細胞計數(shù)有多重要?這個答案想必不用回答,大家都心里有數(shù)。畢竟我們都曾經(jīng)歷過,花了一整天的時間制備細胞、染色、分選,進行一個精密計劃的實驗,結(jié)果卻因為發(fā)現(xiàn)細胞量卻不夠而被迫結(jié)束。如今圈子里常用的細胞計數(shù)方法是顯微鏡+血球計數(shù)板,然而隔壁實驗室的小明都在用自動的細胞計數(shù)儀了。但一些只相信所見即所得的小伙伴,對于自動細胞計數(shù)仍舊不太信任,因此體貼如我就為大家比對一下自動細胞計數(shù)儀和血球計數(shù)板。希望大家能有一個直觀的印象。細胞計數(shù)儀選擇哪個品牌?衢州細胞計數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
生物科技界細胞計數(shù)三大派系
血球計數(shù)板派(你數(shù)派)
血球計數(shù)板派(你數(shù)派)一直秉承著“只要眼睛好,世界很美好”的宗旨,通?!澳銛?shù)派”師兄妹都是火眼金睛視力好,心無旁騖定力強,心算筆算能力強,實驗室的細胞計數(shù)活少,人力成本低,時間不值錢。血球計數(shù)板計數(shù)很容易受主觀影響,結(jié)果不準確,重復(fù)性也不好,每次計數(shù)結(jié)果都不一樣,不同師兄妹計數(shù)結(jié)果也不一樣!若是哪天有幾十個細胞樣本要計數(shù),那真是要讓人發(fā)瘋了!相信很多伙伴都是親身經(jīng)歷過的
浙江自動化細胞計數(shù)儀價格走勢全自動細胞計數(shù)儀如何選擇?
如何獲取高質(zhì)量的細胞懸液,下面就帶您一步步***從組織到細胞懸液的旅程,讓細胞懸液制備不再成為困擾您的難題。
樣本準備
新鮮組織樣本是制備細胞懸液的首要條件,新鮮組織從***取下后,去除周圍的脂肪、結(jié)締組織或者壞死組織,用預(yù)冷的PBS或者生理鹽水沖洗干凈,快速轉(zhuǎn)移到解離實驗室進行細胞懸液制備,一般1個黃豆大小的組織量(200 mg)即可滿足一次組織解離。如果收集到新鮮樣本后無法立即進行懸液制備,可暫時用組織保存液4℃保存,盡快完成細胞懸液制備。
原代培養(yǎng)及其操作步驟
從供體內(nèi)取出組織后,經(jīng)機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環(huán)境,在無菌、適當(dāng)溫度和一定的營養(yǎng)條件下,生存、生長和繁殖。原代培養(yǎng)細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能說明所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞培養(yǎng)做各種實驗,如藥物測試、細胞分化及病毒學(xué)方面的試驗效果很好。
拓開細胞計數(shù)儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實驗室里高效率,高標(biāo)準的完成細胞計數(shù)和細胞檢測等工作,是您細胞科研領(lǐng)域的強力伙伴。 全自動細胞計數(shù)儀的缺點。
單細胞測序?qū)嶒灥牡谝徊绞菃渭毎麘乙旱闹苽?,而懸液制備中細胞計?shù)的準確性直接影響單細胞測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,但是關(guān)于細胞計數(shù)您真的了解嗎?
目前細胞計數(shù)主要使用臺盼藍染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1)臺盼藍染色原理:臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色。而死細胞的細胞膜透性增高,可使染料進入細胞內(nèi)而使細胞著色(藍色)。
2)雙熒光AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)可以通過完整的細胞膜,嵌入所有細胞(活細胞和死細胞)的細胞核,呈現(xiàn)綠色熒光;碘化丙啶(PI)只能通過不完整的細胞膜,即死細胞的細胞膜,嵌入所有死細胞的細胞核,呈現(xiàn)紅色熒光。
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細胞接種密度多少合適?
依照細胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經(jīng)驗:一般倍增時間24 h內(nèi)的細胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時間24-48 h的細胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時間超過48h的細胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。
如何預(yù)防細胞培養(yǎng)中黑點的產(chǎn)生?
掌握細胞傳代的比較好時機,不要細胞長老了再傳代;掌握好消化時間,防止消化過度產(chǎn)生細胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數(shù);將培養(yǎng)液的PH調(diào)到比較好;嚴格控制水質(zhì)和器皿的清潔。 衢州細胞計數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
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