細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的滲透性能夠被一些有機(jī)溶劑(如苯等)、***、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學(xué)試劑改變,這樣一來,細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)容物就會(huì)有選擇性地滲出。林紅衛(wèi)等人[5]曾用過十二烷基苯磺酸鈉處理鈍頂螺旋藻,處理后,鈍頂螺旋藻的細(xì)胞膜遭到破壞,藻藍(lán)蛋白就可以被提取出來,他們這種操作情況下,提取率能達(dá)到98%,同時(shí),運(yùn)用這種方法對(duì)PBP的提取效率就非常明顯的高于了用凍融法提取的對(duì)照組。張建平等[6]將多管藻浸泡于0.2%的NaNO3溶液中4-5d,同樣將植物組織的細(xì)胞膜毀壞,藻膽蛋白從胞內(nèi)流出,從而我們可以進(jìn)行后續(xù)的提取。這種化學(xué)試劑處理的方法由于其操作簡單且提取率高非常適用于大量樣品的制備,可是,由于化學(xué)試劑的引入,后期純化的難度**加劇,更重要的是,蛋白質(zhì)在這種情況行會(huì)非常容易變性。超聲波石墨烯分散器,咨詢上海杜斯儀器有限公司。非接觸式超聲波材料乳化分散器廠商
溶脹法溶脹法是在恒定的pH值和適當(dāng)?shù)臏囟认?,利用組織細(xì)胞中原有的酶系統(tǒng)破壞細(xì)胞。為了防止細(xì)胞溶脹時(shí)細(xì)胞被其他物質(zhì)所污染,可以使用少量的防腐劑,例如甲苯、氯仿等,一些研究人員將紫菜直接浸泡在水中以獲得含有PE的提取物。韋萍等[7]研究了巨螺旋藻的藻藍(lán)蛋白提取,發(fā)現(xiàn)使用15 g/L的NaNO3或者是10 mmol/LCaCl2對(duì)巨螺旋藻進(jìn)行浸泡的提取效果相對(duì)比較好。余九九等[8]把螺旋藻浸泡在蒸餾水或低濃度CaCl2溶液中,在40°C條件下進(jìn)行。溶脹法雖然操作比較簡單,但是需要的提取時(shí)間非常的長,要耗費(fèi)很多工夫,在蒸餾水中浸泡需要10 d,在低濃度CaCl2溶液中也要浸泡3-4 d,所以說效率就比較低。武漢工業(yè)超聲波清洗機(jī)銷售電話超聲波說明書,咨詢上海杜斯儀器有限公司。
酶解法即利用溶菌酶、纖維素酶、纖維素酶、過氧化氫酶、半纖維素酶、脂肪酶等各種水解酶來分解細(xì)胞壁從而釋放出細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。具有多糖結(jié)構(gòu)的纖維素是海藻細(xì)胞壁的主要成分,所以可以利用纖維素酶或果膠酶對(duì)海藻細(xì)胞壁進(jìn)行水解,這樣可以降低細(xì)胞壁與細(xì)胞間介質(zhì)之間的傳遞阻力,有利于藻膽蛋白的高效外流[3,9]。有研究者把螺旋藻放在KCl和溶菌酶中處理,使得細(xì)胞壁得到破壞,從而提取藻藍(lán)蛋白,這種方法細(xì)胞破損率可以達(dá)到95%以上,而且提取率也比較可觀,能達(dá)到13%。聯(lián)合酶液的提取比單一酶提取的效果更好,收率和純度都會(huì)更高。與傳統(tǒng)的堿性提取法相比,酶解法的反應(yīng)條件較溫和,不易引入雜質(zhì),能保持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、構(gòu)象和光學(xué)特性的穩(wěn)定,這就為我們大規(guī)模地開發(fā)藻膽蛋白提供了一條新的思路[11]。但是,酶解法也有一個(gè)缺點(diǎn),在這個(gè)過程中,會(huì)非常容易產(chǎn)生產(chǎn)物抑制,我們猜測(cè),這也是使得細(xì)胞內(nèi)目的產(chǎn)物溶出速率降低的一個(gè)十分重要的原因。
非接觸式超聲波粉碎機(jī)也稱作杯式超聲破碎儀,可在密閉容器、無菌、可超微量條件下進(jìn)行破碎。相比傳統(tǒng)的探頭超聲波細(xì)胞粉碎機(jī),該儀器具有一次可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品、實(shí)驗(yàn)效率高、無需頻繁操作探頭、避免樣本交叉污染等優(yōu)勢(shì)。配置有冷卻水循環(huán)系統(tǒng),快速低溫循環(huán)泵是采取無氟環(huán)保壓縮機(jī)制冷的低溫液體循環(huán)設(shè)備。具有提供低溫液體、低溫水浴的作用。有大流量、高壓循環(huán)泵,耐高壓、高溫等特點(diǎn),人性化的操作面板,體積小、制冷量大。循環(huán)泵中采用75%的酒精作為循環(huán)液體,在超聲波粉碎前開啟循環(huán)使機(jī)器降溫,便于樣品在4-10℃水浴環(huán)境內(nèi)超聲,使能量分布均勻,超聲作用完全。超聲波細(xì)胞破碎儀武漢,咨詢上海杜斯儀器有限公司。
在使用超聲波粉碎機(jī)時(shí)應(yīng)注意以下事項(xiàng)1.檢查電源電壓:220V±5%交流電壓(頻率為50Hz)供電,電源插座位于儀器后面板左下方。請(qǐng)注意電源標(biāo)色。警告:為避免雷擊和使用安全,請(qǐng)使用接地。更換保險(xiǎn)絲時(shí)請(qǐng)把電源插頭先拔下。2.儀器工作環(huán)境本儀器需放置在室內(nèi)通風(fēng)良好的場(chǎng)所工作,可正常工作的室溫范圍是0℃到40℃。為了儀器能正常工作請(qǐng)注意:防腐、防潮、防曬、防粉塵。準(zhǔn)超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)產(chǎn)品的額定工作頻率是20千赫茲。一些超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)有自動(dòng)調(diào)諧功能可以使頻率在一個(gè)小的范圍內(nèi)變化。超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)使用步驟,咨詢上海杜斯儀器有限公司。無錫多功能超聲波反應(yīng)器
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超聲波細(xì)胞破碎儀的功率大小是客戶的指標(biāo),它決定著被破碎物的數(shù)量、大小、質(zhì)量及效果。所以各生產(chǎn)廠家對(duì)此指標(biāo)也都非常重視。一般情況下,實(shí)驗(yàn)室、化驗(yàn)室、研究所、藥品檢驗(yàn)所等科研單位,使用的功率都不大,(一般在500W以下);而生物公司、制藥廠、化工企業(yè)等生產(chǎn)單位,所用的功率大都在500W-2000W左右。由于各制造廠家的產(chǎn)品結(jié)構(gòu)不同,其功率的標(biāo)注方法也不盡相同。不過按照用戶常用的慣例,一般有以下幾種:50W、100W、150W、250W、300W、350W、500W、1000W、2000W。一般超聲波細(xì)胞破碎儀輸出功率可根據(jù)需要適度調(diào)節(jié)。非接觸式超聲波材料乳化分散器廠商
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