細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總

一般拿到細胞后，應(yīng)該注意什么?

收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張)，排除細胞本身污染的情況。

何時須更換培養(yǎng)基?

視細胞生長密度而定，常規(guī)細胞2-3天更換培養(yǎng)基。

細胞何時進行傳代較好?

一般情況下細胞生長至完全匯合后就應(yīng)該傳代，所有細胞生長都有一個要求不宜生長過密(也就是常說的長老了)，但有接觸抑制的細胞，在匯合前就必須進行傳代，這類細胞一般在密度70-80%就進行傳代，否則會引起細胞分化。 全自動細胞計數(shù)儀的款式。重慶高科技細胞計數(shù)儀價目表

如何獲取高質(zhì)量的細胞懸液，下面就帶您一步步***從組織到細胞懸液的旅程，讓細胞懸液制備不再成為困擾您的難題。

樣本準備

新鮮組織樣本是制備細胞懸液的首要條件，新鮮組織從***取下后，去除周圍的脂肪、結(jié)締組織或者壞死組織，用預冷的PBS或者生理鹽水沖洗干凈，快速轉(zhuǎn)移到解離實驗室進行細胞懸液制備，一般1個黃豆大小的組織量（200 mg）即可滿足一次組織解離。如果收集到新鮮樣本后無法立即進行懸液制備，可暫時用組織保存液4℃保存，盡快完成細胞懸液制備。 天津通用細胞計數(shù)儀咨詢問價全自動細胞計數(shù)儀的缺點。

購買的細胞死亡或細胞存活率不佳

研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久。

細胞生長逐漸變慢是什么原因?

細胞增殖變慢有以下原因：1. 消化過度 2. 傳代過密 3.細胞營養(yǎng)不良 4.細胞頻繁傳代 5.細胞狀態(tài)不佳或老化 6.細胞存在污染。

如何讓細胞計數(shù)更加準確

減少細胞結(jié)團率

細胞計數(shù)需要對整個細胞懸液中的少量樣本進行分析，因此必須注意確保樣品能夠原始整個單細胞懸液。TANK-CA0008以及及原始的血球計數(shù)板法等多種方法來對細胞活性進行監(jiān)控和計算。包括TANK-CA0008有采用臺盼藍，所以像是TANK-CA0008這樣的細胞計數(shù)器應(yīng)用算法來識別活細胞或死細胞，但它們不能對不具代表性的樣本進行校正。當手動計數(shù)時，與單個細胞相比，細胞成團率/結(jié)團率的評分更具主觀性，從而增加了可變性。細胞裂解后的細胞向外釋放的DNA（會造成粘稠結(jié)團））和細胞碎片是結(jié)團的常見原因。細胞裂解可能是由于過度生長、過度移液的機械剪切或冷凍/解凍循環(huán)等因素造成的，而胰蛋白酶消化不足或過度也可能導致樣品的異質(zhì)性。目前為了降低細胞結(jié)團率，我們可以通過溫和細胞裂解的方式來進行嘗試，以防止過為劇烈的酶解方式會導致細胞凋亡過快從而釋放更多的DNA。如胰酶等需要謹慎使用。另外對細胞碎片的樣本進行過濾，甚至是過濾膜等方式，均可以減少細結(jié)團率。 全自動細胞計數(shù)儀的成本。

實驗中測試速度和操作便捷性

在生物制藥公司工作的研發(fā)人員，每天都有忙不完的工作，如何提高她們的工作效率？特別是像細胞計數(shù)及活率分析這種比較消耗時間的工作，如何讓我們寶貴的實驗人員從這個工作中解脫出來？而基本的要求所用的細胞計數(shù)和活率分析儀，不僅測試速度要快，而且簡單易操作。對于測試速度快直接反映為檢測時間要短，另一個則是測試的時間不影響我其他的工作，可以實現(xiàn)不間斷連續(xù)測樣，無需實驗人員在旁操作等待。 細胞計數(shù)儀是什么原理？湖南細胞計數(shù)儀價格走勢

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TANK CA008自動細胞計數(shù)儀是臺式的自動化實驗室設(shè)備，軟件采用直觀，友好的界面設(shè)計，無需復雜的操作培訓，實驗室人員就能很輕松的享受便捷的細胞計數(shù)分析試驗.

自動化

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更合規(guī)

TANKCA008自動細胞計數(shù)儀，符合GMP的相關(guān)要求，提供IQ/OQ/PQ認證服務(wù)，并且軟件設(shè)計完全符合CFR21Part11關(guān)于審計追蹤法規(guī)要求.

更高通量

8孔設(shè)計可以加大樣品處理能力，節(jié)約時間的同時降低單個樣本的成本.

自動多視野成像

可以通過軟件自動設(shè)定讀取多個視野成像，自動計算平均結(jié)果，使結(jié)果更穩(wěn)定、更準確.數(shù)據(jù)準確性及重復性梯度稀釋滿足線性要求，不同儀器，不同孔之間數(shù)據(jù)比對CV<5%.使用更為先進的鏡頭，提升圖像品質(zhì)的同時增加了采樣面積，確保數(shù)據(jù)的準確性.利用TankBioscience軟件可以更為便捷的使用TANKCA008. 重慶高科技細胞計數(shù)儀價目表

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