無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無動物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。凍存細(xì)胞,無需程序降溫。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上??梢栽诒纬芍埃瑑?yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子。珠海無血清細(xì)胞凍存液價格
凍存溫度:凍存溫度是指能長期保存細(xì)胞的較低溫度,在此溫度下,細(xì)胞生化反應(yīng)極其緩慢甚至停止,但經(jīng)過長期保存,在復(fù)蘇后仍能保持正常的結(jié)構(gòu)和功能。 不同的細(xì)胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果,冷凍保存溫度可以不同。但從實(shí)際和效益的觀點(diǎn)出發(fā),液氮溫度-196℃是 目前較佳的冷凍保存溫度。在-196℃時,細(xì)胞的生命活動幾乎完全停止,但復(fù)蘇后細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能完好。如果冷凍過程得當(dāng),一般生物樣品在-196℃下均可保存十年以上。應(yīng)用-70℃~-80℃保存細(xì)胞,短期內(nèi)對細(xì)胞的活性無明顯影響,但隨著凍存時間延長,細(xì)胞存活率明顯降低。在冰點(diǎn)到-40℃范圍內(nèi)保存細(xì)胞的效果不佳。濟(jì)南正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家現(xiàn)貨無血清細(xì)胞凍存液使用方法:加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中。
細(xì)胞凍存秘籍:冷凍保護(hù)劑冷凍保護(hù)劑對于冷凍過程中細(xì)胞發(fā)生的損傷較小化是必要的。較常見的冷凍保護(hù)劑是二甲基亞砜(DMSO)和甘油。 DMSO(ATCC目錄號4-X,5×5mL),常用濃度為5至10%(v / v);較適濃度因細(xì)胞系而異。注意: DMSO是一種非常強(qiáng)大的溶劑,能夠迅速滲透完整的皮膚。因此避免直接接觸DMSO,并妥善處理含有DMSO的廢物。另外,選擇DMSO時,確保使用無毒的產(chǎn)品。ATCC出售的DMSO,已經(jīng)經(jīng)過完全測試,以確保其無毒(ATCC目錄號4-X,5×5mL)。甘油常用終濃度為5%至15%。較佳濃度取決于細(xì)胞系。通常,增加凍存培養(yǎng)基中的血清濃度來增加難以保存細(xì)胞的存活率。有時使用高達(dá)90%至95%的血清濃度(無培養(yǎng)基,*血清加上低溫保護(hù)劑)。A. 用凍存培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,使較終細(xì)胞濃度達(dá)到每毫升2-5百萬個活細(xì)胞。B. 在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞名稱,編號和凍存日期等信息。然后將1.0到1.8毫升的細(xì)胞懸液加入到細(xì)胞凍存管中并密封。
細(xì)胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細(xì)胞凍存液,4℃預(yù)冷(新鮮配制的凍存液會產(chǎn)生大量的熱);取對數(shù)生長期的細(xì)胞,用細(xì)胞消化酶將單層生長的細(xì)胞消化下來;懸浮細(xì)胞則直接將細(xì)胞收集到離心管中;離心1200rpm,6min;去除上清液,逐漸加入適量預(yù)冷的細(xì)胞凍存液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中的細(xì)胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min;到達(dá)-80℃時,則可迅速放入液氮中。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個常規(guī)技術(shù)。
凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。4.清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可微量,原位凍存,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,省時高效。正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液直銷廠家
無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:胎牛血清取自牛,因此,難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域。珠海無血清細(xì)胞凍存液價格
無血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長期保存(>5年)。CellFreezingMedium配方成分明確,不含動物來源性蛋白,Chemicalbook不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個常規(guī)技術(shù),通常細(xì)胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成,由于血清含有異源成分且生長過程中可能帶來的風(fēng)險Chemicalbook,故傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存配方并不適于體內(nèi)研究。本產(chǎn)品完全由化學(xué)成分組成,無動物來源,目前測試可以很好的凍存T細(xì)胞,NK細(xì)胞以及MSC等細(xì)胞。珠海無血清細(xì)胞凍存液價格