細(xì)胞培養(yǎng)實驗室之無菌操作區(qū)

無菌操作室：無菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域，比較好能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。理想的無菌操作室應(yīng)劃為三部分：

a)更衣室—供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

b)緩沖間—位于更衣間與操作間之間，目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境，同時可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。

c)無菌操作間—直用于無菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)。其大小要適當(dāng)，且其頂部不宜過高（不超過2.5m）以保證紫外線的有效滅菌效果；墻壁光滑無死角以便清潔和消毒。工作臺安置不應(yīng)靠墻壁，臺面要光滑壓塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。

無菌操作間的空氣消毒：

紫外線燈—產(chǎn)生臭氧，并且室內(nèi)溫度及濕度均較高，不利于工作人員健康。空氣過濾的恒溫恒濕裝置—比較好。

無臭氧紫外線消毒器電子消毒滅菌器-在高壓電場作用下，電子管的內(nèi)外電極發(fā)生強烈電子轟擊，使空氣電離而將空氣中的氧轉(zhuǎn)換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑，能同細(xì)菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進行氧化分解反應(yīng)，從而靠臭氧氣體彌漫性擴散達到殺菌之目的，消毒時沒有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需30～40min即能自行還原成氧氣，空氣不留異味，消毒物體表面不留殘毒。 細(xì)胞計數(shù)儀對比血球計數(shù)板。重慶自動化細(xì)胞計數(shù)儀代理商

黑點已經(jīng)產(chǎn)生了，如何進行處理?

如果判定黑點是污染，請及時將細(xì)胞處理后丟棄。其他情況，可參照以下進行：如果是懸浮細(xì)胞：收集細(xì)胞上清慢速離心(500-600 rpm/min，5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS洗2-3遍，洗的時候，輕輕拍打培養(yǎng)瓶，讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落，再棄去PBS，消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右，讓細(xì)胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來，去掉低濃度胰酶，然后正常消化細(xì)胞，將收集的細(xì)胞懸液慢速離心(500-600 rpm/min，5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶，并可以嘗試適當(dāng)增加血清濃度進行培養(yǎng)。 浙江常規(guī)細(xì)胞計數(shù)儀價格多少細(xì)胞計數(shù)儀適用于什么領(lǐng)域？

培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點，是污染嗎?

首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則，是否運動，是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則，做布朗運動，黑點可能是細(xì)胞碎片(可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的)，也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的，也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致，快速移動，很可能是細(xì)菌污染。

細(xì)胞培養(yǎng)過程中的細(xì)胞計數(shù)

細(xì)胞培養(yǎng)是指從動物或植物中取出細(xì)胞，然后使其在合適的人工環(huán)境中生長。這些細(xì)胞可于培養(yǎng)前直接從組織中取出并采用酶或機械方法進行解離，或者也可來自已經(jīng)建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。  

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臺盼藍染液是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性。細(xì)胞損傷或死亡時，臺盼藍可穿透變性的細(xì)胞膜，與解體的DNA結(jié)合，使其著色。而活細(xì)胞能阻止染料進入細(xì)胞內(nèi)。故可以檢測細(xì)胞是否存活。

臺盼藍染色法的原理正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內(nèi)；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺盼藍是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進行比較精確的定量。 全自動細(xì)胞計數(shù)儀只能用來計數(shù)嗎？北京自動化細(xì)胞計數(shù)儀哪家便宜

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8孔設(shè)計可以加大樣品處理能力，節(jié)約時間的同時降低單個樣本的成本.

自動多視野成像

可以通過軟件自動設(shè)定讀取多個視野成像，自動計算平均結(jié)果，使結(jié)果更穩(wěn)定、更準(zhǔn)確.數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性及重復(fù)性梯度稀釋滿足線性要求，不同儀器，不同孔之間數(shù)據(jù)比對CV<5%.使用更為先進的鏡頭，提升圖像品質(zhì)的同時增加了采樣面積，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性.利用TankBioscience軟件可以更為便捷的使用TANKCA008. 重慶自動化細(xì)胞計數(shù)儀代理商

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