拭子RNA提取試劑的選擇？1、產品價格。價格也是選購產品的重要考量因素。對于絕大多數(shù)實驗如Northern雜交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫構建等，國產試劑盒都能滿足質量要求。與國外有名品牌相比，國產試劑盒的價格較為便宜，價格還不到國外品牌價格的30%，性價比較高。因而，對于以上實驗建議選用國產試劑盒。一些經費不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項目，特別適合選用國產試劑盒。2、與國外有名品牌相比，國產試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足，但不影響大多數(shù)實驗，特別是下游需要PCR擴增的實驗和分子雜交類實驗。在提取得率上，國內試劑盒與國外品牌差別不大，而在價格方面，國產試劑盒具有比較明顯的優(yōu)勢。如果經費充足，RNA純度要求特別高，可考慮選擇Q等國外有名品牌。如果經費不多或下游主要做PCR或分子雜交等實驗，可考慮選擇性價比較高的國產品牌。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質基團結合到旋轉柱的玻璃纖維基質上，同時使污染物通過柱被有效地洗去。太原RNA提取試劑

酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型)：一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除，較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。二、試劑盒特點：1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好?？朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好，純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點，不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程，RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的RL裂解液配方，可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程，提取RNA純度更高。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量，提高了純度。昆明RNA提取試劑細胞裂解后，細胞釋放出蛋白質、DNA、RNA等物質。

RNA提取：主要試劑Trizol是一種新型總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速破碎細胞，壓制細胞釋放出的核酸酶。1.Trizol試劑含有苯酚，具有毒性和刺激性，注重操作。2.RNase污染的主要來源是操作過程中手和空氣中的浮沉，注重配帶手套，樣品盡可能蓋嚴。3.細胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全會降低較后得率，因為一部分RNA會殘留在未裂解的細胞中。細胞裂解之后要看不見顆粒狀物質（結締組織和骨除外）。在清洗和裂解細胞時較好在低溫下操作，防止在操作過程中釋放的內源RNase降解了RNA。4.酵母和一些細菌由于細胞壁的特別結構，可以加入Trizol試劑同時加入無RNase的玻璃珠并劇烈振蕩，使細胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。

RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性。無論是人、動物、植物還是細菌組織，該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品，所有的操作可以在一小時內完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染，故而能夠作RNA印跡分析、斑點雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和分子克隆等。和進口品牌實驗對照顯示，公司的產品質量已經達到甚至超過了進口產品的質量快速程序在25-40分鐘內提供高質量的總RNA。

動物細胞RNA提?。?、懸浮細胞：可直接離心后棄掉培養(yǎng)基，用無菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來，然后再加入裂解液進行裂解。千萬不要完全棄掉液體后，往沉淀細胞里直接加入裂解液，這樣會使外表層的細胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細胞外側，從而限制沉淀內部的細胞與裂解液的接觸，從而導致細胞裂解不徹底，降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細胞：棄掉培養(yǎng)基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿，把細胞吹下來，轉移到無RNA酶的EP管中，加裂解液進行提取。3、貼壁細胞：需要先用胰酶消化，然后收集到無RNA酶的EP管中，離心去其上清，用PBS洗1~2次，去除多余的胰酶，以適量PBS重懸后繼續(xù)進行提取步驟。rRNA是組成核糖體的部分，而核糖體是蛋白質合成的場所。南京正規(guī)RNA提取試劑哪家便宜

在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成分。太原RNA提取試劑

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將一半的溶液轉移到離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。將剩下的一半溶液轉移到同一離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉移到RNase-free收集管中，加入50～100μLRNA洗脫液，室溫放置1～2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用太原RNA提取試劑