活死細胞的鑒別方法

活細胞的鑒定在生物學和醫(yī)學上具有很重要的意義。細胞培養(yǎng)過程中要隨時記錄細胞的生長情況，需要經(jīng)常測定細胞的存活率；在zhong瘤細胞的研究中，為了檢驗各種藥物對zhong瘤細胞的殺傷力，也需要測定zhong瘤細胞的存活率。在臨床醫(yī)學中死活細胞的鑒定也有很大的應用，例如為了檢測某一男子的生育能力，測定精子細胞的存活力是比較常用的辦法。死活細胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法簡便，易于操作，但是通過直接的形態(tài)觀察來鑒別細胞死活，實驗結(jié)果很容易受操作者的主觀因素的影響，存在一定的誤差，所以，在實際操作中也常采用一些儀器來進行精確的批量檢測。 細胞計數(shù)儀有那些廠商？鎮(zhèn)江定制細胞計數(shù)儀

臺盼藍染液是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性。細胞損傷或死亡時，臺盼藍可穿透變性的細胞膜，與解體的DNA結(jié)合，使其著色。而活細胞能阻止染料進入細胞內(nèi)。故可以檢測細胞是否存活。

臺盼藍染色法的原理正常的活細胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內(nèi)；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養(yǎng)中常用的死細胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù)，就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。 安徽現(xiàn)代細胞計數(shù)儀生產(chǎn)廠家細胞計數(shù)儀的使用難度。

培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點，是污染嗎?

首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則，是否運動，是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則，做布朗運動，黑點可能是細胞碎片(可能是細胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的)，也可能是血清反復凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的，也可能是細胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致，快速移動，很可能是細菌污染。

細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總

貼壁細胞如何進行傳代?

去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min;棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8)，每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。 全自動細胞計數(shù)儀的耗材貴嗎？

培養(yǎng)細胞時應使用5%或10%CO2?

一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3 - / CO32- / H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時，細胞培養(yǎng)時應使用10%CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時，則應使用5%CO2培養(yǎng)細胞。

CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?

定期(每周一次)更換水盤里面的水，水盤的水必須使用無菌蒸餾水或無菌去離子，水盤中可添加1%硫酸銅以預防霉菌污染。

希望能幫到大家。

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細胞培養(yǎng)過程中的細胞計數(shù)

細胞培養(yǎng)是指從動物或植物中取出細胞，然后使其在合適的人工環(huán)境中生長。這些細胞可于培養(yǎng)前直接從組織中取出并采用酶或機械方法進行解離，或者也可來自已經(jīng)建立的細胞系或細胞株。細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術(shù)，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程，細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)?？寺?。  

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