黑點已經(jīng)產(chǎn)生了,如何進(jìn)行處理?
如果判定黑點是污染,請及時將細(xì)胞處理后丟棄。其他情況,可參照以下進(jìn)行:如果是懸浮細(xì)胞:收集細(xì)胞上清慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS洗2-3遍,洗的時候,輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,再棄去PBS,消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,讓細(xì)胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來,去掉低濃度胰酶,然后正常消化細(xì)胞,將收集的細(xì)胞懸液慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶,并可以嘗試適當(dāng)增加血清濃度進(jìn)行培養(yǎng)。 細(xì)胞計數(shù)儀的型號對比。海南應(yīng)用細(xì)胞計數(shù)儀
眾所周知,活細(xì)胞密度(VCD)和活率(viability)是評估哺乳動物細(xì)胞系生長狀態(tài)的重要指標(biāo)。生物制藥研發(fā)人員進(jìn)行懸浮細(xì)胞培養(yǎng),每天所不能避免的工作,就是取樣計數(shù)。使用細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行人工計數(shù)無疑是金標(biāo)準(zhǔn)方法。
但這個傳統(tǒng)方法其勞動強(qiáng)度十分驚人,樣品量少的時候還能吃得消,樣品量大一些,甚至于要做大規(guī)模的DOE實驗時,估計很多實驗人員想死的心都會有。而且人工計數(shù)有較強(qiáng)的主觀性,對操作人員的經(jīng)驗及操作熟練度有一定要求,導(dǎo)致有時候數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可比性會受到質(zhì)疑。
拓開細(xì)胞計數(shù)儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實驗室里高效率,高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞檢測等工作,是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。 衢州特點細(xì)胞計數(shù)儀細(xì)胞計數(shù)儀的實用性強(qiáng)嗎?
實驗中操作和分析軟件的合規(guī)性
合規(guī)性還是針對于質(zhì)控(QC)部門、GMP實驗室和生產(chǎn)車間。因為生產(chǎn)的藥物,各個國家對藥物生產(chǎn)都有嚴(yán)格的法規(guī)要求,包括GMP和FDA等,要求所測試的數(shù)據(jù)是可追蹤的,使用儀器的分析軟件有多級用戶權(quán)限管理和審計追蹤、電子簽名功能(,以保證測試數(shù)據(jù)的完整性、安全性和可靠性。
除此之外,大家還需要結(jié)合自己的預(yù)算,每天要測試的樣品數(shù)量,實驗室可放置儀器的空間大小等其他各個方面綜合起來考慮,終選擇一款合適的細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀。
實驗中儀器之間數(shù)據(jù)的一致性
對于生物制藥公司的工藝開發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)控部門,一般會選擇使用相同的分析儀器,這樣采用相同的分析方法,可以保持上下游測試條件的一致性。另外,不同地區(qū)的生產(chǎn)車間要保持生產(chǎn)質(zhì)量的一致性,很多時候也會使用同型號的分析儀器,但所使用儀器之間檢測結(jié)果的可比性就成了一個考察因素,并且檢測過程中人工操作的影響越小越好,以減少人為操作帶來的誤差。
這樣得到的生物藥質(zhì)量才可以有保證,這也是為何GMP和FDA等法規(guī)會有這方面的要求。所以,對于生產(chǎn)質(zhì)控部門采購細(xì)胞活率分析儀,這點就特別需要考慮。 全自動細(xì)胞計數(shù)儀是實驗室必備。
自動化細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀就可以替代傳統(tǒng)的手動計數(shù)法,滿足藥物研發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)控的需求。但對于這些自動化的細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀,目前門類也很繁多,如何從中找到適合自己所需的那款呢,
準(zhǔn)確性無疑是重要的,我們購買的任何分析儀器,如果不能保證準(zhǔn)確性,那就無法正常使用,還不如回到光學(xué)顯微鏡+血球計數(shù)板純手動的方法。
計數(shù)結(jié)果的重復(fù)性好壞,對全自動細(xì)胞計數(shù)儀而言,除了取樣要有代表性外,剩下考察的是儀器的穩(wěn)定性和軟件對細(xì)胞識別的一致性。目前各家的細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀對細(xì)胞的識別都問題不大,除了某些容易團(tuán)聚的細(xì)胞,需要增加一個團(tuán)聚度參數(shù)。 細(xì)胞計數(shù)儀適用于什么領(lǐng)域?四川推廣細(xì)胞計數(shù)儀定制價格
全自動細(xì)胞計數(shù)儀的成本。海南應(yīng)用細(xì)胞計數(shù)儀
細(xì)胞接種密度多少合適?
依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經(jīng)驗:一般倍增時間24 h內(nèi)的細(xì)胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時間24-48 h的細(xì)胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時間超過48h的細(xì)胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。
如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中黑點的產(chǎn)生?
掌握細(xì)胞傳代的比較好時機(jī),不要細(xì)胞長老了再傳代;掌握好消化時間,防止消化過度產(chǎn)生細(xì)胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數(shù);將培養(yǎng)液的PH調(diào)到比較好;嚴(yán)格控制水質(zhì)和器皿的清潔。 海南應(yīng)用細(xì)胞計數(shù)儀
上海拓開生物科技有限公司位于奉金路469號4幢3層1296室,交通便利,環(huán)境優(yōu)美,是一家生產(chǎn)型企業(yè)。上海拓開是一家有限責(zé)任公司企業(yè),一直“以人為本,服務(wù)于社會”的經(jīng)營理念;“誠守信譽(yù),持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。公司始終堅持客戶需求優(yōu)先的原則,致力于提供高質(zhì)量的葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計數(shù)儀。上海拓開將以真誠的服務(wù)、創(chuàng)新的理念、***的產(chǎn)品,為彼此贏得全新的未來!