在保存干粉培養(yǎng)基時(shí)還需要注意以下注意事項(xiàng):盡可能縮減干粉培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間不間斷存儲(chǔ)。因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間不使用,尤其是室溫下,會(huì)受到光照、濕度等自然環(huán)境的影響,溫濕度波動(dòng),會(huì)產(chǎn)生不穩(wěn)定的物理與化學(xué)效應(yīng),導(dǎo)致化學(xué)反應(yīng)發(fā)生,細(xì)菌及其他微生物生長(zhǎng)。在保存時(shí)使用密封包裝進(jìn)行,使其隔絕空氣和水分及其他微生物的進(jìn)入。及時(shí)檢查干粉培養(yǎng)基的保質(zhì)期,避免超過(guò)保質(zhì)期的使用,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。準(zhǔn)確記錄干粉培養(yǎng)基的配方,標(biāo)簽上應(yīng)說(shuō)明干粉培養(yǎng)基的名稱、生產(chǎn)日期、有效期,混合使用指導(dǎo),以方便日后使用。無(wú)血清培養(yǎng)基是在常規(guī)培養(yǎng)基中添加多種蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子等等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)代替動(dòng)物血清。馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) USP/EP
對(duì)于已經(jīng)購(gòu)買來(lái)的預(yù)裝培養(yǎng)基,其內(nèi)部較初的狀態(tài)已經(jīng)是無(wú)菌的。因此,在通常情況下,我們不需要對(duì)新的預(yù)裝培養(yǎng)基進(jìn)行任何形式的消毒處理。只需要在使用之前,檢查預(yù)裝培養(yǎng)基瓶口是否無(wú)菌,便可以直接使用。在使用過(guò)程中,應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范,避免外界微生物的污染。對(duì)于需要自制的培養(yǎng)基而言,其情況也不盡相同。如果自制的培養(yǎng)基中包含天然成分,那么在自制之后就需要進(jìn)行消毒處理,以殺死培養(yǎng)基中可能存在的微生物。在消毒處理之后,再將培養(yǎng)基裝入瓶中,就可以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)使用。同時(shí),在使用自制的預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),需要嚴(yán)格控制其培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境等參數(shù),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA) GB培養(yǎng)基根據(jù)功能分為選擇性培養(yǎng)基、區(qū)分性培養(yǎng)基、富集培養(yǎng)基等。
在使用預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),裝有培養(yǎng)基的容器需要以適當(dāng)?shù)臏囟却鎯?chǔ),不要將其暴露在陽(yáng)光下或在高溫環(huán)境中存儲(chǔ)。因?yàn)闇囟冗^(guò)高會(huì)致使培養(yǎng)基變質(zhì),影響實(shí)驗(yàn)效果。而溫度過(guò)低則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)效果。因此在使用前需要查看培養(yǎng)基的理想存儲(chǔ)條件,進(jìn)行妥善的保存。當(dāng)使用預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),需要進(jìn)行無(wú)菌操作。先用手或棉花球蘸上醫(yī)用酒精、經(jīng)冷卻壓縮器或火燒消毒的鐵鉆區(qū)外部表面消毒,再取樣放入容器或燒杯中。在轉(zhuǎn)移前,需要仔細(xì)消毒取樣的容器或燒杯,以保證懸浮在空氣中的細(xì)菌和病毒不會(huì)在樣品中繁殖,造成別樣的影響。
在生物領(lǐng)域中,預(yù)裝培養(yǎng)基被普遍應(yīng)用于微生物學(xué)和分子生物學(xué)研究。在微生物學(xué)研究中,預(yù)裝培養(yǎng)基可用于細(xì)菌、細(xì)菌和其他微生物的培養(yǎng)和鑒定。由于預(yù)裝培養(yǎng)基易于存儲(chǔ)和運(yùn)輸,不需要復(fù)雜的制備步驟,并且具有保證培養(yǎng)基質(zhì)量的優(yōu)勢(shì),因此廣受歡迎。在分子生物學(xué)研究中,預(yù)裝培養(yǎng)基也被普遍用于菌株篩選、基因工程等實(shí)驗(yàn)中。預(yù)裝培養(yǎng)基在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用也很普遍,主要用于臨床檢驗(yàn)和藥物研發(fā)。在臨床檢驗(yàn)中,預(yù)裝培養(yǎng)基可用于細(xì)菌、細(xì)菌、病毒等微生物的診斷和鑒定,例如尿液檢測(cè)、血液培養(yǎng)等。同時(shí),預(yù)裝培養(yǎng)基可以降低交叉影響的風(fēng)險(xiǎn),從而提高實(shí)驗(yàn)室的安全性。在藥物研發(fā)中,預(yù)裝培養(yǎng)基可用于檢測(cè)藥品對(duì)微生物的殺滅效果,從而確定藥物的抑菌譜和較佳用藥途徑。經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理的培養(yǎng)基能保證無(wú)細(xì)菌污染。
生長(zhǎng)基(也稱為普遍培養(yǎng)基,Nutrient Agar)是較常用的預(yù)裝培養(yǎng)基之一,由肉湯、酵母提取物和瓊脂組成,其中肉湯作為氮源,酵母提取物是有機(jī)碳源,瓊脂則提供了基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)。這種培養(yǎng)基適用于大多數(shù)微生物的生長(zhǎng),可用于分離和純化菌落。微生物篩選基涵蓋了不同類型的預(yù)裝培養(yǎng)基,例如:MacConkey Agar、Eosin Methylene Blue Agar(EMB)、Sabouraud Agar等等。這些培養(yǎng)基是為了篩選或區(qū)別不同類型的微生物而設(shè)計(jì)的,比如MacConkey Agar用于篩選革蘭氏陰性桿菌,EMB用于篩選帶有發(fā)酵代謝特征的細(xì)菌,而Sabouraud Agar則是用于細(xì)菌的培養(yǎng)。特定微生物培養(yǎng)基是為了培養(yǎng)和分離特定微生物而設(shè)計(jì)的,比如:Thayer Martin Agar是專門用于淋球菌的培養(yǎng)基,Lowenstein Jensen Agar是用于結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基。因?yàn)檫@些特定微生物通常較為難培養(yǎng),所以特定的培養(yǎng)基在選擇上尤為重要。不同的微生物物種需要不同的培養(yǎng)基。庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)
培養(yǎng)基還可以根據(jù)所需生長(zhǎng)的微生物類別,加入特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),例如血清、血紅蛋白等等。馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) USP/EP
在制備培養(yǎng)基的過(guò)程中,安全是第1原則。要保證培養(yǎng)基的無(wú)菌性、無(wú)致病性、無(wú)致變性,避免應(yīng)用醫(yī)療性維生素、肽聚糖、半合成血清等,以避免在細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的雜菌和微生物的病變,對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的準(zhǔn)確性和可靠性產(chǎn)生不利影響。培養(yǎng)基中含有營(yíng)養(yǎng)成分,必須考慮基本食物成分(水、碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、微量元素等)作為通用要素。不同類型的生物需要不同的營(yíng)養(yǎng)成分,因此在制備培養(yǎng)基時(shí)必須注意保證各種營(yíng)養(yǎng)成分的均衡和充足,以確保生物體生長(zhǎng)、繁殖的需要和生理上的健康狀況。馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) USP/EP