細胞培養(yǎng)實驗室之凈化工作臺

凈化工作臺：操作簡單，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺主要有兩種：a)側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。

凈化工作臺工作原理（大致相同）——通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾，由離心風機壓入靜壓箱，再經(jīng)高效空氣過濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū)，從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。

側(cè)流式工作臺—空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過工作臺面流向?qū)?cè)，也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè)，形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌。工作臺結(jié)構(gòu)為封閉式。

外流式（水平式）工作臺—凈化后的空氣面向操作者流動，因而外方氣流不致混入操作，但進行有害物質(zhì)實驗操作則對操作者不利。工作臺結(jié)構(gòu)為開放式（已少用）。 細胞計數(shù)儀的體積有多大？湖北應(yīng)用細胞計數(shù)儀價目表

細胞離心下來的離心速率應(yīng)為多少?

細胞傳代或凍存時欲回收細胞，其離心速度一般為800-1000 rpm/min，室溫離心5-8分鐘，轉(zhuǎn)速過高，將造成細胞破裂死亡。

如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞?

用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200～2000 個/毫升，在0.1 毫升的細胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻，用血球計數(shù)板計數(shù)細胞?；罴毎懦馀_盼蘭，因而染成藍色的細胞是死細胞，注意計數(shù)需在加入臺盼藍10min內(nèi)完成。有細胞計數(shù)儀的，可直接用計數(shù)儀進行。 安徽通用細胞計數(shù)儀咨詢報價細胞計數(shù)儀對比血球計數(shù)板。

細胞抱團怎么處理?

一些懸浮細胞抱團生長是正常現(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15 ml離心管中，靜置20 min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團，需要大家酌情而定)。

細胞內(nèi)有空泡，是否是正常現(xiàn)象?

部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等)，這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調(diào)整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較高，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

細胞傳兩代后開始逐漸死亡的原因

很可能是培養(yǎng)體系不適合細胞(未使用推薦的培養(yǎng)體系);或者消化過度，對細胞有嚴重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細胞，傳代太稀;或者生長較快的細胞，傳代較密，細胞嚴重堆疊生長)。 細胞計數(shù)儀起到什么作用？

如何控制胰酶消化時間?

胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。消化對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄比較好消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。 TANK細胞計數(shù)儀價格。北京通用細胞計數(shù)儀收費

全自動細胞計數(shù)儀的評價。湖北應(yīng)用細胞計數(shù)儀價目表

細胞活力鑒定——臺盼藍染色法

臺盼藍（Trypan Blue），也稱二胺藍（Diamine Blue）和加拉藍（Niagra Blue）,是一種用于選擇性著色死細胞和即將死亡的細胞的重要染料。這種染料不能進入細胞膜完整的細胞，而能在細胞膜受損的死細胞或即將死亡的細胞內(nèi)迅速積累，從而在顯微鏡下顯出藍色。若染色時間過長，臺盼藍可能通過胞吞或胞飲作用進入細胞。

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