單細胞測序?qū)嶒灥牡谝徊绞菃渭毎麘乙旱闹苽?,而懸液制備中細胞計?shù)的準確性直接影響單細胞測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,但是關(guān)于細胞計數(shù)您真的了解嗎?
目前細胞計數(shù)主要使用臺盼藍染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1)臺盼藍染色原理:臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色。而死細胞的細胞膜透性增高,可使染料進入細胞內(nèi)而使細胞著色(藍色)。
2)雙熒光AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)可以通過完整的細胞膜,嵌入所有細胞(活細胞和死細胞)的細胞核,呈現(xiàn)綠色熒光;碘化丙啶(PI)只能通過不完整的細胞膜,即死細胞的細胞膜,嵌入所有死細胞的細胞核,呈現(xiàn)紅色熒光。
拓開細胞計數(shù)儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實驗室里高效率,高標準的完成細胞計數(shù)和細胞檢測等工作,是您細胞科研領(lǐng)域的強力伙伴。 全自動細胞計數(shù)儀對比血球計數(shù)板的缺點。重慶細胞計數(shù)儀銷售廠
細胞培養(yǎng)實驗室之無菌操作區(qū)
無菌操作室:無菌操作區(qū)只限于細胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域,比較好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。理想的無菌操作室應劃為三部分:
a)更衣室—供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b)緩沖間—位于更衣間與操作間之間,目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境,同時可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
c)無菌操作間—直用于無菌操作、細胞培養(yǎng)。其大小要適當,且其頂部不宜過高(不超過2.5m)以保證紫外線的有效滅菌效果;墻壁光滑無死角以便清潔和消毒。工作臺安置不應靠墻壁,臺面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。
無菌操作間的空氣消毒:
紫外線燈—產(chǎn)生臭氧,并且室內(nèi)溫度及濕度均較高,不利于工作人員健康??諝膺^濾的恒溫恒濕裝置—比較好。
無臭氧紫外線消毒器電子消毒滅菌器-在高壓電場作用下,電子管的內(nèi)外電極發(fā)生強烈電子轟擊,使空氣電離而將空氣中的氧轉(zhuǎn)換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑,能同細菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進行氧化分解反應,從而靠臭氧氣體彌漫性擴散達到殺菌之目的,消毒時沒有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需30~40min即能自行還原成氧氣,空氣不留異味,消毒物體表面不留殘毒。 四川使用細胞計數(shù)儀定制價格TANK細胞計數(shù)儀官網(wǎng)。
細胞計數(shù)有多重要?這個答案想必不用回答,大家都心里有數(shù)。畢竟我們都曾經(jīng)歷過,花了一整天的時間制備細胞、染色、分選,進行一個精密計劃的實驗,結(jié)果卻因為發(fā)現(xiàn)細胞量卻不夠而被迫結(jié)束。如今圈子里常用的細胞計數(shù)方法是顯微鏡+血球計數(shù)板,然而隔壁實驗室的小明都在用自動的細胞計數(shù)儀了。但一些只相信所見即所得的小伙伴,對于自動細胞計數(shù)仍舊不太信任,因此體貼如我就為大家比對一下自動細胞計數(shù)儀和血球計數(shù)板。希望大家能有一個直觀的印象。
如何讓細胞計數(shù)更加的準確
優(yōu)化細胞計數(shù)的設備配置
無論是手動計數(shù)還是依靠TANK-CA0008全自動細胞計數(shù)儀自帶軟件算法計數(shù),調(diào)整焦距和曝光設置都很重要,以確保細胞盡可能有比較好的可見性/能見度,終獲得準確的細胞計數(shù)結(jié)果。比較好的聚焦和曝光將在細胞膜和背景之間,有非常非常非常鮮明的對比。
血球計數(shù)板的腔室需要調(diào)整到合適的高度
血球計數(shù)板有多種型號規(guī)格可供選擇。不同型號的腔室高度和深度在設計上都差異巨大。實驗人員在計算細胞數(shù)量時要注意一些細節(jié)以避免錯誤。 細胞計數(shù)儀的檢測結(jié)果可靠嗎?
細胞培養(yǎng)實驗室之孵育區(qū)以及制備,儲藏,清洗和消毒滅菌區(qū)
孵育區(qū)
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴格,但仍需清潔無塵,因此也應設置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行,后者費用高,一般實驗室多采用孵箱進行工作。
制備區(qū)
在該區(qū)主要進行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。
儲藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無塵。
清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應與其他區(qū)域分開,主要進行所有細胞培養(yǎng)器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。 細胞計數(shù)儀應該怎么選擇?杭州細胞計數(shù)儀銷售廠
全自動細胞計數(shù)儀的對比數(shù)據(jù)。重慶細胞計數(shù)儀銷售廠
全自動細胞計數(shù)和活率分析
我們國家近十幾年在生物制藥行業(yè)的蓬勃發(fā)展,對于以上這種計數(shù)和活率分析方法,已無法滿足生物制藥研發(fā)和生產(chǎn)發(fā)展的需要,因此正在逐漸被自動化細胞計數(shù)和活率分析儀所替代。
自動化細胞計數(shù)和活率分析儀首先解決的是對細胞做死活標記,并且自動統(tǒng)計具體的死活細胞數(shù)量和計算細胞活率和濃度。
相比傳統(tǒng)手動計數(shù)法,避免了操作人員用眼疲勞和計數(shù)人為誤差的問題
自動化細胞計數(shù)和活率分析儀還會保存拍攝的照片,軟件分析使用的細胞參數(shù)和分析結(jié)果,以便符合法規(guī)要求的數(shù)據(jù)真實性和可追溯性 重慶細胞計數(shù)儀銷售廠
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