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酶解法即利用溶菌酶、纖維素酶、纖維素酶、過氧化氫酶、半纖維素酶、脂肪酶等各種水解酶來分解細(xì)胞壁從而釋放出細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。具有多糖結(jié)構(gòu)的纖維素是海藻細(xì)胞壁的主要成分,所以可以利用纖維素酶或果膠酶對(duì)海藻細(xì)胞壁進(jìn)行水解,這樣可以降低細(xì)胞壁與細(xì)胞間介質(zhì)之間的傳遞阻力,有利于藻膽蛋白的高效外流[3,9]。有研究者把螺旋藻放在KCl和溶菌酶中處理,使得細(xì)胞壁得到破壞,從而提取藻藍(lán)蛋白,這種方法細(xì)胞破損率可以達(dá)到95%以上,而且提取率也比較可觀,能達(dá)到13%。聯(lián)合酶液的提取比單一酶提取的效果更好,收率和純度都會(huì)更高。與傳統(tǒng)的堿性提取法相比,酶解法的反應(yīng)條件較溫和,不易引入雜質(zhì),能保持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、構(gòu)象和光學(xué)特性的穩(wěn)定,這就為我們大規(guī)模地開發(fā)藻膽蛋白提供了一條新的思路[11]。但是,酶解法也有一個(gè)缺點(diǎn),在這個(gè)過程中,會(huì)非常容易產(chǎn)生產(chǎn)物抑制,我們猜測(cè),這也是使得細(xì)胞內(nèi)目的產(chǎn)物溶出速率降低的一個(gè)十分重要的原因。上海超聲波細(xì)胞粉碎機(jī),咨詢上海杜斯儀器有限公司。新鄉(xiāng)新款超聲波材料乳化分散器廠商
多針-板電暈放電提取法 多針-板電暈放電提取法仍然是一種新型的破壞藻體細(xì)胞壁的一種提取方法,該法通過過量的陰離子和陽離子發(fā)生中和而產(chǎn)生巨大能量的釋放,使藻體細(xì)胞壁中可以產(chǎn)生0.4~40μm大小不一致的空腔,然后藻膽蛋白就可以通過這些空腔流出,因?yàn)榈入x子體的溫度比低,所以不會(huì)因?yàn)闊崃窟^高而產(chǎn)生蛋白質(zhì)的變性[11]。與傳統(tǒng)的提取方法相比,這種方法在操作上更加簡(jiǎn)單,效率也有很大的提高,并且耗時(shí)少、成本低,具有環(huán)保的技術(shù)優(yōu)勢(shì)。臺(tái)州非接觸式超聲波細(xì)胞提取機(jī)報(bào)價(jià)上海杜斯儀器有限公司專注于提供多用途恒溫超聲波提取機(jī),型號(hào)齊全,歡迎來電咨詢。
細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的滲透性能夠被一些有機(jī)溶劑(如苯等)、***、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學(xué)試劑改變,這樣一來,細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)容物就會(huì)有選擇性地滲出。林紅衛(wèi)等人[5]曾用過十二烷基苯磺酸鈉處理鈍頂螺旋藻,處理后,鈍頂螺旋藻的細(xì)胞膜遭到破壞,藻藍(lán)蛋白就可以被提取出來,他們這種操作情況下,提取率能達(dá)到98%,同時(shí),運(yùn)用這種方法對(duì)PBP的提取效率就非常明顯的高于了用凍融法提取的對(duì)照組。張建平等[6]將多管藻浸泡于0.2%的NaNO3溶液中4-5d,同樣將植物組織的細(xì)胞膜毀壞,藻膽蛋白從胞內(nèi)流出,從而我們可以進(jìn)行后續(xù)的提取。這種化學(xué)試劑處理的方法由于其操作簡(jiǎn)單且提取率高非常適用于大量樣品的制備,可是,由于化學(xué)試劑的引入,后期純化的難度**加劇,更重要的是,蛋白質(zhì)在這種情況行會(huì)非常容易變性。
超聲波細(xì)胞粉碎機(jī),新買儀器各種規(guī)格變幅桿的適用范圍及比較好功率比如下:變幅桿mmΦ2Φ3★Φ6Φ8Φ10Φ12破碎量ml0.2-53-1010-10020-20050-300100-500功率比1-99%1-35%1-45%5-70%10-85%20-90%30-95%注意:因不同的變幅桿大小選擇,其輸入、輸出功率是不同的,特別是選擇Φ2、Φ3變幅桿時(shí),千萬不能,注意:因不同的變幅桿大小選擇,其輸入、輸出功率是不同的,特別是選擇Φ2、Φ3變幅桿時(shí),千萬不能選錯(cuò)(界面,實(shí)際變幅桿大小,儀器后面板檔位都要一致)。超聲波材料乳化分散器,咨詢上海杜斯儀器有限公司。
超聲波高活性酵母;蝸牛酶;溶壁酶;β-葡聚糖酶;中性甲醛、NaCl和NaOH等,均為分析純。NS2006型高壓均質(zhì)機(jī);JY98-ⅢDN型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī);752PC型紫外可見分光光度計(jì);SSW-600-2S型電熱恒溫水槽;5804R型離心機(jī)。氨基態(tài)氮的測(cè)定采用甲醛滴定法,參照中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T23530-2009(酵母抽提物)。配制適宜質(zhì)量分?jǐn)?shù)的酵母溶液,考察不同破壁方法在各自**適條件下對(duì)酵母破壁的影響。酶法破壁是通過預(yù)試驗(yàn)篩選出蝸牛酶、溶壁酶、β-葡聚糖酶3種效果較好的酶后,再通過單因素試驗(yàn)探索3種酶在不同破壁時(shí)間、破壁溫度和破壁pH值條件下的破壁效果,選出破壁效果更好的酶;高壓均質(zhì)法考察均質(zhì)壓力、均質(zhì)循環(huán)次數(shù)以及酵母質(zhì)量分?jǐn)?shù)3個(gè)因素對(duì)破壁效果的影響;超聲波法破壁超聲功率、超聲時(shí)間和酵母質(zhì)量分?jǐn)?shù)3個(gè)因素對(duì)破壁結(jié)果的影響;自溶法考察自溶時(shí)間、自溶溫度、自溶pH值以及自溶促進(jìn)劑對(duì)破壁結(jié)果的影響。***對(duì)4種不同破壁方法的結(jié)果進(jìn)行比較分析,篩選出破壁效果比較好的一種,并利用正交試驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì),以期得出該方法下的比較好工藝條件。對(duì)重慶超聲波細(xì)胞粉碎機(jī),咨詢上海杜斯儀器有限公司。濟(jì)南實(shí)驗(yàn)超聲波材料乳化分散器價(jià)格
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超聲波處理對(duì)再生植物纖維粒度的影響超聲波處理產(chǎn)生的“空化效應(yīng)”伴隨著機(jī)械作用,使再生植物纖維多層結(jié)構(gòu)分離,更多微細(xì)纖維被分離出來,纖維細(xì)小化。超聲波處理纖維先以細(xì)纖維化作用為主;隨處理時(shí)間增加,超聲潤張作用***,但是纖維的細(xì)纖維化和纖維的吸水潤脹是互相促進(jìn)的,吸水潤脹為纖維的細(xì)纖維化創(chuàng)造有利條件;反之,纖維的細(xì)纖維化又能促進(jìn)纖維更進(jìn)一步的吸水潤脹,兩者作用相互促進(jìn)。超聲波處理對(duì)再生植物纖維保水值的影響纖維素的可及度是反應(yīng)試劑與纖維素化學(xué)反應(yīng)的一個(gè)重要因素。纖維素的可及度可用離心法測(cè)定保水值(WRV)反映。纖維保水值與纖維比表面積具有一定相關(guān)性。超聲波處理時(shí)間的增加,再生植物纖維保水值增加。新鄉(xiāng)新款超聲波材料乳化分散器廠商
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