培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點,是污染嗎?
首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則,是否運動,是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則,做布朗運動,黑點可能是細(xì)胞碎片(可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致,快速移動,很可能是細(xì)菌污染。 細(xì)胞計數(shù)儀如何購買?湖北多功能細(xì)胞計數(shù)儀咨詢問價
原代細(xì)胞培養(yǎng)后細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞使得培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的比較大利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。
拓開細(xì)胞計數(shù)儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實驗室里高效率,高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞檢測等工作,是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。 浙江多功能細(xì)胞計數(shù)儀供應(yīng)商細(xì)胞計數(shù)儀的體積有多大?
給大家分享一下細(xì)胞手工計數(shù)的基本原理和需要注意的幾點操作細(xì)節(jié)。
血球計數(shù)板結(jié)構(gòu)細(xì)胞手工計數(shù)板主要是血球計數(shù)板,市面上賣的一般都是有醫(yī)療器械號(國產(chǎn)進(jìn)口均可用,不用挑哈)。血球計數(shù)板是一塊比普通載玻片厚的長方形玻片,在中部1/3面積區(qū)域有4條凹槽,將中部區(qū)域分為3個長方形平臺;其中正中間的平臺又被一短橫凹槽分隔為兩半,作為兩個計數(shù)池,兩個計數(shù)池平臺高度比兩邊略低0.1mm。
在顯微鏡下,每一個計數(shù)池均可以看見以下網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),9個同面積的大方格組成方格網(wǎng),大方格作為計數(shù)室(綠色和藍(lán)色方框區(qū)域)。計數(shù)室邊長為1mm,蓋上蓋玻片后容積為:1mm(長)x1mm(寬)x0.1mm(高)=0.1mm3,即一個計數(shù)室的體積為0.1mm3,也就是1x10-4mL。我們只要把這個計數(shù)室里面的細(xì)胞數(shù)清楚,再乘以104,我們就可以得到每毫升樣本中的細(xì)胞個數(shù)。
貼壁細(xì)胞傳代如何使用胰酶?
一般使用trypsin-EDTA濃度為0.25% trypsin-0.53 mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02 mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細(xì)胞傳代時建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化,對于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化,細(xì)胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在–20°C,解凍在4°C進(jìn)行,開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于–20°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機(jī)會。 細(xì)胞計數(shù)儀是什么原理?
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久。
細(xì)胞生長逐漸變慢是什么原因?
細(xì)胞增殖變慢有以下原因:1. 消化過度 2. 傳代過密 3.細(xì)胞營養(yǎng)不良 4.細(xì)胞頻繁傳代 5.細(xì)胞狀態(tài)不佳或老化 6.細(xì)胞存在污染。 細(xì)胞計數(shù)儀選擇哪個品牌?四川有什么細(xì)胞計數(shù)儀咨詢報價
細(xì)胞計數(shù)儀的實用性對比。湖北多功能細(xì)胞計數(shù)儀咨詢問價
如何讓細(xì)胞計數(shù)更加的準(zhǔn)確
優(yōu)化細(xì)胞計數(shù)的設(shè)備配置
無論是手動計數(shù)還是依靠TANK-CA0008全自動細(xì)胞計數(shù)儀自帶軟件算法計數(shù),調(diào)整焦距和曝光設(shè)置都很重要,以確保細(xì)胞盡可能有比較好的可見性/能見度,終獲得準(zhǔn)確的細(xì)胞計數(shù)結(jié)果。比較好的聚焦和曝光將在細(xì)胞膜和背景之間,有非常非常非常鮮明的對比。
血球計數(shù)板的腔室需要調(diào)整到合適的高度
血球計數(shù)板有多種型號規(guī)格可供選擇。不同型號的腔室高度和深度在設(shè)計上都差異巨大。實驗人員在計算細(xì)胞數(shù)量時要注意一些細(xì)節(jié)以避免錯誤。 湖北多功能細(xì)胞計數(shù)儀咨詢問價
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