單細(xì)胞測(cè)序?qū)嶒?yàn)的第一步是單細(xì)胞懸液的制備，而懸液制備中細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細(xì)胞測(cè)序的數(shù)據(jù)質(zhì)量，但是關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)您真的了解嗎？

目前細(xì)胞計(jì)數(shù)主要使用臺(tái)盼藍(lán)染色法和雙熒光AO/PI染色法。

1）臺(tái)盼藍(lán)染色原理：臺(tái)盼藍(lán)不能透過(guò)活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色。而死細(xì)胞的細(xì)胞膜透性增高，可使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色（藍(lán)色）。

2）雙熒光AO/PI染色原理：吖啶橙（AO）可以通過(guò)完整的細(xì)胞膜，嵌入所有細(xì)胞（活細(xì)胞和死細(xì)胞）的細(xì)胞核，呈現(xiàn)綠色熒光；碘化丙啶（PI）只能通過(guò)不完整的細(xì)胞膜，即死細(xì)胞的細(xì)胞膜，嵌入所有死細(xì)胞的細(xì)胞核，呈現(xiàn)紅色熒光。

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二價(jià)離子抑制胰蛋白酶活性嗎?

二價(jià)離子的確抑制胰蛋白酶活性。

使用胰蛋白酶加入EDTA是為什么?

EDTA用來(lái)螯合游離的鎂離子和鈣離子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細(xì)胞前，用EDTA清洗細(xì)胞，以消除來(lái)自培養(yǎng)基中所有的二價(jià)離子。

可否使用與原先不同的培養(yǎng)基?

不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，易造成細(xì)胞狀態(tài)不好，**終造成細(xì)胞無(wú)法存活。 鎮(zhèn)江細(xì)胞計(jì)數(shù)儀哪家便宜細(xì)胞計(jì)數(shù)儀起到什么作用？

給大家分享一下細(xì)胞手工計(jì)數(shù)的基本原理和需要注意的幾點(diǎn)操作細(xì)節(jié)。

血球計(jì)數(shù)板結(jié)構(gòu)細(xì)胞手工計(jì)數(shù)板主要是血球計(jì)數(shù)板，市面上賣的一般都是有醫(yī)療器械號(hào)（國(guó)產(chǎn)進(jìn)口均可用，不用挑哈）。血球計(jì)數(shù)板是一塊比普通載玻片厚的長(zhǎng)方形玻片，在中部1/3面積區(qū)域有4條凹槽，將中部區(qū)域分為3個(gè)長(zhǎng)方形平臺(tái)；其中正中間的平臺(tái)又被一短橫凹槽分隔為兩半，作為兩個(gè)計(jì)數(shù)池，兩個(gè)計(jì)數(shù)池平臺(tái)高度比兩邊略低0.1mm。

在顯微鏡下，每一個(gè)計(jì)數(shù)池均可以看見以下網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，9個(gè)同面積的大方格組成方格網(wǎng)，大方格作為計(jì)數(shù)室（綠色和藍(lán)色方框區(qū)域）。計(jì)數(shù)室邊長(zhǎng)為1mm，蓋上蓋玻片后容積為：1mm(長(zhǎng))x1mm(寬)x0.1mm(高)=0.1mm3，即一個(gè)計(jì)數(shù)室的體積為0.1mm3,也就是1x10-4mL。我們只要把這個(gè)計(jì)數(shù)室里面的細(xì)胞數(shù)清楚，再乘以104，我們就可以得到每毫升樣本中的細(xì)胞個(gè)數(shù)。

細(xì)胞活力鑒定——臺(tái)盼藍(lán)染色法

臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue），也稱二胺藍(lán)（Diamine Blue）和加拉藍(lán)（Niagra Blue）,是一種用于選擇性著色死細(xì)胞和即將死亡的細(xì)胞的重要染料。這種染料不能進(jìn)入細(xì)胞膜完整的細(xì)胞，而能在細(xì)胞膜受損的死細(xì)胞或即將死亡的細(xì)胞內(nèi)迅速積累，從而在顯微鏡下顯出藍(lán)色。若染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，臺(tái)盼藍(lán)可能通過(guò)胞吞或胞飲作用進(jìn)入細(xì)胞。

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培養(yǎng)的細(xì)胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長(zhǎng)良好，所以要精細(xì)細(xì)胞計(jì)數(shù)，在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞，總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力，用臺(tái)盼蘭染細(xì)胞，死細(xì)胞著色，活細(xì)胞不著色，從而可以區(qū)分死細(xì)胞與活細(xì)胞。所以在細(xì)胞生物學(xué)研究過(guò)程中，細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活率測(cè)定是非常重要的工作，血球計(jì)數(shù)板消耗了研究者大量時(shí)間與體力，且結(jié)果也不能得到保證，重復(fù)性差。

而全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀擺脫了手工計(jì)數(shù)細(xì)胞的苦差和煩惱，同時(shí)結(jié)果更加準(zhǔn)確客觀，操作快速簡(jiǎn)便，重復(fù)性好，尤其為我們科研工作者節(jié)省了寶貴的時(shí)間，使研究者把更多的精力放在更重要的工作上。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么使用？湖南機(jī)械細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的缺點(diǎn)。浙江自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀代理商

在各種細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析方法中，臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)疑是細(xì)胞活率分析的金標(biāo)準(zhǔn)。目前，通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)染色分析細(xì)胞活率的方法包括：傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板法，也有市場(chǎng)上很普遍的插片式半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，以及無(wú)需手動(dòng)混勻和染色的全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀。

其中，后兩個(gè)分析儀器的出現(xiàn)，不僅很大程度地解放了人力，同時(shí)相比于顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板法會(huì)更省時(shí)，更合規(guī)，所以被各大制藥企業(yè)所使用。而全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀更是在工藝開發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)控方面表現(xiàn)出特有的優(yōu)勢(shì)，即減少了人為的操作誤差和提高了儀器間數(shù)據(jù)的一致性而廣受歡迎。 浙江自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀代理商

上海拓開生物科技有限公司是一家從事生物科技領(lǐng)域、化工科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓，辦公用品、儀器儀表、化工原料及產(chǎn)品（除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、易制毒化學(xué)品）批發(fā)零售。 【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目，經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】的公司，是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。公司自創(chuàng)立以來(lái)，投身于葡萄糖乳酸分析儀，生化分析儀，智能控制系統(tǒng)，細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，是電子元器件的主力軍。上海拓開始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念，影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功。上海拓開始終關(guān)注電子元器件市場(chǎng)，以敏銳的市場(chǎng)洞察力，實(shí)現(xiàn)與客戶的成長(zhǎng)共贏。