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雙形曲霉

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-17

銅綠假單胞菌在4攝氏度不生長(zhǎng)而在42攝氏度可以生長(zhǎng)。觸酶實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性;365nm紫外燈下顯熒光;乙酰胺肉湯實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。噬菌體分型所應(yīng)用的噬菌體現(xiàn)有24株,分型率達(dá)90%。血清學(xué)分型利用O抗原進(jìn)行分型,可分20個(gè)血清型。質(zhì)粒指紋圖分析是對(duì)同種細(xì)菌的不同株進(jìn)行同源性分析的一種方法。根據(jù)細(xì)菌攜帶質(zhì)粒的情況進(jìn)行分析。銅綠假單胞菌普遍存在,而在潮濕環(huán)境尤甚。銅綠假單胞菌是假單胞菌目中的一種。因?yàn)榻?jīng)培養(yǎng)后成綠色,與銅生銹后的綠色相同而命名。以前也叫綠膿桿菌,屬于革蘭氏陰性桿菌。普遍存在于假單胞菌屬的其他細(xì)菌以及肺炎桿菌、大腸桿菌、霍亂弧菌等g-細(xì)菌中,是一種良好的交叉保護(hù)抗原。銅綠假單胞菌原稱綠膿桿菌。雙形曲霉

雙形曲霉,菌種菌株

銅綠假單胞菌亦稱綠膿桿菌,為專性需氧菌。用傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)基保存綠膿桿菌的方法,一般3個(gè)月左右就需再次移種;若保存到半年則有存活率低、復(fù)蘇后色素不明顯、長(zhǎng)期保存易發(fā)生變異等缺點(diǎn)。應(yīng)用較低溫甘油保存法后,現(xiàn)已保存兩年多,菌種存活率高達(dá)100%,且細(xì)菌的微生物特性未發(fā)生變異,該方法明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的半固體保存方法,較低溫甘油保存法需要配制無(wú)菌肉湯,稱取牛肉膏5.0g、蛋白胨10.0g,氯化鈉0.5g,加入1000毫升蒸餾水中,加熱溶解,調(diào)pH至7.4~0.2。按每管1.7毫升分裝于華氏管中,121.3攝氏度、20分鐘高壓滅菌。橙色假諾卡氏菌銅綠假單胞菌的o抗原含有內(nèi)毒養(yǎng)素和原內(nèi)毒養(yǎng)素蛋白質(zhì)兩種成份。

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大腸桿菌的培養(yǎng):將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過(guò)程,因?yàn)楸4鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥后,生長(zhǎng)延遲期較長(zhǎng),需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)。將菌種接種至一新鮮培養(yǎng)基上,每萌發(fā)一次即為一代,因此,當(dāng)原始菌種復(fù)溶并轉(zhuǎn)至新培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),即認(rèn)為已傳代一次,從菌種保藏中心獲得的冷凍干燥的菌種為第0代,冷凍干燥的原始菌種開啟后轉(zhuǎn)種為第1代,直到第3代為工作菌種。菌種的傳代次數(shù)(自原始菌種凍干粉起)不得超過(guò)5代。直接從凍存搖的菌甘油放了不少可能會(huì)抑制菌的生長(zhǎng),活力差,而且多余的甘油對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)不利,經(jīng)劃板的菌株活力好,可以挑菌搖菌提質(zhì)?;蛘咦霰磉_(dá)用。

關(guān)于銅綠假單胞菌的麩皮保存法是在麩皮內(nèi)加入60%的水,經(jīng)滅菌后接種培養(yǎng),然后干燥保藏。紙片(濾紙)保存法是將滅菌紙片浸入培養(yǎng)液或菌懸液中,常壓或減壓干燥后,置于裝有干燥劑的容器內(nèi)進(jìn)行保存。寄主保存法是銅綠假單胞菌侵入其寄主后加以保存的方法。低溫冰箱保存法一般為-20攝氏度、-50攝氏度或-85攝氏度,低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。銅綠假單胞菌在自然界分布普遍。

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使銅綠假單胞菌在土壤中繁殖后進(jìn)行干燥保存的方法是,取適量土壤(5克)置于塞有棉塞的試管中,加水或加入充分稀釋的液體培養(yǎng)基(以含水量為土壤較大持水量的60%為宜),然后高壓滅菌。再將需保存的銅綠假單胞菌進(jìn)行大量接種,培養(yǎng)至菌絲能用肉眼確認(rèn)的程度為止,移入干燥器中經(jīng)短時(shí)間干燥或風(fēng)干后密封,冷藏或室溫保存。硅膠保存法以6~16目的無(wú)色硅膠代替砂子,干熱滅菌后,加入菌液。加菌液時(shí),由于硅膠的吸附熱常使溫度升高,因而需設(shè)法加以冷卻。磁珠保存法將菌液浸入素?zé)胖?或多孔玻璃珠)后再進(jìn)行干燥保存的一種方法。銅綠假單胞菌按照血清學(xué)分型利用O抗原進(jìn)行分型,可分20個(gè)血清型。壯觀絲衣霉菌種

金黃色葡萄球在血瓊脂平板上形成的菌落較大,有的菌株菌落周圍形成明顯的完全透明溶血環(huán)(β溶血)。雙形曲霉

銅綠假單胞菌菌種在經(jīng)冷凍干燥并抽真空保存的,開啟后必須一次使用完,不能留菌粉下次再用,另外安瓿管里大部份是用牛奶做為保護(hù)劑,里邊菌體為少數(shù),復(fù)蘇時(shí)要全部菌懸液在新鮮培養(yǎng)基上,并在建議的溫度下培養(yǎng)。銅綠假單胞菌菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行,轉(zhuǎn)種完畢,廢棄物應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理,以名污染周圍環(huán)境。銅綠假單胞菌復(fù)蘇后,應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接傳代。銅綠假單胞菌產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,創(chuàng)封閉管包裝,凍干后的菌株使用時(shí)添加配套的復(fù)蘇培養(yǎng)基后迅速而完全溶解。有著嚴(yán)格的質(zhì)檢程序,確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。銅綠假單胞菌產(chǎn)品普遍使用到食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、化工等行業(yè),疾控中心、質(zhì)檢局、出入境、藥檢局等等,得到普遍好評(píng)。雙形曲霉

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