酶解法即利用溶菌酶、纖維素酶、纖維素酶、過(guò)氧化氫酶、半纖維素酶、脂肪酶等各種水解酶來(lái)分解細(xì)胞壁從而釋放出細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。具有多糖結(jié)構(gòu)的纖維素是海藻細(xì)胞壁的主要成分,所以可以利用纖維素酶或果膠酶對(duì)海藻細(xì)胞壁進(jìn)行水解,這樣可以降低細(xì)胞壁與細(xì)胞間介質(zhì)之間的傳遞阻力,有利于藻膽蛋白的高效外流[3,9]。有研究者把螺旋藻放在KCl和溶菌酶中處理,使得細(xì)胞壁得到破壞,從而提取藻藍(lán)蛋白,這種方法細(xì)胞破損率可以達(dá)到95%以上,而且提取率也比較可觀,能達(dá)到13%。聯(lián)合酶液的提取比單一酶提取的效果更好,收率和純度都會(huì)更高。與傳統(tǒng)的堿性提取法相比,酶解法的反應(yīng)條件較溫和,不易引入雜質(zhì),能保持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、構(gòu)象和光學(xué)特性的穩(wěn)定,這就為我們大規(guī)模地開發(fā)藻膽蛋白提供了一條新的思路[11]。但是,酶解法也有一個(gè)缺點(diǎn),在這個(gè)過(guò)程中,會(huì)非常容易產(chǎn)生產(chǎn)物抑制,我們猜測(cè),這也是使得細(xì)胞內(nèi)目的產(chǎn)物溶出速率降低的一個(gè)十分重要的原因。超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)廠家,咨詢上海杜斯儀器有限公司。北京實(shí)驗(yàn)超聲波細(xì)胞提取機(jī)報(bào)價(jià)
超聲波破碎法超聲細(xì)胞破碎技術(shù)是利用外力破壞所用生物材料的細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使得細(xì)胞中的內(nèi)容物(包括目標(biāo)產(chǎn)品成分)釋放出來(lái)的一種技術(shù)。這個(gè)過(guò)程通常在超聲波破碎儀中進(jìn)行。超聲波細(xì)胞破碎法通常作為輔助方法,該法必須與其他方法相結(jié)合才能比較大限度地粉碎細(xì)胞。由于超聲波粉碎細(xì)胞在粉碎過(guò)程中的產(chǎn)熱較大,所以在這樣較為惡劣的條件下,對(duì)藻膽蛋白非常的不利,特別容易使它們發(fā)生變性。因此**在實(shí)驗(yàn)室操作中比較常用。有研究表明,楊立紅等人[4]曾探索了JY9222D超聲細(xì)胞粉碎機(jī)破碎藻體的比較好條件,即:在9min超聲時(shí)間、600W功率、1∶8固液比和20mL。上海杜斯儀器有限公司南陽(yáng)低溫超聲波材料乳化分散器多少錢一臺(tái)上海杜斯儀器有限公司專注于提供超聲波清洗機(jī)10L,型號(hào)齊全,歡迎來(lái)電咨詢。
超聲波霉法破壁酶法破壁是目前較為***采用的破碎細(xì)胞壁方法之一,而且破壁效果相對(duì)來(lái)說(shuō)也較理想。因此,本節(jié)將探索不同來(lái)源的酶對(duì)酵母破壁效果的影響。選取破壁中3種比較常見的破壁酶進(jìn)行試驗(yàn),分別為溶壁酶、蝸牛酶和β-葡聚糖酶。在各自的**適溫度、pH值條件下,進(jìn)行酶解破壁。以氨基氮得率為指標(biāo),結(jié)果表明蝸牛酶的破壁效果比較好。因此,選擇蝸牛酶進(jìn)行單因素試驗(yàn)。2.2.1蝸牛酶破壁時(shí)間對(duì)酵母破壁的影響在蝸牛酶破壁溫度、蝸牛酶添加量等條件固定的情況下,探索蝸牛酶破壁時(shí)間對(duì)酵母破壁的影響。
超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)使用注意事項(xiàng),2)超聲功率:不宜太大,以免樣品飛濺或起泡沫,如小于10ml樣品容量,功率應(yīng)在200w以內(nèi),選用2mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿選擇開關(guān)打到相應(yīng)擋;10-200ml樣品容量的功率在200-400w,選用6mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間,選用10mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;(2MM的小探頭功率嚴(yán)禁超過(guò)350W)3)容器選擇:有多少的樣品就選多大的燒杯,這樣也是有利樣品在超聲中對(duì)流,提高破碎效率。例如;20ML的處理量比較好用20ML的燒杯。如100ml大腸桿菌樣品設(shè)置參數(shù):超聲5秒/間隙5秒次數(shù)70次(總時(shí)間為10分鐘)。功率300W(*供參考)500ML左右的量,功率開到500W-800W左右4、若樣品放在1.5ml的EP管里請(qǐng)一定要將EP管固定好,以防冰浴融化后液面下降導(dǎo)致空載5、日常保養(yǎng):用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲!上海杜斯儀器有限公司
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超聲處理再生植物纖維氫鍵網(wǎng)絡(luò)發(fā)生變化,纖維表面有更多的游離羥基產(chǎn)生。超聲處理可以改善回用紙漿纖維的性能,超聲處理后紙漿制備的紙張密度、抗張指數(shù)增加,纖維氫鍵結(jié)合能力得到一定程度再生,超聲處理可以解釋再生植物纖維在超聲過(guò)程中發(fā)生簇狀凝聚現(xiàn)象。超聲處理后再生植物纖維結(jié)晶度有增加的現(xiàn)象,與打漿會(huì)使再生植物纖維素的結(jié)晶度有小幅度增加現(xiàn)象一致,說(shuō)明超聲處理再生植物纖維表現(xiàn)了一定地打漿作用。在200W強(qiáng)度超聲處理?xiàng)l件下,再生植物纖維結(jié)晶度沒有隨超聲時(shí)間增加而明顯改變。超聲波粉碎機(jī),破碎儀,咨詢上海杜斯儀器有限公司。商丘非接觸式超聲波細(xì)胞破碎儀廠家
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超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)使用注意事項(xiàng),1、切記空載(一定要將超聲變幅桿插入樣品后才能開機(jī),)2、變幅桿(超聲探頭)入水深度:1.5Cm左右,液面高度比較好有30mm以上,探頭要居中,不要貼壁。超聲波是垂直縱波,插入太深不容易形成對(duì)流,影響破碎效率。3、超聲參數(shù)設(shè)置:設(shè)置鍵好儀器工作參數(shù)(具體設(shè)置見說(shuō)明書),對(duì)于對(duì)溫度要求比較敏感的樣品(比如細(xì)菌)一般外面采用冰浴,實(shí)際溫度肯定是低于25度,蛋白核酸肯定不會(huì)變性。1)時(shí)間:超聲時(shí)間每次比較好不要超過(guò)5秒,間隙時(shí)間應(yīng)大于或等于超聲時(shí)間,以便于熱量散發(fā)。時(shí)間設(shè)定應(yīng)以超聲時(shí)間短,超聲次數(shù)多原則,可延長(zhǎng)超聲機(jī)子以及探頭的壽命。上海杜斯、儀器有限公司北京實(shí)驗(yàn)超聲波細(xì)胞提取機(jī)報(bào)價(jià)
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