4.**培養(yǎng)條件**:-培養(yǎng)基的制備方法包括稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基14.2g加入180ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取1.2g李斯特氏菌添加劑,加入20ml無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動(dòng),使其乳化均勻,將二者分別于121℃高壓滅菌15分鐘。冷至50℃左右時(shí),把李斯特氏菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑,混勻,傾入無菌平皿。5.**質(zhì)量控制**:-質(zhì)控菌株在37℃培養(yǎng)24-48小時(shí),單增李斯特氏菌和綿羊李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,形成藍(lán)色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。其他菌如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌則不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不良。6.**儲(chǔ)存條件**:-制備好的固體平板保存于2-8℃,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8℃。7.**注意事項(xiàng)**:-嚴(yán)格按照標(biāo)簽說明進(jìn)行配制培養(yǎng)基,避免混合時(shí)培養(yǎng)基和添加劑溫度過高導(dǎo)致平板出現(xiàn)絮狀物。干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。這些特點(diǎn)使得李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。TBA培養(yǎng)基的pH值也是經(jīng)過優(yōu)化的,以適應(yīng)特定細(xì)菌群體的生長(zhǎng)需求。阿姆斯壯鐮刀菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)
葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)皿是一種常用的微生物培養(yǎng)基,它由葡萄糖和蛋白胨作為主要成分,配合其他營養(yǎng)物質(zhì)和瓊脂制成。這種培養(yǎng)皿廣泛應(yīng)用于微生物的培養(yǎng)、分離、鑒定和計(jì)數(shù)。主要成分葡萄糖:作為碳源,提供能量和生長(zhǎng)所需的碳元素。蛋白胨:提供氮源,含有氨基酸、維生素和生長(zhǎng)因子,促進(jìn)微生物生長(zhǎng)。氯化鈉:維持菌體滲透壓,對(duì)某些微生物生長(zhǎng)有利。磷酸鹽緩沖系統(tǒng):維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定。瓊脂:作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體狀態(tài),便于微生物在其上生長(zhǎng)。用途細(xì)菌培養(yǎng):適用于多種細(xì)菌的生長(zhǎng),尤其是革蘭氏陽性菌。分離培養(yǎng):用于從復(fù)雜樣本中分離特定類型的細(xì)菌。微生物鑒定:通過觀察菌落的形態(tài)、顏色和生長(zhǎng)特性來鑒定細(xì)菌種類。計(jì)數(shù):進(jìn)行微生物的定量分析,如菌落計(jì)數(shù)。敏感性測(cè)試:通過在培養(yǎng)皿中加入抗生物質(zhì),測(cè)試細(xì)菌對(duì)不同抗生物質(zhì)的敏感性。使用方法按照培養(yǎng)基配方稱取葡萄糖、蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽和瓊脂。加入適量的蒸餾水,加熱攪拌至完全溶解。調(diào)整pH至適宜范圍(通常為中性pH 7.0-7.4)。進(jìn)行高壓滅菌,通常在121℃下保持15-20分鐘。冷卻至50-60℃,倒入無菌培養(yǎng)皿中,待其凝固。接種待培養(yǎng)的微生物樣本,根據(jù)需要進(jìn)行需氧或厭氧培養(yǎng)。MS大量元素酪氨酸瓊脂ISP培養(yǎng)基含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、L-天冬酰胺、L-酪氨酸、瓊脂等。
改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿通常用于細(xì)菌的培養(yǎng)和分離,而不是直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。然而,通過一些調(diào)整和添加特定的成分,它也可以用于某些類型的細(xì)胞培養(yǎng)。以下是改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿用于培養(yǎng)和分離細(xì)胞的一些方法:選擇合適的基礎(chǔ)培養(yǎng)基:改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿的基礎(chǔ)瓊脂可以作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),但需要添加適合特定細(xì)胞類型的營養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子。添加細(xì)胞生長(zhǎng)所需的成分:為了滿足細(xì)胞生長(zhǎng)的需要,需要在瓊脂中添加血清、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和必要的緩沖系統(tǒng)。調(diào)整瓊脂濃度:根據(jù)細(xì)胞的粘附特性,可能需要調(diào)整瓊脂的濃度,以便細(xì)胞能夠在瓊脂上生長(zhǎng)和擴(kuò)散。選擇性添加抗生物質(zhì):如果需要防止細(xì)菌污染,可以在培養(yǎng)基中添加適量的抗生物質(zhì)。
LPM瓊脂培養(yǎng)皿的制備方法LPM瓊脂培養(yǎng)皿的制備通常遵循以下步驟:稱量:首先,根據(jù)需要的培養(yǎng)基體積,準(zhǔn)確稱量LPM瓊脂粉末。溶解:將稱量好的LPM瓊脂粉末溶解在蒸餾水中,通常使用1000毫升水溶解50.5克培養(yǎng)基粉末。滅菌:將溶解后的培養(yǎng)基溶液進(jìn)行高壓滅菌,通常在121℃下保持15分鐘。冷卻:滅菌后的培養(yǎng)基需要冷卻至45-50℃,以便于后續(xù)添加添加劑。添加添加劑:在冷卻后的培養(yǎng)基中加入LPM瓊脂添加劑,如拉氧頭孢,每100毫升培養(yǎng)基中加入1支?;旌希簩⑻砑觿┡c培養(yǎng)基混合均勻。傾倒入平皿:將混合好的培養(yǎng)基溶液倒入無菌平皿中,待其凝固后即可使用。溴甲酚紫乳糖瓊脂培養(yǎng)皿可以用于檢測(cè)和分離能夠發(fā)酵乳糖的微生物,如大腸桿菌等,在微生物領(lǐng)域有很大作用。
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(ColumbiaAgar)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**用途**:-主要用于梭菌的分離培養(yǎng),特別是用于藥品中梭菌的檢測(cè)。2.**成分組成**:-培養(yǎng)基的主要成分包括酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、玉米淀粉、氯化鈉和瓊脂。這些成分提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,維持均衡的滲透壓,并作為凝固劑。3.**添加劑**:-每瓶需配套添加硫酸慶大霉素,以抑制腸桿菌科和銅綠假單胞菌的生長(zhǎng)。4.**pH值**:-培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃)。5.**配制方法**:-稱取44g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml純化水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃,加入硫酸慶大霉素20mg,混勻,傾入無菌平皿,備用。6.**培養(yǎng)條件**:-將培養(yǎng)基放置于30℃-35℃恒溫培養(yǎng)箱中,進(jìn)行厭氧培養(yǎng)48-72小時(shí)。7.**質(zhì)控結(jié)果**:-接種質(zhì)控菌株如生孢梭菌、大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌,觀察其生長(zhǎng)情況和特征。生孢梭菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,形成無色菌落,而大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌則被抑制。8.**注意事項(xiàng)**:-培養(yǎng)基中含少量淀粉,若滅菌前未加熱煮沸溶解,滅菌后冷卻可能出現(xiàn)少量白色沉淀。
TBA培養(yǎng)皿的使用方法通常有將待測(cè)樣本接種到培養(yǎng)皿中,然后在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間,觀察菌落的生長(zhǎng)。阿姆斯壯鐮刀菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)
MMA培養(yǎng)皿通常指的是含有改良McBride培養(yǎng)基(ModifiedMcBrideAgar,簡(jiǎn)稱MMA)的培養(yǎng)皿,這是一種用于分離和培養(yǎng)單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes,簡(jiǎn)稱L.monocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。成分與原理MMA培養(yǎng)基的主要成分包括:胰蛋白胨:提供氮源和氨基酸。酵母浸粉:提供維生素和生長(zhǎng)因子。氯化鈉:提供電解質(zhì)和維持滲透壓。磷酸氫二鉀:緩沖體系的一部分。硫酸鎂:作為某些酶的輔助因子。甘露醇:作為可發(fā)酵的碳源。多粘菌素B:抑制革蘭氏陰性菌和部分革蘭氏陽性菌。萘酚亞甲基藍(lán):作為指示劑,可檢測(cè)還原作用。瓊脂:作為凝固劑。MMA培養(yǎng)基通過其選擇性抑制成分,如多粘菌素B,可以抑制大部分非李斯特菌的生長(zhǎng),而為李斯特菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。用途MMA培養(yǎng)皿主要用于:食品樣本中李斯特菌的分離:在食品工業(yè)中,用于檢測(cè)和監(jiān)控李斯特菌的污染。環(huán)境樣本的監(jiān)測(cè):用于檢測(cè)加工環(huán)境和設(shè)備中可能存在的李斯特菌。臨床樣本的檢測(cè):在醫(yī)院和臨床實(shí)驗(yàn)室中,用于分離和鑒定李斯特菌。阿姆斯壯鐮刀菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)