F7,TLC分析結(jié)果顯示,其聚合度在1-7之間。去除自由基結(jié)果表明,褐藻多糖和寡糖都具有較強(qiáng)的抗氧化活性。自由基去除率隨著糖濃度的增加而增強(qiáng),在寡糖濃度、多糖濃度±±。多糖、寡糖濃度為±±。在相對濕度為85%和62%的環(huán)境下,褐藻多糖和褐藻寡糖都表現(xiàn)出較強(qiáng)的吸濕能力,褐藻寡糖更佳。在干燥環(huán)境下,褐藻多糖和寡糖都表現(xiàn)出很強(qiáng)的保濕效果,36h時(shí)褐藻寡糖的保濕率達(dá)到。抑菌結(jié)果顯示,褐藻寡糖對白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌均具有較好的抑菌作用,褐藻多糖對白色念珠菌具有抑菌效果,對另3種細(xì)菌無抑制。 山西褐藻寡糖和褐藻酸寡糖區(qū)別褐藻寡糖在生命體內(nèi)具有重要的作用,其作為信號(hào)分子對植物的誘導(dǎo)抗逆和生長調(diào)節(jié)作用正逐步的深入。

    褐藻寡糖不僅可促進(jìn)植物的生長,而且可提高植物對病害的抵抗力(Otterleietal.,1991)。王松(2003)利用沸水煮提的方法從海帶中得到褐藻酸鈉后,然后再經(jīng)過酸解和海螺酶降解得到聚合度為8-20的褐藻寡糖。將此褐藻寡糖應(yīng)用于抗花葉病毒的研究。發(fā)現(xiàn)在處理4d后抗性開始提高,第6d時(shí)誘導(dǎo)抗病性達(dá)到高,并且以濃度為1000μg/ml的褐藻寡糖的誘導(dǎo)效果好。由于植物誘導(dǎo)抗逆領(lǐng)域關(guān)于褐藻寡糖的研究較少,因此開發(fā)褐藻寡糖在植物誘導(dǎo)抗逆領(lǐng)域中的應(yīng)用,對于豐富褐藻寡糖的生物功能,開發(fā)具有誘導(dǎo)抗逆活性的褐藻寡糖片段,對增強(qiáng)植物對環(huán)境的適應(yīng)能力,提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)具有十分重要的意義。海洋活性寡糖的開發(fā)與利用已成為利用海洋資源進(jìn)行高值化開發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)之一。對海洋的特殊環(huán)境適應(yīng),使多種海洋生物具有獨(dú)特的多糖組成,利用多種手段對海洋多糖進(jìn)行降解,可以獲得種類繁多,結(jié)構(gòu)各異的寡糖片段,由于其結(jié)構(gòu)和組成的差異,寡糖片段內(nèi)攜帶大量不同的信息,具有不同的功能活性。尤其是寡糖還可以作為誘抗劑能夠誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗逆性能,此外寡糖還能夠調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育,因此海洋寡糖由于其獨(dú)特的組成和生物活性,已成為目前植物生長調(diào)節(jié)與誘導(dǎo)抗逆研究的熱點(diǎn)。

探討褐藻寡糖作用機(jī)理, 將褐藻寡糖溶液均勻噴施到煙C葉面后置 于(4±1)℃下進(jìn)行低溫脅迫, 間隔不同時(shí)間檢測相關(guān)指標(biāo)。 研究發(fā)現(xiàn), 濃度是影響褐藻寡糖抗凍性能的重要因素。 0 .05%, 0.20 %和 0.30 %褐藻寡糖具有誘導(dǎo)激發(fā)因子作用, 能夠誘導(dǎo)煙C CAT 、SOD 和 POD 活力提高, 去除體內(nèi)產(chǎn)生的氧 自由基, 保護(hù)細(xì)胞膜和葉綠素結(jié)構(gòu), 減少煙C葉片損傷, 提高煙C耐低溫能力, 其中以 0 .20 %褐藻寡糖誘導(dǎo)效果比較好; 0 .10%褐藻寡糖具有抗凍保護(hù)劑作用, 在 24 h 內(nèi)煙C各項(xiàng)指標(biāo)均沒有明顯變化, 可保護(hù)細(xì)胞免受低溫傷害, 但 48 h 時(shí)凍壞指標(biāo)增強(qiáng), 其保護(hù)作用減弱或者消失;高濃度 1 .00 %褐藻寡糖具有毒副作用, 在煙C細(xì)胞表面形成較強(qiáng)滲透勢, 胞內(nèi)物 質(zhì)外滲嚴(yán)重, 煙C細(xì)胞結(jié)構(gòu)受到破壞, 加速低溫下煙C葉片損傷。 褐藻寡糖使作物幼苗的生物量升高,影響作物的生理指標(biāo)如丙二醛(MDA)含量降低,相關(guān)抗氧化酶活性升高。

褐藻寡糖是褐藻膠的降解產(chǎn)物,由2~10個(gè)單糖通過糖苷鍵結(jié)合而成,具有溶解性好,穩(wěn)定性強(qiáng)等特點(diǎn)。褐藻膠主要來源于海帶、馬尾藻等藻類,是由β-D-甘露糖醛酸和α-L-古羅糖醛酸通過1-4糖苷鍵連接形成的陰離子酸性多糖。經(jīng)過多年研究發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖在農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)等多個(gè)方面都具有重要的應(yīng)用價(jià)值和研究意義,尤其在在農(nóng)業(yè)方面,褐藻寡糖對經(jīng)濟(jì)作物有較好的應(yīng)用效果。在增產(chǎn)方面,應(yīng)用褐藻寡糖于黃瓜、小麥,、玉米、水稻等多種農(nóng)作物,可明顯促進(jìn)作物生長,增加產(chǎn)量;在種子萌發(fā)方面,褐藻寡糖可促進(jìn)大豆、高粱、豌豆等種子的萌發(fā),提高萌發(fā)率和萌發(fā)勢等;在抗逆方面,施用褐藻寡糖可提高水稻的抗病蟲害能力,同時(shí)提高幼苗的鎘脅迫抗性,提高小麥的抗干旱脅迫等。翅堿蓬常被用于鹽堿地的生態(tài)工程建設(shè)中,但是在東營黃河三角洲地區(qū)的實(shí)際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn),翅堿蓬在種植中存在成活率低的問題,尤其是幼苗移植生長時(shí)期,幼苗后續(xù)成活率低,人力物力財(cái)力投入成本較高。推測原因?yàn)橐浦埠蟮挠酌鐚}堿地環(huán)境難以適應(yīng),抗逆性較差。因此如何提高翅堿蓬的幼苗后續(xù)成活率和抗逆性是當(dāng)前研究的重點(diǎn)問題。褐藻寡糖已被證實(shí)對草本植物具有明顯的提質(zhì)、抗逆效果,如水稻、小麥等。褐藻寡糖的結(jié)合是與膜上的蛋白有關(guān)。通過封閉細(xì)胞膜上的鈣離子通道,對其進(jìn)行阻斷后結(jié)合寡糖。河南醫(yī)藥級褐藻寡糖

褐藻寡糖是一種由褐藻多糖(褐藻膠)經(jīng)過裂合酶降解而獲得的小分子量片段。河南醫(yī)藥級褐藻寡糖

    寡糖片段的比對選擇:對來源于植物細(xì)胞壁的寡糖-果膠寡糖、植物致病病菌細(xì)胞壁或蝦蟹殼的寡糖-殼寡糖和海洋藻類的寡糖-褐藻寡糖進(jìn)行促進(jìn)植物生長和誘導(dǎo)植物抗逆活性的篩選,獲得具有開發(fā)與應(yīng)用前景的寡糖片段。促生長活性與機(jī)理研究:將篩選出的褐藻寡糖應(yīng)用于植物植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞的生長調(diào)節(jié),探討了褐藻寡糖促生長的作用機(jī)制,為在植物促生長領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)??鼓嫘阅軠y試與機(jī)理表征:將不同濃度的褐藻寡糖片段進(jìn)行植物抗逆性研究。探討褐藻寡糖在低溫、干旱、病害時(shí)對植物的誘導(dǎo)抗逆作用,探討褐藻寡糖在誘導(dǎo)植物抗逆性產(chǎn)生過程中的作用機(jī)理,為褐藻寡糖在植物抗逆領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合部位及影響因素:利用激光共聚焦顯微技術(shù)研究褐藻寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合過程,并通過多種物質(zhì)對標(biāo)記寡糖的競爭性抑制,證明寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合與作用部位,初步探討褐藻寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合與信號(hào)傳導(dǎo)過程。 河南醫(yī)藥級褐藻寡糖

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