活死細(xì)胞的鑒別方法

活細(xì)胞的鑒定在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有很重要的意義。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中要隨時(shí)記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，需要經(jīng)常測(cè)定細(xì)胞的存活率；在zhong瘤細(xì)胞的研究中，為了檢驗(yàn)各種藥物對(duì)zhong瘤細(xì)胞的殺傷力，也需要測(cè)定zhong瘤細(xì)胞的存活率。在臨床醫(yī)學(xué)中死活細(xì)胞的鑒定也有很大的應(yīng)用，例如為了檢測(cè)某一男子的生育能力，測(cè)定精子細(xì)胞的存活力是比較常用的辦法。死活細(xì)胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法簡(jiǎn)便，易于操作，但是通過(guò)直接的形態(tài)觀察來(lái)鑒別細(xì)胞死活，實(shí)驗(yàn)結(jié)果很容易受操作者的主觀因素的影響，存在一定的誤差，所以，在實(shí)際操作中也常采用一些儀器來(lái)進(jìn)行精確的批量檢測(cè)。 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀存在什么缺點(diǎn)？湖北多功能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀比較價(jià)格

培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5%或10%CO2?

一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3 - / CO32- / H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時(shí)，則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。

CO2培養(yǎng)箱之水盤(pán)如何保持清潔?

定期(每周一次)更換水盤(pán)里面的水，水盤(pán)的水必須使用無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子，水盤(pán)中可添加1%硫酸銅以預(yù)防霉菌污染。

希望能幫到大家。

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原代培養(yǎng)及其操作步驟

從供體內(nèi)取出組織后，經(jīng)機(jī)械以及消化分離成單個(gè)細(xì)胞或單一型細(xì)胞群，使之在體外模擬人體生理環(huán)境，在無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定的營(yíng)養(yǎng)條件下，生存、生長(zhǎng)和繁殖。原代培養(yǎng)細(xì)胞常有不同的細(xì)胞成分，生長(zhǎng)緩慢，但是更能說(shuō)明所來(lái)源的組織細(xì)胞類型和表達(dá)組織的特異性特征。利用原代細(xì)胞培養(yǎng)做各種實(shí)驗(yàn)，如藥物測(cè)試、細(xì)胞分化及病毒學(xué)方面的試驗(yàn)效果很好。

拓開(kāi)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，擁有自動(dòng)化，合規(guī)化，高通量等優(yōu)勢(shì)，能夠幫助您在實(shí)驗(yàn)室里高效率，高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞檢測(cè)等工作，是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。

臺(tái)盼藍(lán)染液是細(xì)胞活性染料，常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性。細(xì)胞損傷或死亡時(shí)，臺(tái)盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜，與解體的DNA結(jié)合，使其著色。而活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。故可以檢測(cè)細(xì)胞是否存活。

臺(tái)盼藍(lán)染色法的原理正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的識(shí)別原理。

傳統(tǒng)手動(dòng)計(jì)數(shù)法

回答這個(gè)問(wèn)題前，我們拿一個(gè)可以比較的對(duì)象，即原始的細(xì)胞計(jì)數(shù)及活率分析方法——1臺(tái)光學(xué)顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板，待測(cè)的細(xì)胞懸液樣品被滴加在血球計(jì)數(shù)板上，通過(guò)肉眼人工計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)細(xì)胞數(shù)量和計(jì)算細(xì)胞活率。

顯微鏡下我們可以看到血球計(jì)數(shù)板上4個(gè)區(qū)域，其中的活細(xì)胞和死細(xì)胞數(shù)目被分別統(tǒng)計(jì)。這個(gè)方法比較大的優(yōu)勢(shì)是整套設(shè)備很便宜，配套一塊血球計(jì)數(shù)板，以及自配的臺(tái)盼藍(lán)溶液即可開(kāi)始整個(gè)實(shí)驗(yàn)，所以使用成本會(huì)很低，比較適合高校研究所中用于學(xué)生的教學(xué)實(shí)驗(yàn)。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的缺點(diǎn)。廣東智能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀銷售電話

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細(xì)胞離心下來(lái)的離心速率應(yīng)為多少?

細(xì)胞傳代或凍存時(shí)欲回收細(xì)胞，其離心速度一般為800-1000 rpm/min，室溫離心5-8分鐘，轉(zhuǎn)速過(guò)高，將造成細(xì)胞破裂死亡。

如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?

用無(wú)血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200～2000 個(gè)/毫升，在0.1 毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?；罴?xì)胞排斥臺(tái)盼蘭，因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞，注意計(jì)數(shù)需在加入臺(tái)盼藍(lán)10min內(nèi)完成。有細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的，可直接用計(jì)數(shù)儀進(jìn)行。 湖北多功能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀比較價(jià)格

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