銅綠假單胞菌是一種常見(jiàn)的條件致病菌,屬于非發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌。菌體細(xì)長(zhǎng)且長(zhǎng)短不一,有時(shí)呈球桿狀或線狀,成對(duì)或短鏈狀排列。菌體的一端有單鞭毛,在暗視野顯微鏡或相差顯微鏡下觀察可見(jiàn)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)活潑。銅綠假單胞菌為專性需氧菌,生長(zhǎng)溫度范圍25~42攝氏度,較適生長(zhǎng)溫度為25~30攝氏度,特別是銅綠假單胞菌在4攝氏度不生長(zhǎng),而在42攝氏度可以生長(zhǎng)的特點(diǎn)可用以鑒別。在普通培養(yǎng)基上可以生存并能產(chǎn)生水溶性的色素,如綠膿素與帶熒光的水溶性熒光素等。在血平板上會(huì)有透明溶血環(huán)。銅綠假單胞菌有菌體o抗原和鞭毛h抗原。o抗原含有內(nèi)毒養(yǎng)素和原內(nèi)毒養(yǎng)素蛋白質(zhì)兩種成份。原內(nèi)毒養(yǎng)素蛋白質(zhì)是一種高分子、低毒性,原性強(qiáng)的保護(hù)性抗原,不只存在于不同血清型銅綠假單胞菌中??莶菅挎邨U菌能夠改善有害藍(lán)藻泛溢造成的水質(zhì)渾濁問(wèn)題,水質(zhì)由渾變清,具有很強(qiáng)的凈化水質(zhì)功能。粘著劍菌菌株
保存的銅綠假單胞菌復(fù)蘇時(shí),直接從菌種保存管挑取少量細(xì)菌移種普通瓊脂平板或肉湯管,于37攝氏度培養(yǎng)18~24小時(shí)。主要生化指標(biāo)檢測(cè),取較低溫甘油保存法和半固體保存法兩種保存法保存的菌種分別進(jìn)行42攝氏度生長(zhǎng)試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、氧化-發(fā)酵試驗(yàn)、動(dòng)力試驗(yàn)及明膠液化試驗(yàn)檢測(cè)。半固體保存法在3個(gè)月內(nèi)復(fù)蘇,細(xì)菌生長(zhǎng)良好,但在6個(gè)月后復(fù)蘇,存活率降低,只達(dá)30%。移種普通瓊脂平板上無(wú)肉眼可見(jiàn)的藍(lán)綠色的色素產(chǎn)生,需連續(xù)移種3~4次后才可見(jiàn)到色素產(chǎn)生。改良的方法使菌種保存已達(dá)27個(gè)月,期間分別在6、12、18、24、27個(gè)月時(shí)復(fù)蘇,均可見(jiàn)綠膿桿菌在普通瓊脂平板上生長(zhǎng)良好,可見(jiàn)圓形、大小不一、光滑、濕潤(rùn)、邊緣不整齊的扁平菌落,菌落周圍的瓊脂被染成藍(lán)綠色;細(xì)菌存活率為100%。雪葉擬盤多毛孢菌株銅綠假單胞菌的O抗原包含脂多糖,有特異性。
銅綠假單胞桿菌的凍結(jié)保存記錄內(nèi)容包括冷凍的日期、細(xì)胞代號(hào)、冷凍管數(shù)、冷凍保存中溫度下降的情況、保存位置以及操作者。不使用銅綠假單胞桿菌前,要使用高壓蒸汽滅菌,其自身具有殺菌作用。高壓滅菌反而破壞了其分子結(jié)構(gòu),可以降低冷凍保護(hù)的效果。對(duì)細(xì)胞注意凍結(jié)保存管投入液氮,操作簡(jiǎn)單地從液氮向液氮罐內(nèi)迸發(fā)。如果液氮可能會(huì)迸發(fā),會(huì)凍壞皮膚。操作中盡量帶防寒手套、口罩、工作服或防寒鞋。要注意控制冰箱的質(zhì)量。在凍結(jié)之前確保細(xì)胞有活力,沒(méi)有微生物污染,值得凍結(jié)在這樣的細(xì)胞上。另外,幾個(gè)細(xì)胞凍結(jié)后,使1~2管復(fù)活,觀察其活力,觀察微生物是否受到污染。
SHBCCD73798侏羅紀(jì)地芽孢桿菌SHBCCD73798=VKMB-2301Geobacillusjurassicus模式菌株SHBCCD73799熱球狀尿素芽孢桿菌SHBCCD73799Ureibacillusthermosphaericus模式菌株SHBCCD73800強(qiáng)酒海桿狀菌SHBCCD73800=CCUG52119Marinobactervinifirmus模式菌株SHBCCD73801拉浩爾谷農(nóng)球菌SHBCCD73801=CGMCC1.7259=CGMCC1.8869=JCM14301=MTCC7154Agrococcuslahaulensis模式菌株SHBCCD73802解纖維素木聚糖單胞菌SHBCCD73802=CECT5975=LMG20990Xylanimonascellulosilytica模式菌株SHBCCD73803斯氏片球菌SHBCCD73803=CCUG51290=LMG23082Pediococcusstilesii模式菌株SHBCCD73804“冰川鹽單胞菌”SHBCCD73804=MTCC4321Halomonasglaciei模式菌株SHBCCD73805檸檬黃色農(nóng)球菌SHBCCD73805=ATCC700859=CCM4975=CIP106287=DSM12453=CGMCC1.6150Agrococcuscitreus模式菌株SHBCCD73806光神農(nóng)球菌SHBCCD73806=CCM4953=CIP107635=DSM14215=CGMCC1.6144Agrococcusbaldri模式菌株SHBCCD73807缺陷短波單胞菌SHBCCD73807BrevundimonasdiminutaSHBCCD73808殺蟲(chóng)貪銅菌SHBCCD73808CupriavidusnecatorMutantfromDSM428,doesnotformpoly-β-hydroxy-butyrateSHBCCD73809殺蟲(chóng)貪銅菌SHBCCD73809=ATCC17699 銅綠假單胞菌菌體的一端有單鞭毛。
保存條件斜面、穿刺菌和凍干粉可常溫運(yùn)輸,但應(yīng)在4-10度長(zhǎng)期保存。甘油菌可常溫運(yùn)輸,但應(yīng)在-80度長(zhǎng)期保存。微生物菌種應(yīng)保存于低溫、清潔和干燥的地方,室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退。
凍干管的開(kāi)啟方法:方法一:將凍干粉甩至底部圓球位置,然后用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管,將凍干管的前列(注意不是圓球端)放在火焰上加熱。然后迅速滴幾滴無(wú)菌水至加熱處,此時(shí)凍干管的前列會(huì)自動(dòng)破開(kāi)。然后用鑷子輕輕敲下凍干管前列,并將凍干管開(kāi)口處在火焰上加熱滅菌一下,并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作。然后逐漸敲開(kāi)凍干管,直至適當(dāng)位置。(敲開(kāi)位置以可以很好注入無(wú)菌水以及吸取混勻后的液體為準(zhǔn))直接敲開(kāi)法。方法二:首先將凍干粉甩至底部圓球位置,然后用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管,將凍干管的前列(注意不是圓球端)放在火焰稍微加熱滅菌。然后直接用大鑷子敲打前列,敲開(kāi)后將破口處在火焰上加熱滅菌一下,并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作。然后逐漸敲開(kāi)凍干管,直至適當(dāng)位置。(敲開(kāi)位置以可以很好注入無(wú)菌水以及吸取混勻后的液體為準(zhǔn))。 銅綠假單胞菌的標(biāo)本采集,分別來(lái)自不同影響部位的各種標(biāo)本。皮革正青霉菌種
銅綠假單胞菌在乙酰胺肉湯實(shí)驗(yàn)下呈陽(yáng)性。粘著劍菌菌株
大腸桿菌屬的系統(tǒng)發(fā)育:大量屬于該物種的菌株已得到分離和鑒定。除了血清型(videsupra),它們還可以根據(jù)它們的系統(tǒng)發(fā)育(即推斷的進(jìn)化史)進(jìn)行分類。如下所示,其中該物種分為六組。特別是全基因組序列的使用產(chǎn)生了高度支持的系統(tǒng)發(fā)育。基于這些數(shù)據(jù),大腸桿菌的5個(gè)亞種被區(qū)分開(kāi)來(lái)。系統(tǒng)發(fā)育距離(“關(guān)聯(lián)性”)和病理學(xué)之間的聯(lián)系很小,例如O157:H7血清型菌株形成一個(gè)分支(“一個(gè)獨(dú)特的群”)—下面的E群——都是腸出血性菌株(EHEC),但并不是所有的EHEC菌株都是密切相關(guān)的。事實(shí)上,四種不同的志賀氏菌嵌套在大腸桿菌菌株(見(jiàn)上),然而E.albertii和E.fergusonii不屬于這個(gè)群體。事實(shí)上,在包括類型菌株在內(nèi)的系統(tǒng)基因組研究中,所有志賀菌都被放在大腸桿菌的一個(gè)亞種內(nèi),因此很難進(jìn)行相應(yīng)的重新分類。所有常用的研究菌株大腸桿菌屬于a組,主要來(lái)源于Clifton的K-12菌株(λ?f?。O16)并且在較小程度上來(lái)自d'Herelle的大腸桿菌菌株(B菌株)(O7)。粘著劍菌菌株
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