對(duì)初步純化的褐藻膠裂解酶進(jìn)行了酶學(xué)性質(zhì)研究,酶的適反應(yīng)條件為50℃、pH8,在4～40℃、pH6～8范圍內(nèi)酶活力較穩(wěn)定;Ca2+、Mg2+和Fe2+等離子對(duì)該酶有促進(jìn)作用,EDTA、Ba2+、Zn2+等有抑制作用。通過(guò)優(yōu)化獲得褐藻膠的好酶解條件,在底物濃度、加酶量、體系、45℃條件下反應(yīng)32h時(shí),還原糖生成量為。以提取的褐藻多糖為原材料,按照此酶解工藝大量制備褐藻寡糖,通過(guò)Bio-GelP2凝膠色譜柱分離純化,得到不同聚合度的7個(gè)寡糖組分F1-F7,TLC分析結(jié)果顯示,其聚合度在1-7之間。去除自由基結(jié)果表明,褐藻多糖和寡糖都具有較強(qiáng)的抗氧化活性。自由基去除率隨著糖濃度的增加而增強(qiáng),在寡糖濃度、多糖濃度±±。多糖、寡糖濃度為±±。在相對(duì)濕度為85%和62%的環(huán)境下,褐藻多糖和褐藻寡糖都表現(xiàn)出較強(qiáng)的吸濕能力,褐藻寡糖更佳。在干燥環(huán)境下,褐藻多糖和寡糖都表現(xiàn)出很強(qiáng)的保濕效果,36h時(shí)褐藻寡糖的保濕率達(dá)到。抑菌結(jié)果顯示,褐藻寡糖對(duì)白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌均具有較好的抑菌作用,褐藻多糖對(duì)白色念珠菌具有抑菌效果,對(duì)另3種細(xì)菌無(wú)抑制。 褐藻寡糖的結(jié)合是與膜上的蛋白有關(guān)。通過(guò)封閉細(xì)胞膜上的鈣離子通道，對(duì)其進(jìn)行阻斷后結(jié)合寡糖。海南褐藻寡糖沖洗

   褐藻寡糖對(duì)黃瓜幼苗生長(zhǎng)指標(biāo)的影響黃瓜幼苗經(jīng)不同分子量的褐藻寡糖處理，處理14ｄ后，在外觀形態(tài)方面，ADO2和ADO3處理過(guò)的黃瓜幼苗與對(duì)照組相比有明顯差別，ADO2和ADO3處理過(guò)的幼苗長(zhǎng)勢(shì)明顯好于對(duì)照組，經(jīng)不同分子量的ADO處理的黃瓜幼苗的生長(zhǎng)狀況均好于對(duì)照組，各種生長(zhǎng)指標(biāo)包括株高、莖粗、株幅及鮮重都明顯高于對(duì)照。ADO1，ADO2，ADO3，ADO4處理植株的株高分別提高了7％，10.2％，8.9％和8％，莖粗分別提高了5.8％，23.9％，22.7％和7％，株幅分別提高了21.9％，27％，35.4％和24.3％，鮮重分別提高了50.8％，53.5％，74.3％和54.1％。其中ADO2和ADO3處理組黃瓜幼苗的各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)都高于ADO1和ADO4處理組。因此，選擇ADO2和ADO3進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。褐藻寡糖對(duì)黃瓜葉片葉綠素含量的影響由圖３所示，經(jīng)過(guò)ADO處理的黃瓜葉片中的葉綠素ａ和葉綠素總含量均比蒸餾水處理的對(duì)照有明顯性提高，ADO處理組組間比較發(fā)現(xiàn)，ADO3對(duì)葉綠素含量的提高比ADO2更為明顯。２種褐藻寡糖對(duì)葉綠素ａ的含量的影響較大，葉綠素ｂ的含量變化相對(duì)較小，而光合作用與葉綠素ａ的含量關(guān)系相對(duì)密切。黑龍江海藻寡糖與褐藻寡糖區(qū)別海洋寡糖來(lái)源于海洋的寡糖，以幾丁寡糖、褐藻寡糖、卡拉膠和瓊膠寡糖等，它們來(lái)源豐富，結(jié)構(gòu)獨(dú)特。

   褐藻寡糖對(duì)煙C葉片細(xì)胞膜低溫?fù)p傷程度的影響 丙二醛MDA含量和細(xì)胞電滲率大小是植物細(xì)胞膜損傷程度的重要指標(biāo) ,在低溫環(huán)境中 ,植物受到損傷后,細(xì)胞膜受到破壞, MDA和細(xì)胞電滲率都有不同程度升高 。經(jīng)過(guò)低溫脅迫6h后, 水處理(ADO 濃度為 0)組MDA含量和電滲率分別增加了4 .9倍和1 .5倍 ,隨著低溫脅迫時(shí)間延長(zhǎng),MDA和電滲率仍繼續(xù)增加, 這是因?yàn)殡m然煙C葉面覆蓋有水層, 能夠減小葉面溫差變化 ,減輕低溫對(duì)葉片傷害,但并不能完全阻止凍害發(fā)生, 因此煙C胞內(nèi)物質(zhì)不斷滲漏, 隨低溫處理時(shí)間延長(zhǎng)細(xì)胞損傷不斷加劇 。噴施寡糖后進(jìn)行低溫脅迫, 0 .05 %～ 0 .30 %ADO 處理組 MDA 和電滲率相比同一時(shí)刻水處理組都有不 同程度下降 ,說(shuō)明能夠減少細(xì)胞膜損傷, 降低胞內(nèi)物質(zhì) 外滲, 但經(jīng) 0 .10 %ADO 處理的煙C在 48 h 時(shí) MDA 和 細(xì)胞電滲率明顯升高。經(jīng)1 .00 %ADO 處理后進(jìn)行低溫脅迫 ,短時(shí)間內(nèi) MDA 含量和電滲率都劇烈增加, 隨著時(shí)間延長(zhǎng)不斷上升 ,說(shuō)明此濃度ADO加重了煙C葉片傷害 ,可能是由于較高濃度 ADO 溶液對(duì)煙C葉片形成較強(qiáng)滲透勢(shì), 造成細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)滲出 ,破壞了細(xì)胞正常 結(jié)構(gòu) ,在低溫下更加劇了煙C葉片損傷。

   從植物生長(zhǎng)與抵抗逆境的特性出發(fā)，利用外源性寡糖對(duì)其進(jìn)行作用，通過(guò)檢測(cè)植物生長(zhǎng)指標(biāo)和抗逆指標(biāo)變化，來(lái)研究寡糖在植物促生長(zhǎng)與誘導(dǎo)抗逆過(guò)程中的作用機(jī)制。一方面對(duì)褐藻寡糖在植物促生長(zhǎng)與抗逆領(lǐng)域的作用機(jī)理進(jìn)行表征，另一方面，也希望能夠通過(guò)此研究獲得具有優(yōu)良生物功能活性的寡糖制劑，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)抗災(zāi)減災(zāi)做出貢獻(xiàn)。選擇三種來(lái)源（褐藻膠、果膠、殼聚糖）的不同分子量大小的九種寡糖片段進(jìn)行研究。利用植物的促生長(zhǎng)和抗逆指標(biāo)進(jìn)行篩選，獲得了一種既具有明顯的促生長(zhǎng)作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，為褐藻寡糖HZ3，經(jīng)過(guò)質(zhì)譜分析，其組分是以二、三糖為主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。第二部分是利用植物的植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞為材料，建立起寡糖促生長(zhǎng)的綜合性的驗(yàn)證方法。對(duì)植株分別選擇了雙子葉植物豌豆和單子葉植物玉米，利用寡糖浸種，分別考察在種子萌發(fā)與幼苗生長(zhǎng)初期其體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和激S含量的變化，結(jié)合種子與植株的生長(zhǎng)指標(biāo)，探討寡糖的促生長(zhǎng)作用機(jī)理。褐藻寡糖能夠改變草莓的呼吸過(guò)程，減少水分散失，降低外界對(duì)其造成的損傷。

   褐藻寡糖不僅可促進(jìn)植物的生長(zhǎng)，而且可提高植物對(duì)病害的抵抗力(Otterleietal.,1991)。王松(2003)利用沸水煮提的方法從海帶中得到褐藻酸鈉后，然后再經(jīng)過(guò)酸解和海螺酶降解得到聚合度為8-20的褐藻寡糖。將此褐藻寡糖應(yīng)用于抗花葉病毒的研究。發(fā)現(xiàn)在處理4d后抗性開始提高，第6d時(shí)誘導(dǎo)抗病性達(dá)到高，并且以濃度為1000μg/ml的褐藻寡糖的誘導(dǎo)效果好。由于植物誘導(dǎo)抗逆領(lǐng)域關(guān)于褐藻寡糖的研究較少，因此開發(fā)褐藻寡糖在植物誘導(dǎo)抗逆領(lǐng)域中的應(yīng)用，對(duì)于豐富褐藻寡糖的生物功能，開發(fā)具有誘導(dǎo)抗逆活性的褐藻寡糖片段，對(duì)增強(qiáng)植物對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力，提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)具有十分重要的意義。海洋活性寡糖的開發(fā)與利用已成為利用海洋資源進(jìn)行高值化開發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)之一。對(duì)海洋的特殊環(huán)境適應(yīng)，使多種海洋生物具有獨(dú)特的多糖組成，利用多種手段對(duì)海洋多糖進(jìn)行降解，可以獲得種類繁多，結(jié)構(gòu)各異的寡糖片段，由于其結(jié)構(gòu)和組成的差異，寡糖片段內(nèi)攜帶大量不同的信息，具有不同的功能活性。尤其是寡糖還可以作為誘抗劑能夠誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗逆性能，此外寡糖還能夠調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育，因此海洋寡糖由于其獨(dú)特的組成和生物活性，已成為目前植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)與誘導(dǎo)抗逆研究的熱點(diǎn)。褐藻寡糖水溶性好，易于被吸收利用，也是重要的信號(hào)分子，能夠參與植物的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)和誘導(dǎo)抗病的過(guò)程。湖南褐藻寡糖真假

褐藻寡糖作為激發(fā)子與植物細(xì)胞結(jié)合后相互作用，引發(fā)植物的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，植物細(xì)胞膜發(fā)生電位變化。海南褐藻寡糖沖洗

  以植物在各種逆境下的生理指標(biāo)的變化為檢測(cè)目標(biāo)，通過(guò)寡 糖刺激作用于植物，探討褐藻寡糖對(duì)植物抗逆的影響與作用機(jī)制。在低溫逆境時(shí)， 寡糖處理能迅速增強(qiáng)其抗逆酶類，對(duì)引起細(xì)胞損傷的物質(zhì)進(jìn)行去除，從而提高植 物的抗逆能力。對(duì)植物的干旱逆境，通過(guò)寡糖作用，能夠使其體內(nèi)的抗旱指標(biāo)明顯增強(qiáng)，如 ABA 的含量升高明顯，對(duì)干旱下植株的生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行調(diào)控，降低干 旱脅迫對(duì)植株的損傷，從而達(dá)到誘導(dǎo)抗旱的目的。對(duì)植物的抗病性能的提高，通 過(guò)檢測(cè)花葉病毒和病對(duì)植株的致病作用。海南褐藻寡糖沖洗

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