大腸埃希氏菌(Escherichiacoli)通常稱為大腸桿菌,約占腸道菌中的1%。是一種兩端鈍圓、能運動、無芽孢的革蘭氏陰性短桿菌。大腸桿菌在1885年由Escherich發(fā)現(xiàn),它分布在自然界,大多數(shù)不致病,主要附生在人或動物的腸道里,為正常菌群。少數(shù)大腸桿菌具有毒性,可引起疾病。嬰兒出生后大腸桿菌即隨哺乳進入腸道,其代謝活動能抑制腸道內(nèi)分解蛋白質(zhì)的微生物生長,減少蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物對人體的危害,還能合成維生素B和K,正常棲居條件下不致病,若進入膽囊、膀胱等處可引起炎癥。若在水和食品中檢出大腸桿菌,可認為是被糞便污染的指標。因此大腸菌群數(shù)(或大腸菌值)常作為飲水、食物或藥物的衛(wèi)生學標準。干酪乳桿菌 DN114 嗜酸乳桿菌 CL1285 干酪乳桿菌 LBC80R 鼠李糖乳桿菌 CLR2 乳雙歧桿菌 Bl-04 兩岐雙岐桿菌 W23 .蜜蜂類芽孢桿菌菌株
金黃色葡萄球菌免疫學檢測方法:分子生物學檢測方法:核酸探針技術(shù):通過使用基因特異性核苷酸序列作為探針與目的DNA雜交的一種核酸雜交技術(shù),通過檢測該段特異性的標記物,從而判斷是否含有目標微生物。核酸探針具有分子生物學檢測技術(shù)的靈敏度高、特異性強的優(yōu)點,但是實驗周期長,操作繁瑣,如果樣品中目標微生物含量過低,極易造成樣品目標微生物未檢出,出現(xiàn)假陰性的實驗結(jié)果。環(huán)介導等溫擴增技術(shù):該技術(shù)基于DNA擴增技術(shù),能夠在恒溫條件下,根據(jù)設(shè)計的多對引物,利用鏈置換型DNA聚合酶快速的進行核酸的擴增。與PCR方法比較,環(huán)介導等溫擴增法操作更加快捷簡單,花費成本較低,且對儀器要求低,能夠普遍利用在食源性致病微生物的檢測中。Corynebacterium trachiae菌株金黃色葡萄球常見于人和動物的皮膚及與外界相通的腔道中。
大腸桿菌檢測方法:ATP生物發(fā)光法:在近些年的發(fā)展過程中,生物發(fā)光技術(shù)應(yīng)用很廣,是一種比較快速的檢測微生物的技術(shù)。在活性細胞中,ATP是其常見的能量代謝產(chǎn),可以提供細胞生理活動過程中所需的能量。并且,該技術(shù)可以在生物體內(nèi)可以在一定范圍內(nèi)保持一定的含量。食品中的大腸桿菌檢測技術(shù)可以采用熒光光度的方法,因為生物體發(fā)光的原因是有熒光素酶的作用,產(chǎn)生了發(fā)光的效果。該物質(zhì)來源于北美的螢火蟲體內(nèi),可以催化熒光素的氧化作用,不過,該物質(zhì)性質(zhì)不穩(wěn)定,可以對熒光進行快速分解。另外,該檢測技術(shù)結(jié)果獲得過程是非??斓模⑶以撛O(shè)備攜帶方便,十分適用于現(xiàn)場檢測。
除了基因工程之外,大腸桿菌作為模式生物在細菌生理及行為的研究上也有著不可代替的作用。實驗室中至常用到的是大腸桿菌的K12品系,在1997年的時候,科學家們就已經(jīng)完成了對K12品系的全基因組測序。這一品系與正常的野生型大腸桿菌品系相比,已經(jīng)失去了在腸道中生存的能力,但是卻十分適合進行實驗室研究及實驗室環(huán)境繁殖。至經(jīng)典的是美國科學家JoshuaLederberg和EdwardTatum利用大腸桿菌K12,發(fā)現(xiàn)了細菌特有的接合現(xiàn)象。這有點類似于有性生殖生物中的性別,其中含有F因子(一種可以表達性菌毛的質(zhì)粒)的可以類比為「雄性菌」,沒有F因子的可以類比為「雌性菌」。「雄性菌」可以通過其上的性菌毛與「雌性菌」發(fā)生短暫的接合作用,這一短暫的接合當中,「雄性菌」會把這個F因子的質(zhì)粒復制并轉(zhuǎn)移給「雌性菌」,從而使之也變成「雄性菌」。這一現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)也為我們進行不同菌種之間的遺傳物質(zhì)交流等分子生物學及微生物遺傳學的研究,提供了一個非常好的方法。金黃色葡萄球是革蘭氏陽性菌表示,為一種常見的食源性致病微生物。
金黃色葡萄球特性:較初,金黃色葡萄球菌對青霉素的敏感度在90%以上,從而大部分維生素在臨床上對金黃色葡萄球菌所引起的病癥起到了很好的救治作用l2J。但隨著維生素的大量使用,耐青霉素的金黃色葡萄球菌也隨之出現(xiàn),并且緊跟著也發(fā)現(xiàn)了耐其他維生素的金黃色葡萄球菌,如四環(huán)素、紅霉素等。所以很長一段時間內(nèi),救治耐藥性金黃色葡萄球菌傳染沒有達到預期的效果。微生物抗藥性突變是DNA分子的某一特定位置的結(jié)構(gòu)改變的結(jié)果,與藥物的存在無關(guān),某種藥物的存在只是作為分離某種抗藥性菌株的一種手段。銅綠假單胞菌在暗視野顯微鏡或相差顯微鏡下觀察可見細菌運動活潑。Corynebacterium trachiae菌株
大腸桿菌的質(zhì)量必須符合設(shè)計要求或合同要求,并有出廠檢驗報告。蜜蜂類芽孢桿菌菌株
銅綠假單胞桿菌凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO)對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。離心問題目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),然后過段時間之后再進行換液。在土壤濕度15-30%時,銅綠假單胞菌可生長繁殖。蜜蜂類芽孢桿菌菌株
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