細胞接種密度多少合適?

依照細胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經(jīng)驗：一般倍增時間24 h內(nèi)的細胞，傳代比率1:6-1:12為宜，倍增時間24-48 h的細胞，傳代比率1:3-1:8為宜，倍增時間超過48h的細胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。

如何預(yù)防細胞培養(yǎng)中黑點的產(chǎn)生?

掌握細胞傳代的比較好時機，不要細胞長老了再傳代;掌握好消化時間，防止消化過度產(chǎn)生細胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數(shù);將培養(yǎng)液的PH調(diào)到比較好;嚴格控制水質(zhì)和器皿的清潔。 全自動細胞計數(shù)儀擁有那些特點。河北自動化細胞計數(shù)儀比較價格

細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總

一般拿到細胞后，應(yīng)該注意什么?

收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張)，排除細胞本身污染的情況。

何時須更換培養(yǎng)基?

視細胞生長密度而定，常規(guī)細胞2-3天更換培養(yǎng)基。

細胞何時進行傳代較好?

一般情況下細胞生長至完全匯合后就應(yīng)該傳代，所有細胞生長都有一個要求不宜生長過密(也就是常說的長老了)，但有接觸抑制的細胞，在匯合前就必須進行傳代，這類細胞一般在密度70-80%就進行傳代，否則會引起細胞分化。 湖北自動化細胞計數(shù)儀咨詢問價細胞計數(shù)儀的實用性對比。

細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總

貼壁細胞如何進行傳代?

去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min;棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8)，每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。

細胞抱團怎么處理?

一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15 ml離心管中，靜置20 min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團，需要大家酌情而定)。 TANK細胞計數(shù)儀價格。

活死細胞的鑒別方法

活細胞的鑒定在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有很重要的意義。細胞培養(yǎng)過程中要隨時記錄細胞的生長情況，需要經(jīng)常測定細胞的存活率；在zhong瘤細胞的研究中，為了檢驗各種藥物對zhong瘤細胞的殺傷力，也需要測定zhong瘤細胞的存活率。在臨床醫(yī)學(xué)中死活細胞的鑒定也有很大的應(yīng)用，例如為了檢測某一男子的生育能力，測定精子細胞的存活力是比較常用的辦法。死活細胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法簡便，易于操作，但是通過直接的形態(tài)觀察來鑒別細胞死活，實驗結(jié)果很容易受操作者的主觀因素的影響，存在一定的誤差，所以，在實際操作中也常采用一些儀器來進行精確的批量檢測。 細胞計數(shù)儀存在什么缺點？江蘇應(yīng)用細胞計數(shù)儀定制價格

全自動細胞計數(shù)儀的檢測速度。河北自動化細胞計數(shù)儀比較價格

原代細胞培養(yǎng)后細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞使得培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的比較大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。

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