染色法鑒定機理
染色法分化學染色法和熒光染色法,根據染色機理的不同,染料或使死細胞著色,或使活細胞著色。死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括:
死活細胞細胞膜通透性的差異:
活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。
臺盼藍,又稱錐藍,是一種陰離子型染料,不能透過完整的細胞膜。所以經臺盼藍染色后只能使死細胞著色,而活細胞不被著色 細胞計數儀應該怎么選擇?四川特殊細胞計數儀
細胞離心下來的離心速率應為多少?
細胞傳代或凍存時欲回收細胞,其離心速度一般為800-1000 rpm/min,室溫離心5-8分鐘,轉速過高,將造成細胞破裂死亡。
如何用臺盼蘭計數活細胞?
用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000 個/毫升,在0.1 毫升的細胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,用血球計數板計數細胞?;罴毎懦馀_盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞,注意計數需在加入臺盼藍10min內完成。有細胞計數儀的,可直接用計數儀進行。 安徽通用細胞計數儀要多少錢細胞計數儀起到什么作用?
二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎?
二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。
使用胰蛋白酶加入EDTA是為什么?
EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細胞前,用EDTA清洗細胞,以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。
可否使用與原先不同的培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,易造成細胞狀態(tài)不好,**終造成細胞無法存活。
細胞培養(yǎng)實驗室之凈化工作臺
凈化工作臺:操作簡單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺主要有兩種:a)側流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。
凈化工作臺工作原理(大致相同)——通常是將室內空氣經粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱,再經高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。
側流式工作臺—空氣凈化后的氣流由左或右側通過工作臺面流向對側,也有從上向下或從下向上流向對側,形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌。工作臺結構為封閉式。
外流式(水平式)工作臺—凈化后的空氣面向操作者流動,因而外方氣流不致混入操作,但進行有害物質實驗操作則對操作者不利。工作臺結構為開放式(已少用)。 TANK細胞計數儀價格。
細胞抱團怎么處理?
一些懸浮細胞抱團生長是正?,F象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現部分細胞抱團生長的現象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15 ml離心管中,靜置20 min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團,需要大家酌情而定)。 細胞計數儀的原理是什么?江蘇應用細胞計數儀咨詢報價
全自動細胞計數儀的優(yōu)點。四川特殊細胞計數儀
全自動細胞計數和活率分析
我們國家近十幾年在生物制藥行業(yè)的蓬勃發(fā)展,對于以上這種計數和活率分析方法,已無法滿足生物制藥研發(fā)和生產發(fā)展的需要,因此正在逐漸被自動化細胞計數和活率分析儀所替代。
自動化細胞計數和活率分析儀首先解決的是對細胞做死活標記,并且自動統(tǒng)計具體的死活細胞數量和計算細胞活率和濃度。
相比傳統(tǒng)手動計數法,避免了操作人員用眼疲勞和計數人為誤差的問題
自動化細胞計數和活率分析儀還會保存拍攝的照片,軟件分析使用的細胞參數和分析結果,以便符合法規(guī)要求的數據真實性和可追溯性 四川特殊細胞計數儀
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