熒光素雙醋酸酯(FDA)是一種常用的培養(yǎng)動(dòng)植物細(xì)胞以及植物細(xì)胞原生質(zhì)體的生活力鑒定染料,其染色機(jī)理也利用了死活細(xì)胞在代謝上的差異:FDA本身不產(chǎn)生熒光,也無(wú)極性,能自由滲透出入完整的細(xì)胞膜。
當(dāng)FDA進(jìn)入活細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)的脂酶分解,生成有極性的、能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)——熒光素,該物質(zhì)不能自由透過(guò)活的細(xì)胞膜,積累在細(xì)胞膜內(nèi),因而使有活力的細(xì)胞產(chǎn)生綠色熒光;而無(wú)活力的細(xì)胞因不能使FDA分解,而無(wú)法產(chǎn)生熒光。
除此之外,還有一些細(xì)胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料,可以使活細(xì)胞液泡著紅色,而細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被著色;死細(xì)胞的液泡不被著色或淺染,染料彌散于整個(gè)細(xì)胞中,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被染成紅色。有時(shí)侯為了增加染色效果可以將兩種染料結(jié)合使用,如甲基藍(lán)-中性紅混合染色法。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的缺點(diǎn)。河北高科技細(xì)胞計(jì)數(shù)儀咨詢報(bào)價(jià)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題匯總
一般拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,用酒精將整個(gè)細(xì)胞瓶外壁進(jìn)行消毒,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各兩張),排除細(xì)胞本身污染的情況。
何時(shí)須更換培養(yǎng)基?
視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,常規(guī)細(xì)胞2-3天更換培養(yǎng)基。
細(xì)胞何時(shí)進(jìn)行傳代較好?
一般情況下細(xì)胞生長(zhǎng)至完全匯合后就應(yīng)該傳代,所有細(xì)胞生長(zhǎng)都有一個(gè)要求不宜生長(zhǎng)過(guò)密(也就是常說(shuō)的長(zhǎng)老了),但有接觸抑制的細(xì)胞,在匯合前就必須進(jìn)行傳代,這類細(xì)胞一般在密度70-80%就進(jìn)行傳代,否則會(huì)引起細(xì)胞分化。 北京定制細(xì)胞計(jì)數(shù)儀比較價(jià)格細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的使用評(píng)價(jià)。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題匯總
貼壁細(xì)胞如何進(jìn)行傳代?
去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁,加4ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來(lái),1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。
細(xì)胞抱團(tuán)怎么處理?
一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過(guò)細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15 ml離心管中,靜置20 min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán),需要大家酌情而定)。 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀有那些廠商?
單細(xì)胞測(cè)序?qū)嶒?yàn)的第一步是單細(xì)胞懸液的制備,而懸液制備中細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細(xì)胞測(cè)序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,但是關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)您真的了解嗎?
目前細(xì)胞計(jì)數(shù)主要使用臺(tái)盼藍(lán)染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1)臺(tái)盼藍(lán)染色原理:臺(tái)盼藍(lán)不能透過(guò)活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色。而死細(xì)胞的細(xì)胞膜透性增高,可使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色(藍(lán)色)。
2)雙熒光AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)可以通過(guò)完整的細(xì)胞膜,嵌入所有細(xì)胞(活細(xì)胞和死細(xì)胞)的細(xì)胞核,呈現(xiàn)綠色熒光;碘化丙啶(PI)只能通過(guò)不完整的細(xì)胞膜,即死細(xì)胞的細(xì)胞膜,嵌入所有死細(xì)胞的細(xì)胞核,呈現(xiàn)紅色熒光。
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細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的費(fèi)用是多少?河北高科技細(xì)胞計(jì)數(shù)儀咨詢報(bào)價(jià)
電子元器件產(chǎn)業(yè)作為電子信息制造業(yè)的基礎(chǔ)產(chǎn)業(yè),其自身市場(chǎng)的開(kāi)放及格局形成與國(guó)內(nèi)電子信息產(chǎn)業(yè)的高速發(fā)展有著密切關(guān)聯(lián),目前在不斷增長(zhǎng)的新電子產(chǎn)品市場(chǎng)需求、全球電子產(chǎn)品制造業(yè)向中國(guó)轉(zhuǎn)移、中美貿(mào)易戰(zhàn)加速國(guó)產(chǎn)品牌替代等內(nèi)外多重作用下,國(guó)內(nèi)電子元器件分銷行業(yè)會(huì)長(zhǎng)期處在活躍期,與此同時(shí),在市場(chǎng)已出現(xiàn)的境內(nèi)外電子分銷商共存競(jìng)爭(zhēng)格局中,也誕生了一批具有新商業(yè)模式的電子元器件分銷企業(yè),并受到了資本市場(chǎng)青睞。為進(jìn)一步推動(dòng)我國(guó)葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的產(chǎn)業(yè)發(fā)展,促進(jìn)新型葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的技術(shù)進(jìn)步與應(yīng)用水平提高,在 5G 商用爆發(fā)前夕,2019 中國(guó) 5G 葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀重點(diǎn)展示關(guān)鍵元器件及設(shè)備,旨在助力葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀行業(yè)把握發(fā)展機(jī)遇,實(shí)現(xiàn)跨越發(fā)展。根據(jù)近幾年的數(shù)據(jù)顯示,中國(guó)已然成為世界極大的電子元器件市場(chǎng),每年的進(jìn)口額高達(dá)2300多億美元,超過(guò)石油進(jìn)口金額。但是**根本的痛點(diǎn)仍然沒(méi)有得到解決——眾多的有限責(zé)任公司企業(yè),資歷不深缺少金錢,缺乏人才,渠道和供應(yīng)鏈也是缺少,而其中困惱還是忠實(shí)用戶的數(shù)量。電子元器件幾乎覆蓋了我們生活的各個(gè)方面,既包括電力、機(jī)械、交通、化工等傳統(tǒng)工業(yè),也涵蓋航天、激光、通信、機(jī)器人、新能源等新興產(chǎn)業(yè)。據(jù)統(tǒng)計(jì),目前,我國(guó)電子元器件銷售產(chǎn)業(yè)總產(chǎn)值已占電子信息行業(yè)的五分之一,是我國(guó)電子信息行業(yè)發(fā)展的根本。河北高科技細(xì)胞計(jì)數(shù)儀咨詢報(bào)價(jià)
上海拓開(kāi)生物科技有限公司位于奉金路469號(hào)4幢3層1296室。公司自成立以來(lái),以質(zhì)量為發(fā)展,讓匠心彌散在每個(gè)細(xì)節(jié),公司旗下葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀深受客戶的喜愛(ài)。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),遵守行業(yè)規(guī)范,植根于電子元器件行業(yè)的發(fā)展。在社會(huì)各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造***服務(wù)體驗(yàn),為客戶成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持。