如何獲取高質(zhì)量的細胞懸液,下面就帶您一步步***從組織到細胞懸液的旅程,讓細胞懸液制備不再成為困擾您的難題。
樣本準備
新鮮組織樣本是制備細胞懸液的首要條件,新鮮組織從***取下后,去除周圍的脂肪、結(jié)締組織或者壞死組織,用預(yù)冷的PBS或者生理鹽水沖洗干凈,快速轉(zhuǎn)移到解離實驗室進行細胞懸液制備,一般1個黃豆大小的組織量(200 mg)即可滿足一次組織解離。如果收集到新鮮樣本后無法立即進行懸液制備,可暫時用組織保存液4℃保存,盡快完成細胞懸液制備。 細胞計數(shù)儀的耗材貴嗎?衢州什么是細胞計數(shù)儀
生物科技界細胞計數(shù)三大派系
血球計數(shù)板派(你數(shù)派)
血球計數(shù)板派(你數(shù)派)一直秉承著“只要眼睛好,世界很美好”的宗旨,通?!澳銛?shù)派”師兄妹都是火眼金睛視力好,心無旁騖定力強,心算筆算能力強,實驗室的細胞計數(shù)活少,人力成本低,時間不值錢。血球計數(shù)板計數(shù)很容易受主觀影響,結(jié)果不準確,重復(fù)性也不好,每次計數(shù)結(jié)果都不一樣,不同師兄妹計數(shù)結(jié)果也不一樣!若是哪天有幾十個細胞樣本要計數(shù),那真是要讓人發(fā)瘋了!相信很多伙伴都是親身經(jīng)歷過的
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培養(yǎng)的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要精細細胞計數(shù),在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力,用臺盼蘭染細胞,死細胞著色,活細胞不著色,從而可以區(qū)分死細胞與活細胞。所以在細胞生物學(xué)研究過程中,細胞計數(shù)和細胞活率測定是非常重要的工作,血球計數(shù)板消耗了研究者大量時間與體力,且結(jié)果也不能得到保證,重復(fù)性差。
而全自動細胞計數(shù)儀擺脫了手工計數(shù)細胞的苦差和煩惱,同時結(jié)果更加準確客觀,操作快速簡便,重復(fù)性好,尤其為我們科研工作者節(jié)省了寶貴的時間,使研究者把更多的精力放在更重要的工作上。
培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點,是污染嗎?
首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則,是否運動,是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則,做布朗運動,黑點可能是細胞碎片(可能是細胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致,快速移動,很可能是細菌污染。 全自動細胞計數(shù)儀對比血球計數(shù)板的缺點。
原代培養(yǎng)及其操作步驟
從供體內(nèi)取出組織后,經(jīng)機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環(huán)境,在無菌、適當(dāng)溫度和一定的營養(yǎng)條件下,生存、生長和繁殖。原代培養(yǎng)細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能說明所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞培養(yǎng)做各種實驗,如藥物測試、細胞分化及病毒學(xué)方面的試驗效果很好。
拓開細胞計數(shù)儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實驗室里高效率,高標準的完成細胞計數(shù)和細胞檢測等工作,是您細胞科研領(lǐng)域的強力伙伴。 全自動細胞計數(shù)儀的評價。湖北現(xiàn)代細胞計數(shù)儀生產(chǎn)廠家
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黑點已經(jīng)產(chǎn)生了,如何進行處理?
如果判定黑點是污染,請及時將細胞處理后丟棄。其他情況,可參照以下進行:如果是懸浮細胞:收集細胞上清慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細胞:將細胞用PBS洗2-3遍,洗的時候,輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,再棄去PBS,消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,讓細胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來,去掉低濃度胰酶,然后正常消化細胞,將收集的細胞懸液慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶,并可以嘗試適當(dāng)增加血清濃度進行培養(yǎng)。 衢州什么是細胞計數(shù)儀
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