細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總
一般拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
收到細(xì)胞先不開蓋,用酒精將整個細(xì)胞瓶外壁進(jìn)行消毒,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各兩張),排除細(xì)胞本身污染的情況。
何時須更換培養(yǎng)基?
視細(xì)胞生長密度而定,常規(guī)細(xì)胞2-3天更換培養(yǎng)基。
細(xì)胞何時進(jìn)行傳代較好?
一般情況下細(xì)胞生長至完全匯合后就應(yīng)該傳代,所有細(xì)胞生長都有一個要求不宜生長過密(也就是常說的長老了),但有接觸抑制的細(xì)胞,在匯合前就必須進(jìn)行傳代,這類細(xì)胞一般在密度70-80%就進(jìn)行傳代,否則會引起細(xì)胞分化。 全自動細(xì)胞計數(shù)儀的對比數(shù)據(jù)。廣東什么是細(xì)胞計數(shù)儀定制價格
單細(xì)胞測序?qū)嶒?yàn)的第一步是單細(xì)胞懸液的制備,而懸液制備中細(xì)胞計數(shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細(xì)胞測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,但是關(guān)于細(xì)胞計數(shù)您真的了解嗎?
目前細(xì)胞計數(shù)主要使用臺盼藍(lán)染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1)臺盼藍(lán)染色原理:臺盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色。而死細(xì)胞的細(xì)胞膜透性增高,可使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色(藍(lán)色)。
2)雙熒光AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)可以通過完整的細(xì)胞膜,嵌入所有細(xì)胞(活細(xì)胞和死細(xì)胞)的細(xì)胞核,呈現(xiàn)綠色熒光;碘化丙啶(PI)只能通過不完整的細(xì)胞膜,即死細(xì)胞的細(xì)胞膜,嵌入所有死細(xì)胞的細(xì)胞核,呈現(xiàn)紅色熒光。
拓開細(xì)胞計數(shù)儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實(shí)驗(yàn)室里高效率,高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞檢測等工作,是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。 安徽有什么細(xì)胞計數(shù)儀咨詢報價全自動細(xì)胞計數(shù)儀的檢測速度。
染色法鑒定機(jī)理
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法,根據(jù)染色機(jī)理的不同,染料或使死細(xì)胞著色,或使活細(xì)胞著色。死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括:
死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異:
活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜,對細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的通過;而細(xì)胞死亡之后,細(xì)胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。
臺盼藍(lán),又稱錐藍(lán),是一種陰離子型染料,不能透過完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色,而活細(xì)胞不被著色
所有和動物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物領(lǐng)域都需要進(jìn)行細(xì)胞濃度和活率的分析,不管是大學(xué)科研院所,還是各種大小規(guī)模的生物醫(yī)藥公司,細(xì)胞計數(shù)及活率分析儀無疑已經(jīng)成為了細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)領(lǐng)域的一個基本配套的分析儀器。
對于這樣一個基礎(chǔ)的分析儀器,如果我們使用關(guān)鍵詞“細(xì)胞計數(shù)及活率分析儀”,在百度上搜索可以得到巨量的結(jié)果,可以達(dá)到3450萬條相關(guān)結(jié)果。
那么在這茫茫的信息中,我們?nèi)绾蝸磉x擇一款適合自己的細(xì)胞計數(shù)及活率分析儀呢?
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傳統(tǒng)手動計數(shù)法
回答這個問題前,我們拿一個可以比較的對象,即原始的細(xì)胞計數(shù)及活率分析方法——1臺光學(xué)顯微鏡+血球計數(shù)板,待測的細(xì)胞懸液樣品被滴加在血球計數(shù)板上,通過肉眼人工計數(shù)統(tǒng)計細(xì)胞數(shù)量和計算細(xì)胞活率。
顯微鏡下我們可以看到血球計數(shù)板上4個區(qū)域,其中的活細(xì)胞和死細(xì)胞數(shù)目被分別統(tǒng)計。這個方法比較大的優(yōu)勢是整套設(shè)備很便宜,配套一塊血球計數(shù)板,以及自配的臺盼藍(lán)溶液即可開始整個實(shí)驗(yàn),所以使用成本會很低,比較適合高校研究所中用于學(xué)生的教學(xué)實(shí)驗(yàn)。 根據(jù)臺盼藍(lán)原理開發(fā)的全自動細(xì)胞計數(shù)儀。河北現(xiàn)代細(xì)胞計數(shù)儀銷售
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實(shí)驗(yàn)中測試速度和操作便捷性
在生物制藥公司工作的研發(fā)人員,每天都有忙不完的工作,如何提高她們的工作效率?特別是像細(xì)胞計數(shù)及活率分析這種比較消耗時間的工作,如何讓我們寶貴的實(shí)驗(yàn)人員從這個工作中解脫出來?而基本的要求所用的細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀,不僅測試速度要快,而且簡單易操作。對于測試速度快直接反映為檢測時間要短,另一個則是測試的時間不影響我其他的工作,可以實(shí)現(xiàn)不間斷連續(xù)測樣,無需實(shí)驗(yàn)人員在旁操作等待。 廣東什么是細(xì)胞計數(shù)儀定制價格
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