培養(yǎng)基按成分分類有哪些?按用途分類:根據(jù)用途不同,培養(yǎng)基可分為基礎培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、厭氧菌培養(yǎng)基等?;A培養(yǎng)基(basic media) 大多數(shù)微生物共同需要的營養(yǎng)基礎。某--微生物如有特殊需要,可在此基礎上添加某種成分即可,如蛋白胨水、肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂等。1%蛋白胨水培養(yǎng)基便是一個較簡單的基礎培養(yǎng)基,該基礎培養(yǎng)基本身可供一般細菌增菌培養(yǎng)和靛基質試驗用,若再加入指示劑和糖類,則配成糖發(fā)酵培養(yǎng)基,供糖發(fā)酵試驗用,成為鑒別培養(yǎng)基;若在1%蛋白胨水中增加氯化鈉用量并將pH提高到8.6左右,則變成堿性蛋白胨水,用于霍亂弧菌的增菌培養(yǎng),成為專門用的增菌培養(yǎng)基。半固態(tài)培養(yǎng)基是一種介于液態(tài)培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基之間的混合形式,常用于篩選微生物菌株。氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(Ryan)
按培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分是否完全區(qū)分:1.基本培養(yǎng)基,亦稱“較低限度培養(yǎng)基”。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養(yǎng)基,稱為基本培養(yǎng)基,是含有營養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基,常用“[-]”表示。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長因子,所以經(jīng)過誘變過的營養(yǎng)缺陷型菌株不能生長。2.完全培養(yǎng)基,基礎培養(yǎng)基添加血清等物質后,叫完全培養(yǎng)基,也叫(血清)細胞培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基可用來滿足微生物的各種營養(yǎng)缺陷型菌株的生長需要,常以“[+]”表示。3.補充培養(yǎng)基,凡是只能滿足相應的營養(yǎng)缺陷型生長需要的組合培養(yǎng)基,稱為補充培養(yǎng)基,它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營養(yǎng)因子而組成的。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營養(yǎng)因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示。NPNL培養(yǎng)基酵母培養(yǎng)基通常包含酵母營養(yǎng)素、碳水化合物和氮源。
長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產(chǎn)生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調整。
選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基:葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化銨0.1%,磷酸二氫鉀0.25%,磷酸氫二鈉0.05%,七水合硫酸鎂0.1%,七水合硫酸鐵0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉紅0.003%,pH4.5。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,磷酸二氫鉀0.02%,七水合硫酸鎂0.02%,氯化鈉0.02%,二水合硫酸鈣0.01%,碳酸鈣0.5%特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細胞培養(yǎng)。
細菌培養(yǎng)基之根瘤菌培養(yǎng)基:葡萄糖10g,磷酸氫二鉀0.5g,碳酸鈣3g,硫酸鎂0.2g,酵母粉0.4瓊脂20g,水1000ml,1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。放線菌培養(yǎng)基:(1)淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號培養(yǎng)基)可溶性淀粉2.0g,硝酸鉀0.1g,磷酸氫二鉀0.05g,氯化鈉0.05g,硫酸鎂0.05g,硫酸亞鐵0.001g,瓊脂2g,水100ml。先把淀粉放在燒杯里,用5ml水調成糊狀后,倒入95ml水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補足失水。調整pH值到7.2-7.4,分裝后滅菌,備用。雜質會影響培養(yǎng)基的成分,因此制備培養(yǎng)基時需要進行滅菌。沙氏瓊脂培養(yǎng)基(含氯霉素) GB
培養(yǎng)基根據(jù)其組成、用途、酸堿度等不同因素分類,如營養(yǎng)瓊脂、LB培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基等。氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(Ryan)
以MS培養(yǎng)基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(Ryan)
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