固定（1）小塊組織固定法：這是相當(dāng)常用的方法，從人體或動物體取下的小塊組織，須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定，通常，標(biāo)本與固定液的比例為1:4～20，但組織塊不宜過大過厚，否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。（2）注射、灌注固定法：某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部，或需要對整個(gè)臟器或整個(gè)動物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管，經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身，從而得到充分的固定。（3）蒸汽固定法：比較小而厚的標(biāo)本，可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。相當(dāng)常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。平頂山病理切片廠家銷售

制作病理切片脫水透明 標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來，這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。 脫水的步驟是:80%、90%、95%各種濃度乙醇2小時(shí)，此過程可用脫水機(jī)自控完成。 **也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑，但因其脫水能力很強(qiáng)，對組織有劇烈收縮作用，在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、**等不溶于石蠟，還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。上海病理切片公司

病理切片制作時(shí)將部分有病變的組織或臟器經(jīng)過各種化學(xué)品和埋藏法的處理，使之固定硬化，在切片機(jī)上切成薄片，粘附在玻片上，染以各種顏色，供在顯微鏡下檢查，以觀察病理變化，作出病理診斷。 病理切片操作規(guī)范： 一、巨檢結(jié)束后點(diǎn)清塊數(shù)，記錄簽收。 二、組織包埋完成后進(jìn)行清點(diǎn)蠟塊數(shù)量。 三、大標(biāo)本固定時(shí)間不得少于6小時(shí)；小標(biāo)本不得少于3小時(shí)。 四、固定液必須及時(shí)更換，固定后必須流水沖洗。 五、固定、脫水溫度不得高于37℃。 六、包埋用石蠟必須過濾。 七、試劑必須及時(shí)更換。 八、切片刀必須鋒利，用力均勻，切片厚度3—5微米。切片完整無污染，無皺褶。 九、胃鏡、穿刺等小活檢組織切片必須作連續(xù)性切片，數(shù)量不得少于8張。 十、組織片貼附，應(yīng)在除去標(biāo)簽位置后玻片的中間。 十一、封固前必須經(jīng)酒精充分脫水，二甲苯透明，濕封。 十二、封片時(shí)不得有氣泡，不得有樹膠外溢。 十三、標(biāo)簽必須貼于玻片左側(cè)，編號字跡必須清楚。 十四、取材后的制片工作一般應(yīng)在2個(gè)工作日內(nèi)完成。 十五、切片完成后交付醫(yī)師時(shí)必須按照記錄當(dāng)面清點(diǎn)

制作病理切片浸蠟、包埋 (1)使石蠟浸入組織中，取代組織中含有的透明劑。 (2)包埋:將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中，石蠟?zāi)毯?，組織即被包在其中，稱蠟塊，此過程稱為包埋。 5.制作病理切片切片和貼片 (1)修整蠟塊:可視其組織的大小，在組織邊緣約0.1~0.2cm處，切去余蠟部分，否則易造成組織皺縮不平。 (2)準(zhǔn)備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀 (3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。 (4)安裝切片刀:將切片刀安裝在切片機(jī)的刀臺上，把刀臺上的緊固螺絲旋緊，使切片時(shí)不產(chǎn)生振動，能保持一定的切片厚度。 (5)切片的厚度:切片機(jī)的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0~50μm或0~25μm，可任意選擇其厚度，石蠟切片的厚度一般在4~6μm。 (6)切片 (7)鋪片:用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40~45℃的水面上，借水的張力和水的溫度，將略皺的蠟帶自然展平。 (8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后，將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水，置入60~65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15~30分鐘，脫去溶化組織間隙的石蠟。

制作病理切片染色和封片 常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法，簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色，如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色，如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。 H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固 常規(guī)蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。浙江病理切片廠

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染色和封片常用的染色方法是蘇木素-伊紅（Hematoxylin-Eosin）染色法，簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色，如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等；伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色，如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固常規(guī)蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅（phloxine）,此外也有用桔黃G（OrangeG）、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。平頂山病理切片廠家銷售

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