經(jīng)典的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理:臺盼藍(lán)
臺盼藍(lán)(Trypan Blue)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞,胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺盼藍(lán),細(xì)胞不被染色;而死細(xì)胞的胞膜不完整,通透性增加,可使臺盼藍(lán)滲入將細(xì)胞染成藍(lán)色。因此,借助臺盼藍(lán)染色可以簡單、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。
細(xì)胞損傷或死亡時,臺盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜使其變色,活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞懸液與0.4%臺盼藍(lán)溶液以9:1混合混勻(終濃度0.04%) 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀擁有那些特點(diǎn)。溫州現(xiàn)代細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
如何控制胰酶消化時間?
胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟:消化過度細(xì)胞碎片增多,黑渣子增多,細(xì)胞會成片脫落,嚴(yán)重影響細(xì)胞活性,并有部分細(xì)胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下,反復(fù)吹打同樣也會損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復(fù)凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。消化對于新購買的細(xì)胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓,記錄比較好消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。 安徽有什么細(xì)胞計(jì)數(shù)儀生產(chǎn)廠家全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀使用范圍。
黑點(diǎn)已經(jīng)產(chǎn)生了,如何進(jìn)行處理?
如果判定黑點(diǎn)是污染,請及時將細(xì)胞處理后丟棄。其他情況,可參照以下進(jìn)行:如果是懸浮細(xì)胞:收集細(xì)胞上清慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS洗2-3遍,洗的時候,輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,再棄去PBS,消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,讓細(xì)胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來,去掉低濃度胰酶,然后正常消化細(xì)胞,將收集的細(xì)胞懸液慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶,并可以嘗試適當(dāng)增加血清濃度進(jìn)行培養(yǎng)。
染色法鑒定機(jī)理
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法,根據(jù)染色機(jī)理的不同,染料或使死細(xì)胞著色,或使活細(xì)胞著色。死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括:
死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異:
活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜,對細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的通過;而細(xì)胞死亡之后,細(xì)胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。
臺盼藍(lán),又稱錐藍(lán),是一種陰離子型染料,不能透過完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色,而活細(xì)胞不被著色 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀只能用來計(jì)數(shù)嗎?
細(xì)胞計(jì)數(shù)有多重要?這個答案想必不用回答,大家都心里有數(shù)。畢竟我們都曾經(jīng)歷過,花了一整天的時間制備細(xì)胞、染色、分選,進(jìn)行一個精密計(jì)劃的實(shí)驗(yàn),結(jié)果卻因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)細(xì)胞量卻不夠而被迫結(jié)束。如今圈子里常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法是顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板,然而隔壁實(shí)驗(yàn)室的小明都在用自動的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀了。但一些只相信所見即所得的小伙伴,對于自動細(xì)胞計(jì)數(shù)仍舊不太信任,因此體貼如我就為大家比對一下自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板。希望大家能有一個直觀的印象。TANK細(xì)胞計(jì)數(shù)儀官網(wǎng)。新型細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀會用到那些耗材?溫州現(xiàn)代細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
所有和動物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物領(lǐng)域都需要進(jìn)行細(xì)胞濃度和活率的分析,不管是大學(xué)科研院所,還是各種大小規(guī)模的生物醫(yī)藥公司,細(xì)胞計(jì)數(shù)及活率分析儀無疑已經(jīng)成為了細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)領(lǐng)域的一個基本配套的分析儀器。
對于這樣一個基礎(chǔ)的分析儀器,如果我們使用關(guān)鍵詞“細(xì)胞計(jì)數(shù)及活率分析儀”,在百度上搜索可以得到巨量的結(jié)果,可以達(dá)到3450萬條相關(guān)結(jié)果。
那么在這茫茫的信息中,我們?nèi)绾蝸磉x擇一款適合自己的細(xì)胞計(jì)數(shù)及活率分析儀呢?
拓開細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實(shí)驗(yàn)室里高效率,高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞檢測等工作,是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。 溫州現(xiàn)代細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
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