染色法鑒定機(jī)理

染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法，根據(jù)染色機(jī)理的不同，染料或使死細(xì)胞著色，或使活細(xì)胞著色。死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括：

死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異：

活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜，對細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用，只允許物質(zhì)選擇性的通過；而細(xì)胞死亡之后，細(xì)胞膜受損，通透性增加。常用的以臺盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。

臺盼藍(lán)，又稱錐藍(lán)，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色，而活細(xì)胞不被著色 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的評價(jià)。河北細(xì)胞計(jì)數(shù)儀咨詢問價(jià)

生物科技界細(xì)胞計(jì)數(shù)三大派系

血球計(jì)數(shù)板派（你數(shù)派）

血球計(jì)數(shù)板派（你數(shù)派）一直秉承著“只要眼睛好，世界很美好”的宗旨，通?！澳銛?shù)派”師兄妹都是火眼金睛視力好，心無旁騖定力強(qiáng)，心算筆算能力強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞計(jì)數(shù)活少，人力成本低，時(shí)間不值錢。血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)很容易受主觀影響，結(jié)果不準(zhǔn)確，重復(fù)性也不好，每次計(jì)數(shù)結(jié)果都不一樣，不同師兄妹計(jì)數(shù)結(jié)果也不一樣！若是哪天有幾十個(gè)細(xì)胞樣本要計(jì)數(shù)，那真是要讓人發(fā)瘋了！相信很多伙伴都是親身經(jīng)歷過的

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實(shí)驗(yàn)中測試速度和操作便捷性

在生物制藥公司工作的研發(fā)人員，每天都有忙不完的工作，如何提高她們的工作效率？特別是像細(xì)胞計(jì)數(shù)及活率分析這種比較消耗時(shí)間的工作，如何讓我們寶貴的實(shí)驗(yàn)人員從這個(gè)工作中解脫出來？而基本的要求所用的細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀，不僅測試速度要快，而且簡單易操作。對于測試速度快直接反映為檢測時(shí)間要短，另一個(gè)則是測試的時(shí)間不影響我其他的工作，可以實(shí)現(xiàn)不間斷連續(xù)測樣，無需實(shí)驗(yàn)人員在旁操作等待。

懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何傳代處理?

一般*需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000 rpm/min 室溫離心5 min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8)，每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5 ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長，此時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。

如何區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞?

顯微鏡下觀察：活細(xì)胞中間透亮，飽滿，有光澤，死細(xì)胞較暗。也可以通過臺盼藍(lán)染色來計(jì)算細(xì)胞活力。 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀如何購買？

細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總

一般拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么?

收到細(xì)胞先不開蓋,用酒精將整個(gè)細(xì)胞瓶外壁進(jìn)行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各兩張)，排除細(xì)胞本身污染的情況。

何時(shí)須更換培養(yǎng)基?

視細(xì)胞生長密度而定，常規(guī)細(xì)胞2-3天更換培養(yǎng)基。

細(xì)胞何時(shí)進(jìn)行傳代較好?

一般情況下細(xì)胞生長至完全匯合后就應(yīng)該傳代，所有細(xì)胞生長都有一個(gè)要求不宜生長過密(也就是常說的長老了)，但有接觸抑制的細(xì)胞，在匯合前就必須進(jìn)行傳代，這類細(xì)胞一般在密度70-80%就進(jìn)行傳代，否則會引起細(xì)胞分化。 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對比血球計(jì)數(shù)板。河北特點(diǎn)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀銷售電話

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臺盼藍(lán)染液是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性。細(xì)胞損傷或死亡時(shí)，臺盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜，與解體的DNA結(jié)合，使其著色。而活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。故可以檢測細(xì)胞是否存活。

臺盼藍(lán)染色法的原理正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍(lán)，使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍(lán)染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺盼藍(lán)染色后，通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。 河北細(xì)胞計(jì)數(shù)儀咨詢問價(jià)

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