細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題匯總
一般拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么?
收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,用酒精將整個(gè)細(xì)胞瓶外壁進(jìn)行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各兩張)，排除細(xì)胞本身污染的情況。
何時(shí)須更換培養(yǎng)基?
視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，常規(guī)細(xì)胞2-3天更換培養(yǎng)基。
細(xì)胞何時(shí)進(jìn)行傳代較好?
一般情況下細(xì)胞生長(zhǎng)至完全匯合后就應(yīng)該傳代，所有細(xì)胞生長(zhǎng)都有一個(gè)要求不宜生長(zhǎng)過(guò)密(也就是常說(shuō)的長(zhǎng)老了)，但有接觸抑制的細(xì)胞，在匯合前就必須進(jìn)行傳代，這類(lèi)細(xì)胞一般在密度70-80%就進(jìn)行傳代，否則會(huì)引起細(xì)胞分化。 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀起到什么作用？廣東自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
經(jīng)典的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：臺(tái)盼藍(lán)
臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，細(xì)胞不被染色；而死細(xì)胞的胞膜不完整，通透性增加，可使臺(tái)盼藍(lán)滲入將細(xì)胞染成藍(lán)色。因此，借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以簡(jiǎn)單、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。
細(xì)胞損傷或死亡時(shí)，臺(tái)盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜使其變色，活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以9:1混合混勻（終濃度0.04%） 金華細(xì)胞計(jì)數(shù)儀供應(yīng)商全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的識(shí)別原理。
購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過(guò)程對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久。
細(xì)胞生長(zhǎng)逐漸變慢是什么原因?
細(xì)胞增殖變慢有以下原因：1. 消化過(guò)度 2. 傳代過(guò)密 3.細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良 4.細(xì)胞頻繁傳代 5.細(xì)胞狀態(tài)不佳或老化 6.細(xì)胞存在污染。
給大家分享一下細(xì)胞手工計(jì)數(shù)的基本原理和需要注意的幾點(diǎn)操作細(xì)節(jié)。
血球計(jì)數(shù)板結(jié)構(gòu)細(xì)胞手工計(jì)數(shù)板主要是血球計(jì)數(shù)板，市面上賣(mài)的一般都是有醫(yī)療器械號(hào)（國(guó)產(chǎn)進(jìn)口均可用，不用挑哈）。血球計(jì)數(shù)板是一塊比普通載玻片厚的長(zhǎng)方形玻片，在中部1/3面積區(qū)域有4條凹槽，將中部區(qū)域分為3個(gè)長(zhǎng)方形平臺(tái)；其中正中間的平臺(tái)又被一短橫凹槽分隔為兩半，作為兩個(gè)計(jì)數(shù)池，兩個(gè)計(jì)數(shù)池平臺(tái)高度比兩邊略低0.1mm。
在顯微鏡下，每一個(gè)計(jì)數(shù)池均可以看見(jiàn)以下網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，9個(gè)同面積的大方格組成方格網(wǎng)，大方格作為計(jì)數(shù)室（綠色和藍(lán)色方框區(qū)域）。計(jì)數(shù)室邊長(zhǎng)為1mm，蓋上蓋玻片后容積為：1mm(長(zhǎng))x1mm(寬)x0.1mm(高)=0.1mm3，即一個(gè)計(jì)數(shù)室的體積為0.1mm3,也就是1x10-4mL。我們只要把這個(gè)計(jì)數(shù)室里面的細(xì)胞數(shù)清楚，再乘以104，我們就可以得到每毫升樣本中的細(xì)胞個(gè)數(shù)。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的原理。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的細(xì)胞計(jì)數(shù)
細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物或植物中取出細(xì)胞，然后使其在合適的人工環(huán)境中生長(zhǎng)。這些細(xì)胞可于培養(yǎng)前直接從組織中取出并采用酶或機(jī)械方法進(jìn)行解離，或者也可來(lái)自已經(jīng)建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō)，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)必不可少的過(guò)程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。
拓開(kāi)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，擁有自動(dòng)化，合規(guī)化，高通量等優(yōu)勢(shì)，能夠幫助您在實(shí)驗(yàn)室里高效率，高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞檢測(cè)等工作，是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么使用？浙江高科技細(xì)胞計(jì)數(shù)儀咨詢問(wèn)價(jià)
全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀如何選擇？廣東自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室之孵育區(qū)以及制備，儲(chǔ)藏，清洗和消毒滅菌區(qū)
孵育區(qū)
本區(qū)對(duì)無(wú)菌的要求雖不比無(wú)菌區(qū)嚴(yán)格，但仍需清潔無(wú)塵，因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來(lái)往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行，后者費(fèi)用高，一般實(shí)驗(yàn)室多采用孵箱進(jìn)行工作。
制備區(qū)
在該區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。
儲(chǔ)藏區(qū)
主要存放各類(lèi)冰箱、干燥箱、液氮罐、無(wú)菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等，此環(huán)境也需要清潔無(wú)塵。
清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開(kāi)，主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作。 廣東自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
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