單細胞測序實驗的第一步是單細胞懸液的制備，而懸液制備中細胞計數的準確性直接影響單細胞測序的數據質量，但是關于細胞計數您真的了解嗎？

目前細胞計數主要使用臺盼藍染色法和雙熒光AO/PI染色法。

1）臺盼藍染色原理：臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色。而死細胞的細胞膜透性增高，可使染料進入細胞內而使細胞著色（藍色）。

2）雙熒光AO/PI染色原理：吖啶橙（AO）可以通過完整的細胞膜，嵌入所有細胞（活細胞和死細胞）的細胞核，呈現綠色熒光；碘化丙啶（PI）只能通過不完整的細胞膜，即死細胞的細胞膜，嵌入所有死細胞的細胞核，呈現紅色熒光。

拓開細胞計數儀，擁有自動化，合規(guī)化，高通量等優(yōu)勢，能夠幫助您在實驗室里高效率，高標準的完成細胞計數和細胞檢測等工作，是您細胞科研領域的強力伙伴。 細胞計數儀應該怎么選擇？通用細胞計數儀

自動化細胞計數和活率分析儀就可以替代傳統的手動計數法，滿足藥物研發(fā)和生產質控的需求。但對于這些自動化的細胞計數和活率分析儀，目前門類也很繁多，如何從中找到適合自己所需的那款呢，

準確性無疑是重要的，我們購買的任何分析儀器，如果不能保證準確性，那就無法正常使用，還不如回到光學顯微鏡+血球計數板純手動的方法。

計數結果的重復性好壞，對全自動細胞計數儀而言，除了取樣要有代表性外，剩下考察的是儀器的穩(wěn)定性和軟件對細胞識別的一致性。目前各家的細胞計數和活率分析儀對細胞的識別都問題不大，除了某些容易團聚的細胞，需要增加一個團聚度參數。 多功能細胞計數儀廠家現貨全自動細胞計數儀的評價。

細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總

貼壁細胞如何進行傳代?

去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min;棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8)，每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。

眾所周知，活細胞密度(VCD)和活率(viability)是評估哺乳動物細胞系生長狀態(tài)的重要指標。生物制藥研發(fā)人員進行懸浮細胞培養(yǎng)，每天所不能避免的工作，就是取樣計數。使用細胞計數板進行人工計數無疑是金標準方法。

但這個傳統方法其勞動強度十分驚人，樣品量少的時候還能吃得消，樣品量大一些，甚至于要做大規(guī)模的DOE實驗時，估計很多實驗人員想死的心都會有。而且人工計數有較強的主觀性，對操作人員的經驗及操作熟練度有一定要求，導致有時候數據的重現性和可比性會受到質疑。

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細胞離心下來的離心速率應為多少?

細胞傳代或凍存時欲回收細胞，其離心速度一般為800-1000 rpm/min，室溫離心5-8分鐘，轉速過高，將造成細胞破裂死亡。

如何用臺盼蘭計數活細胞?

用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200～2000 個/毫升，在0.1 毫升的細胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻，用血球計數板計數細胞?；罴毎懦馀_盼蘭，因而染成藍色的細胞是死細胞，注意計數需在加入臺盼藍10min內完成。有細胞計數儀的，可直接用計數儀進行。 細胞計數儀的檢測結果可靠嗎？河北推廣細胞計數儀代理商

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活死細胞的鑒別方法

活細胞的鑒定在生物學和醫(yī)學上具有很重要的意義。細胞培養(yǎng)過程中要隨時記錄細胞的生長情況，需要經常測定細胞的存活率；在zhong瘤細胞的研究中，為了檢驗各種藥物對zhong瘤細胞的殺傷力，也需要測定zhong瘤細胞的存活率。在臨床醫(yī)學中死活細胞的鑒定也有很大的應用，例如為了檢測某一男子的生育能力，測定精子細胞的存活力是比較常用的辦法。死活細胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法簡便，易于操作，但是通過直接的形態(tài)觀察來鑒別細胞死活，實驗結果很容易受操作者的主觀因素的影響，存在一定的誤差，所以，在實際操作中也常采用一些儀器來進行精確的批量檢測。 通用細胞計數儀

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