經(jīng)典的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：臺(tái)盼藍(lán)

臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，細(xì)胞不被染色；而死細(xì)胞的胞膜不完整，通透性增加，可使臺(tái)盼藍(lán)滲入將細(xì)胞染成藍(lán)色。因此，借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以簡(jiǎn)單、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

細(xì)胞損傷或死亡時(shí)，臺(tái)盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜使其變色，活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以9:1混合混勻（終濃度0.04%） 根據(jù)臺(tái)盼藍(lán)原理開(kāi)發(fā)的全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。西藏細(xì)胞計(jì)數(shù)儀要多少錢

全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析

我們國(guó)家近十幾年在生物制藥行業(yè)的蓬勃發(fā)展，對(duì)于以上這種計(jì)數(shù)和活率分析方法，已無(wú)法滿足生物制藥研發(fā)和生產(chǎn)發(fā)展的需要，因此正在逐漸被自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀所替代。

自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀首先解決的是對(duì)細(xì)胞做死活標(biāo)記，并且自動(dòng)統(tǒng)計(jì)具體的死活細(xì)胞數(shù)量和計(jì)算細(xì)胞活率和濃度。

相比傳統(tǒng)手動(dòng)計(jì)數(shù)法，避免了操作人員用眼疲勞和計(jì)數(shù)人為誤差的問(wèn)題

自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀還會(huì)保存拍攝的照片，軟件分析使用的細(xì)胞參數(shù)和分析結(jié)果，以便符合法規(guī)要求的數(shù)據(jù)真實(shí)性和可追溯性 四川新型細(xì)胞計(jì)數(shù)儀細(xì)胞計(jì)數(shù)儀適用于什么領(lǐng)域？

眾所周知，活細(xì)胞密度(VCD)和活率(viability)是評(píng)估哺乳動(dòng)物細(xì)胞系生長(zhǎng)狀態(tài)的重要指標(biāo)。生物制藥研發(fā)人員進(jìn)行懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，每天所不能避免的工作，就是取樣計(jì)數(shù)。使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行人工計(jì)數(shù)無(wú)疑是金標(biāo)準(zhǔn)方法。

但這個(gè)傳統(tǒng)方法其勞動(dòng)強(qiáng)度十分驚人，樣品量少的時(shí)候還能吃得消，樣品量大一些，甚至于要做大規(guī)模的DOE實(shí)驗(yàn)時(shí)，估計(jì)很多實(shí)驗(yàn)人員想死的心都會(huì)有。而且人工計(jì)數(shù)有較強(qiáng)的主觀性，對(duì)操作人員的經(jīng)驗(yàn)及操作熟練度有一定要求，導(dǎo)致有時(shí)候數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可比性會(huì)受到質(zhì)疑。

拓開(kāi)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，擁有自動(dòng)化，合規(guī)化，高通量等優(yōu)勢(shì)，能夠幫助您在實(shí)驗(yàn)室里高效率，高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞檢測(cè)等工作，是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題匯總

貼壁細(xì)胞如何進(jìn)行傳代?

去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁，加4ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min;棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8)，每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的原理。

細(xì)胞離心下來(lái)的離心速率應(yīng)為多少?

細(xì)胞傳代或凍存時(shí)欲回收細(xì)胞，其離心速度一般為800-1000 rpm/min，室溫離心5-8分鐘，轉(zhuǎn)速過(guò)高，將造成細(xì)胞破裂死亡。

如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?

用無(wú)血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200～2000 個(gè)/毫升，在0.1 毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?；罴?xì)胞排斥臺(tái)盼蘭，因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞，注意計(jì)數(shù)需在加入臺(tái)盼藍(lán)10min內(nèi)完成。有細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的，可直接用計(jì)數(shù)儀進(jìn)行。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的對(duì)比數(shù)據(jù)。浙江現(xiàn)代細(xì)胞計(jì)數(shù)儀價(jià)目表

TANK全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀價(jià)格。西藏細(xì)胞計(jì)數(shù)儀要多少錢

一般拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？

收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,用酒精將整個(gè)細(xì)胞瓶外壁進(jìn)行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各兩張），排除細(xì)胞本身污染的情況。

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