培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。大多數(shù)細(xì)菌都能在富含有機物的基質(zhì)中繁殖生長,因此有機培養(yǎng)基是基本的培養(yǎng)基之一。麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基(含氯霉素)
不同的研究目的需要不同種類的培養(yǎng)基。例如,對于細(xì)胞的生化實驗,需要使用無血清(serum-free)培養(yǎng)基,以避免血清中對實驗結(jié)果造成的干擾;而在進(jìn)行免疫細(xì)胞培養(yǎng)時,需要使用低血清(low-serum)培養(yǎng)基,以保證免疫活性。此外,在一些特定的研究領(lǐng)域中,需要使用小份量培養(yǎng)基、無菌培養(yǎng)基或其他特殊處理的培養(yǎng)基。實驗室的環(huán)境也會對培養(yǎng)基的選擇產(chǎn)生影響。例如,高溫、高濕度或高氣壓等極端環(huán)境下,需要選擇相應(yīng)的抗旱、抗熱或抗氧化的培養(yǎng)基,以確保實驗的成功。此外,在空氣中存在大量的微生物和氣溶膠時,為避免微生物的污染,需要使用低菌量的培養(yǎng)基或?qū)嶒炇壹墑e的干擾者。Letheen肉湯基礎(chǔ) ISO常見的培養(yǎng)基類型包括誘導(dǎo)性培養(yǎng)基、不含某種特定營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基和選擇性培養(yǎng)基。
如何有效避免培養(yǎng)基污染?做好實驗操作規(guī)則:在實驗中制定好統(tǒng)一意識的操作規(guī)則至關(guān)重要。例如,制定有關(guān)實驗前和實驗中洗手、換鞋、穿戴實驗服的規(guī)定。還要保證操作的環(huán)境衛(wèi)生、實驗材料消毒等等。這樣可以降低實驗環(huán)境中的細(xì)菌來源,保證實驗材料的純度,同時也可以提高操作人員的自覺性和流程規(guī)范性,然后避免因人為原因而產(chǎn)生的污染。做好培養(yǎng)基制作:在培養(yǎng)基的制作過程中,一些常見的問題往往會導(dǎo)致污染,例如:不干凈的試管,不潔凈的機器設(shè)備,不正確的過濾操作和培養(yǎng)基儲存不當(dāng)?shù)?。為了避免這些問題,實驗室人員應(yīng)該采用高標(biāo)準(zhǔn)的實驗原料,在制作培養(yǎng)基前徹底清洗操作區(qū),并使用無菌試管及機器設(shè)備,千萬不要盲目省事不進(jìn)行適當(dāng)?shù)膶嶒灉?zhǔn)備和操作過程。
預(yù)裝培養(yǎng)基的有效期是指由于技術(shù)和保質(zhì)問題而限定的使用時限。雖然預(yù)裝培養(yǎng)基在生產(chǎn)過程中基本上是消毒處理的,但是在使用過程中,仍然會存在著微生物和其他污染因素對培養(yǎng)基的影響。因此,即使保質(zhì)期未過,在使用之前也應(yīng)檢查其質(zhì)量,并確保其適用于實驗的要求。一般情況下,市售的預(yù)裝培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為6-12個月,但是這只是一個約定值,并不是通用值。在制造過程中,每個廠家都會考慮到不同的因素,如培養(yǎng)基成分、凝膠結(jié)構(gòu)、包裝方式和儲存條件等,保質(zhì)期因此也不一樣。因此,在購買預(yù)裝培養(yǎng)基時,我們應(yīng)該認(rèn)真查看其保質(zhì)期,以便判斷其可行性。常用的培養(yǎng)基中添加的基本營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、磷酸鹽、有機物、無機鹽和微量元素。
干粉培養(yǎng)基應(yīng)該存放在干燥、陰涼、避免陽光直射的地方,并且應(yīng)該放置在干燥箱或保存干燥袋中以防潮。這樣可以避免濕度和溫度變化對干粉培養(yǎng)基的影響,保證其質(zhì)量和活性。保存干粉培養(yǎng)基的容器也需要特殊的條件。干粉培養(yǎng)基通常在塑料瓶中包裝,因此,在保存期間應(yīng)該保持瓶口嚴(yán)密封閉,以避免細(xì)菌、霉菌和空氣的污染。此外,保存干粉培養(yǎng)基的容器應(yīng)該標(biāo)有保存日期、成分配比和生產(chǎn)批次等信息,以幫助實驗室管理人員對干粉培養(yǎng)基的有效期進(jìn)行控制和跟蹤。常用的培養(yǎng)基制備方法包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。Letheen肉湯基礎(chǔ) ISO
經(jīng)過無菌處理的培養(yǎng)基能保證無細(xì)菌污染。麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基(含氯霉素)
如果干粉培養(yǎng)基使用后得以正確儲存,也符合使用規(guī)范,完全可以重復(fù)使用。在使用之前,需要將其儲存在密封的、不受光的容器中,以保持其干燥和細(xì)菌無菌。另外,為了增加干粉培養(yǎng)基的使用效率和可靠性,建議使用干燥無菌的器材來制備干粉培養(yǎng)基。在制備過程中,應(yīng)充分混合干粉培養(yǎng)基和水,并在符合溫度和時間要求的條件下滅菌。只有在這樣良好的操作和儲存環(huán)境下,干粉培養(yǎng)基才能保持干燥、無菌,質(zhì)量得到保證。當(dāng)然,為了保證實驗的可重復(fù)性和一致性,建議在重復(fù)使用干粉培養(yǎng)基時,及時驗證其培養(yǎng)效果??梢灾苽湟欢康母煞叟囵B(yǎng)基,將其分成若干批,每次只取一小部分用于實驗。實驗結(jié)果的一致性可以從不同批次之間的觀察和比較中得到驗證。麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基(含氯霉素)