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無血清細(xì)胞凍存液相對于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢有:1.即用型,無需現(xiàn)配,直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單。4.不含血清,較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程。無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液??梢栽诒纬芍?,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子。廈門無血清細(xì)胞凍存液報價
無血清細(xì)胞凍存液對比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢:傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),較后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲存。(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量的死亡。)廈門無血清細(xì)胞凍存液報價無血清細(xì)胞凍存液,2-8℃保存即可,無需再進(jìn)行分裝。
凍存溫度:凍存溫度是指能長期保存細(xì)胞的較低溫度,在此溫度下,細(xì)胞生化反應(yīng)極其緩慢甚至停止,但經(jīng)過長期保存,在復(fù)蘇后仍能保持正常的結(jié)構(gòu)和功能。不同的細(xì)胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果,冷凍保存溫度可以不同。但從實(shí)際和效益的觀點(diǎn)出發(fā),液氮溫度-196℃是目前較佳的冷凍保存溫度。在-196℃時,細(xì)胞的生命活動幾乎完全停止,但復(fù)蘇后細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能完好。如果冷凍過程得當(dāng),一般生物樣品在-196℃下均可保存十年以上。應(yīng)用-70℃~-80℃保存細(xì)胞,短期內(nèi)對細(xì)胞的活性無明顯影響,但隨著凍存時間延長,細(xì)胞存活率明顯降低。在冰點(diǎn)到-40℃范圍內(nèi)保存細(xì)胞的效果不佳。
干細(xì)胞無血清凍存液操作事項(xiàng):使用說明:1.細(xì)胞消化和計數(shù),用胰酶對待凍存的細(xì)胞進(jìn)行消化,并對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)。2.1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘(4℃),去掉上清。3.根據(jù)細(xì)胞計數(shù)的情況,加入適量的干細(xì)胞無血清凍存液,使細(xì)胞密度在1×106左右(或根據(jù)自己希望達(dá)到的細(xì)胞密度)。4.輕輕地重懸細(xì)胞(務(wù)必重懸均勻)。5.將重懸的細(xì)胞按等份加入到滅菌的凍存管(需提前做好標(biāo)記或者貼上標(biāo)簽)中,旋緊凍存管蓋。6.將凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒直接放入-80℃。7.第二天將細(xì)胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。注意事項(xiàng):1.用處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。2.控制好胰酶的消化時間,切記消化過度,會影響復(fù)蘇效果。3.重懸細(xì)胞的過程中,請務(wù)必要輕柔,以免損傷細(xì)胞,但同時也一定要充分重懸,這樣細(xì)胞在復(fù)蘇時才不會成團(tuán)。4.細(xì)胞操作請注意無菌。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:不含動物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低。
無血清快速細(xì)胞凍存液細(xì)胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。7.若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻。廈門無血清細(xì)胞凍存液銷售廠家
將要凍存的細(xì)胞懸液,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù),計數(shù)后離心。廈門無血清細(xì)胞凍存液報價
冷凍速率:冷凍速率是指降溫的速度,直接關(guān)系到冷凍效果。冷凍速度不同,細(xì)胞內(nèi)水分向外流動的情況也不相同,不同的冷凍速度既然能使細(xì)胞內(nèi)發(fā)生不同的生理變化,也可以對細(xì)胞產(chǎn)生不同的損傷。超快速玻璃化冷凍對細(xì)胞存活來說是較為理想的冷凍方法。細(xì)胞內(nèi)外呈玻璃化凝固,無冰晶形成或形成很小的冰晶,對細(xì)胞膜和細(xì)胞器不致造成損傷,細(xì)胞也不會在高濃度的溶質(zhì)中長時間暴露而受損。不同細(xì)胞的較適冷凍速率不同。小鼠骨髓干細(xì)胞、酵母、人紅細(xì)胞的較適冷凍速率分別為1.6℃/min、7℃/min和200℃/min。細(xì)胞與細(xì)胞之間的較適冷凍速率可在1.6℃~300℃/min,故對一種細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存之前,首先需要測定其較適冷凍速率,以保證獲得較高的冷凍存活率。廈門無血清細(xì)胞凍存液報價