細(xì)胞內(nèi)有空泡,是否是正?,F(xiàn)象?
部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
細(xì)胞傳兩代后開始逐漸死亡的原因
很可能是培養(yǎng)體系不適合細(xì)胞(未使用推薦的培養(yǎng)體系);或者消化過度,對細(xì)胞有嚴(yán)重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細(xì)胞,傳代太稀;或者生長較快的細(xì)胞,傳代較密,細(xì)胞嚴(yán)重堆疊生長)。 全自動細(xì)胞計數(shù)儀貴嗎?江蘇細(xì)胞計數(shù)儀價格多少
活死細(xì)胞的鑒別方法
活細(xì)胞的鑒定在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有很重要的意義。細(xì)胞培養(yǎng)過程中要隨時記錄細(xì)胞的生長情況,需要經(jīng)常測定細(xì)胞的存活率;在zhong瘤細(xì)胞的研究中,為了檢驗各種藥物對zhong瘤細(xì)胞的殺傷力,也需要測定zhong瘤細(xì)胞的存活率。在臨床醫(yī)學(xué)中死活細(xì)胞的鑒定也有很大的應(yīng)用,例如為了檢測某一男子的生育能力,測定精子細(xì)胞的存活力是比較常用的辦法。死活細(xì)胞的鑒定方法有很多種,常用的有染色法和儀器分析法。染色法簡便,易于操作,但是通過直接的形態(tài)觀察來鑒別細(xì)胞死活,實驗結(jié)果很容易受操作者的主觀因素的影響,存在一定的誤差,所以,在實際操作中也常采用一些儀器來進(jìn)行精確的批量檢測。 新能源細(xì)胞計數(shù)儀價目表細(xì)胞計數(shù)儀的使用壽命。
二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎?
二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。
使用胰蛋白酶加入EDTA是為什么?
EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細(xì)胞前,用EDTA清洗細(xì)胞,以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。
可否使用與原先不同的培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),易造成細(xì)胞狀態(tài)不好,**終造成細(xì)胞無法存活。
染色法鑒定機(jī)理
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法,根據(jù)染色機(jī)理的不同,染料或使死細(xì)胞著色,或使活細(xì)胞著色。死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括:
死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異:
活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜,對細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的通過;而細(xì)胞死亡之后,細(xì)胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。
臺盼藍(lán),又稱錐藍(lán),是一種陰離子型染料,不能透過完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色,而活細(xì)胞不被著色 全自動細(xì)胞計數(shù)儀對比血球計數(shù)板的缺點。
細(xì)胞培養(yǎng)實驗室之孵育區(qū)以及制備,儲藏,清洗和消毒滅菌區(qū)
孵育區(qū)
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴(yán)格,但仍需清潔無塵,因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行,后者費用高,一般實驗室多采用孵箱進(jìn)行工作。
制備區(qū)
在該區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。
儲藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無塵。
清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開,主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作。 細(xì)胞計數(shù)儀的型號對比。天津有什么細(xì)胞計數(shù)儀
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可否使用與原先不同的血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞為何生長不均勻?
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導(dǎo)致細(xì)胞生長不均勻。 江蘇細(xì)胞計數(shù)儀價格多少
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