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糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法,是研究細(xì)胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物,再通過(guò)顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。素染色液100mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種。北京如何使用糖原染色試劑盒平均價(jià)格
染色的一般原則:因檢測(cè)細(xì)胞的類(lèi)型、凋亡誘導(dǎo)劑種類(lèi)、使用的檢測(cè)儀器不同,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測(cè)均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽(yáng)對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價(jià)格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號(hào)較強(qiáng);檢測(cè)某些弱表達(dá)的抗原,推薦使用此熒光素。價(jià)格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來(lái)避開(kāi)自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。江西提供糖原染色試劑盒銷(xiāo)售廠家冷凍切片染色效果不佳,成熟時(shí)間2個(gè)月,染色時(shí)間一般15-20分鐘。
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色。②在染色過(guò)程中,前一個(gè)染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí),用有色鉛筆在組織周?chē)鷦澮粋€(gè)圈,這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出
臨床意義:1.急性白血病類(lèi)型的鑒別紅白血病的幼紅細(xì)胞PAS染色多呈陽(yáng)性反應(yīng),陽(yáng)性率高,反應(yīng)強(qiáng);成熟紅細(xì)胞有時(shí)亦可為陽(yáng)性;急性淋巴細(xì)胞白血病的原、幼淋巴細(xì)胞PAS染色多為紅色顆?;驂K狀陽(yáng)性反應(yīng);急性粒細(xì)胞白血病的原粒細(xì)胞呈陰性或胞質(zhì)呈彌漫淡色陽(yáng)性反應(yīng);急性早幼粒細(xì)胞白血病異常早幼粒細(xì)胞的PAS染色為陽(yáng)性反應(yīng);急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞PAS染色陽(yáng)性反應(yīng)呈彌漫分布的紅色細(xì)顆粒,巨核細(xì)胞白血病原巨核細(xì)胞PAS染色呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),表現(xiàn)為紅色顆?;驂K狀。2.各類(lèi)貧血的鑒別MDS、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(曾稱(chēng)地中海貧血)的幼紅細(xì)胞PAS染色多為陰性反應(yīng),有時(shí)可出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng);巨幼紅細(xì)胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性。故PAS染色有助于三種急性白血病類(lèi)型的鑒別。
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色。②在染色過(guò)程中,前一個(gè)染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí),用有色鉛筆在組織周?chē)鷦澮粋€(gè)圈,這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出。糖原的固定要及時(shí),而且標(biāo)本要新鮮。浙江如何使用糖原染色試劑盒進(jìn)貨價(jià)
過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久,氧化時(shí)的溫度以18~22℃佳。北京如何使用糖原染色試劑盒平均價(jià)格
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過(guò)碘酸(又稱(chēng)高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類(lèi)及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類(lèi)的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。北京如何使用糖原染色試劑盒平均價(jià)格