細(xì)胞接種密度多少合適?
依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤(pán)的比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)的一個(gè)重要原因。按照我們的經(jīng)驗(yàn):一般倍增時(shí)間24 h內(nèi)的細(xì)胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時(shí)間24-48 h的細(xì)胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時(shí)間超過(guò)48h的細(xì)胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。
如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中黑點(diǎn)的產(chǎn)生?
掌握細(xì)胞傳代的比較好時(shí)機(jī),不要細(xì)胞長(zhǎng)老了再傳代;掌握好消化時(shí)間,防止消化過(guò)度產(chǎn)生細(xì)胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數(shù);將培養(yǎng)液的PH調(diào)到比較好;嚴(yán)格控制水質(zhì)和器皿的清潔。 根據(jù)臺(tái)盼藍(lán)原理開(kāi)發(fā)的全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。廣東發(fā)展細(xì)胞計(jì)數(shù)儀價(jià)目表
實(shí)驗(yàn)中儀器之間數(shù)據(jù)的一致性
對(duì)于生物制藥公司的工藝開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)控部門,一般會(huì)選擇使用相同的分析儀器,這樣采用相同的分析方法,可以保持上下游測(cè)試條件的一致性。另外,不同地區(qū)的生產(chǎn)車間要保持生產(chǎn)質(zhì)量的一致性,很多時(shí)候也會(huì)使用同型號(hào)的分析儀器,但所使用儀器之間檢測(cè)結(jié)果的可比性就成了一個(gè)考察因素,并且檢測(cè)過(guò)程中人工操作的影響越小越好,以減少人為操作帶來(lái)的誤差。
這樣得到的生物藥質(zhì)量才可以有保證,這也是為何GMP和FDA等法規(guī)會(huì)有這方面的要求。所以,對(duì)于生產(chǎn)質(zhì)控部門采購(gòu)細(xì)胞活率分析儀,這點(diǎn)就特別需要考慮。 河南細(xì)胞計(jì)數(shù)儀廠家現(xiàn)貨細(xì)胞計(jì)數(shù)儀應(yīng)該怎么選擇?
培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點(diǎn),是污染嗎?
首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒(méi)有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點(diǎn)大小和形狀是否規(guī)則,是否運(yùn)動(dòng),是做布朗運(yùn)動(dòng)還是呈直線型快速移動(dòng)。如果黑點(diǎn)大小不規(guī)則,做布朗運(yùn)動(dòng),黑點(diǎn)可能是細(xì)胞碎片(可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過(guò)度引起的),也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點(diǎn)大小一致,快速移動(dòng),很可能是細(xì)菌污染。
在各種細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析方法中,臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)疑是細(xì)胞活率分析的金標(biāo)準(zhǔn)。目前,通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)染色分析細(xì)胞活率的方法包括:傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板法,也有市場(chǎng)上很普遍的插片式半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,以及無(wú)需手動(dòng)混勻和染色的全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀。
其中,后兩個(gè)分析儀器的出現(xiàn),不僅很大程度地解放了人力,同時(shí)相比于顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板法會(huì)更省時(shí),更合規(guī),所以被各大制藥企業(yè)所使用。而全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀更是在工藝開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)控方面表現(xiàn)出特有的優(yōu)勢(shì),即減少了人為的操作誤差和提高了儀器間數(shù)據(jù)的一致性而廣受歡迎。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么檢測(cè)?
如何控制胰酶消化時(shí)間?
胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個(gè)關(guān)鍵步驟:消化過(guò)度細(xì)胞碎片增多,黑渣子增多,細(xì)胞會(huì)成片脫落,嚴(yán)重影響細(xì)胞活性,并有部分細(xì)胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下,反復(fù)吹打同樣也會(huì)損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對(duì)消化液的敏感性不同,胰酶消化的時(shí)間也會(huì)有差異。胰酶消化時(shí)間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲(chǔ)存時(shí)間,胰酶的儲(chǔ)存溫度,是否反復(fù)凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。消化對(duì)于新購(gòu)買的細(xì)胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時(shí)間,可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓,記錄比較好消化時(shí)間,下一次操作參考之前的記錄來(lái)控制時(shí)間即可。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對(duì)比血球計(jì)數(shù)板的缺點(diǎn)。推廣細(xì)胞計(jì)數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是實(shí)驗(yàn)室必備。廣東發(fā)展細(xì)胞計(jì)數(shù)儀價(jià)目表
生物科技界細(xì)胞計(jì)數(shù)三大派系
血球計(jì)數(shù)板派(你數(shù)派)
血球計(jì)數(shù)板派(你數(shù)派)一直秉承著“只要眼睛好,世界很美好”的宗旨,通常“你數(shù)派”師兄妹都是火眼金睛視力好,心無(wú)旁騖定力強(qiáng),心算筆算能力強(qiáng),實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞計(jì)數(shù)活少,人力成本低,時(shí)間不值錢。血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)很容易受主觀影響,結(jié)果不準(zhǔn)確,重復(fù)性也不好,每次計(jì)數(shù)結(jié)果都不一樣,不同師兄妹計(jì)數(shù)結(jié)果也不一樣!若是哪天有幾十個(gè)細(xì)胞樣本要計(jì)數(shù),那真是要讓人發(fā)瘋了!相信很多伙伴都是親身經(jīng)歷過(guò)的
廣東發(fā)展細(xì)胞計(jì)數(shù)儀價(jià)目表
上海拓開(kāi)生物科技有限公司一直專注于從事生物科技領(lǐng)域、化工科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,辦公用品、儀器儀表、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、易制毒化學(xué)品)批發(fā)零售。 【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】,是一家電子元器件的企業(yè),擁有自己**的技術(shù)體系。公司目前擁有專業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺(tái)與成長(zhǎng)空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),深受員工與客戶好評(píng)。公司以誠(chéng)信為本,業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,我們本著對(duì)客戶負(fù)責(zé),對(duì)員工負(fù)責(zé),更是對(duì)公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度,爭(zhēng)取做到讓每位客戶滿意。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹(shù)立了良好的葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀形象,贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。