細(xì)胞內(nèi)有空泡，是否是正常現(xiàn)象?

部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等)，這個(gè)是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳，可以通過(guò)調(diào)整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時(shí)間等方法來(lái)調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡，且單個(gè)細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細(xì)胞代次較高，細(xì)胞老化所致，需更換代次較早的細(xì)胞。

細(xì)胞傳兩代后開(kāi)始逐漸死亡的原因

很可能是培養(yǎng)體系不適合細(xì)胞(未使用推薦的培養(yǎng)體系);或者消化過(guò)度，對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細(xì)胞，傳代太稀;或者生長(zhǎng)較快的細(xì)胞，傳代較密，細(xì)胞嚴(yán)重堆疊生長(zhǎng))。 TANK全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀價(jià)格。廣西多功能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室之凈化工作臺(tái)

凈化工作臺(tái)：操作簡(jiǎn)單，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種：a)側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。

凈化工作臺(tái)工作原理（大致相同）——通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾，由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱，再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū)，從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。

側(cè)流式工作臺(tái)—空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過(guò)工作臺(tái)面流向?qū)?cè)，也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè)，形成氣流屏障保持工作區(qū)無(wú)菌。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為封閉式。

外流式（水平式）工作臺(tái)—凈化后的空氣面向操作者流動(dòng)，因而外方氣流不致混入操作，但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作則對(duì)操作者不利。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為開(kāi)放式（已少用）。 安徽推廣細(xì)胞計(jì)數(shù)儀全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀使用范圍。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題匯總

貼壁細(xì)胞如何進(jìn)行傳代?

去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁，加4ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min;棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8)，每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。

細(xì)胞計(jì)數(shù)有多重要？這個(gè)答案想必不用回答，大家都心里有數(shù)。畢竟我們都曾經(jīng)歷過(guò)，花了一整天的時(shí)間制備細(xì)胞、染色、分選，進(jìn)行一個(gè)精密計(jì)劃的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果卻因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)細(xì)胞量卻不夠而被迫結(jié)束。如今圈子里常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法是顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板，然而隔壁實(shí)驗(yàn)室的小明都在用自動(dòng)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀了。但一些只相信所見(jiàn)即所得的小伙伴，對(duì)于自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)仍舊不太信任，因此體貼如我就為大家比對(duì)一下自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板。希望大家能有一個(gè)直觀的印象。全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀只能用來(lái)計(jì)數(shù)嗎？

貼壁細(xì)胞傳代如何使用胰酶?

一般使用trypsin-EDTA濃度為0.25% trypsin-0.53 mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02 mM EDTA.2Na。消化液濃度過(guò)高時(shí)，易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細(xì)胞傳代時(shí)建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化，對(duì)于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化，細(xì)胞密度過(guò)高超過(guò)80%時(shí)，采用分步消化法。胰酶儲(chǔ)存在–20°C，解凍在4°C進(jìn)行，開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中，保存于–20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機(jī)會(huì)。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的壽命。浙江特點(diǎn)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

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細(xì)胞活力鑒定——臺(tái)盼藍(lán)染色法

臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue），也稱二胺藍(lán)（Diamine Blue）和加拉藍(lán)（Niagra Blue）,是一種用于選擇性著色死細(xì)胞和即將死亡的細(xì)胞的重要染料。這種染料不能進(jìn)入細(xì)胞膜完整的細(xì)胞，而能在細(xì)胞膜受損的死細(xì)胞或即將死亡的細(xì)胞內(nèi)迅速積累，從而在顯微鏡下顯出藍(lán)色。若染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，臺(tái)盼藍(lán)可能通過(guò)胞吞或胞飲作用進(jìn)入細(xì)胞。

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