造模方法 頸部備皮常規(guī)消毒，取頸正中切口剪開(kāi)皮膚，分離皮膚下軟組織并暴露頸動(dòng)脈鞘； 游離出頸總動(dòng)脈1.5cm，穿線備用； 向遠(yuǎn)心端找到頸外側(cè)動(dòng)脈，游離涌現(xiàn)結(jié)扎，提起頸總備用線，在近心端，遠(yuǎn)心端用動(dòng)脈夾夾?。?在近心端動(dòng)脈夾處，用5mL注射器針頭刺破血管，稍微提起動(dòng)脈夾，用鑷子夾住線栓，從小口插入動(dòng)脈后，去掉遠(yuǎn)心端動(dòng)脈夾，然后用鑷子夾住線栓，線栓插入到頸內(nèi)距分叉處1.8-2.0cm； 用備用線將頸總和線栓一起結(jié)扎住，*好是結(jié)扎雙道，記錄線栓插入時(shí)間，在將動(dòng)脈夾另一邊近心端頸總結(jié)扎住，去掉動(dòng)脈夾； 注意縫合時(shí)不要將線栓帶出，*后根據(jù)評(píng)分來(lái)判斷成模性。 線栓法是國(guó)內(nèi)外*常用的制作腦局部缺血再灌注損傷的方法。Koizumi 于 1986 年首先報(bào)道了用線栓法制備大鼠腦缺血再灌注模型，此后 Longa等對(duì)該方法進(jìn)行了改良。線栓法腦缺血模型的研究已經(jīng)取得很多突破和進(jìn)展，但模型制備的穩(wěn)定性受很多因素的影響，如小鼠體質(zhì)量、線栓的選擇等。小鼠缺血再灌注損傷后腦梗死體積百分比的變化可以為研究治*腦卒中藥物時(shí)間窗提供基礎(chǔ)依據(jù)，對(duì)進(jìn)一步深入研究大鼠缺血再灌注損傷模型有重要的意義。腦梗MCAO模型是一種常用的腦梗動(dòng)物模型，用于研究腦梗死的發(fā)病機(jī)制和治*方法。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項(xiàng)

實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)在科研領(lǐng)域中扮演著越來(lái)越重要的角色。他們通常由具有高度專業(yè)知識(shí)和豐富實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)的科研人員組成，能夠?yàn)榭蒲腥藛T提供*方位的技術(shù)支持，幫助他們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中解決各種難題。 首先，實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)具備較高的學(xué)歷背景，通常擁有碩士或博士學(xué)位，甚至有些團(tuán)隊(duì)成員擁有海外留學(xué)或科研經(jīng)歷。他們通過(guò)系統(tǒng)的學(xué)習(xí)和實(shí)踐，掌握了先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法，能夠應(yīng)對(duì)各種復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)需求。 其次，實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)具有豐富的實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn)。他們經(jīng)過(guò)多年的實(shí)踐積累，對(duì)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié)有著深入的了解和掌握，能夠熟練應(yīng)對(duì)各種實(shí)驗(yàn)問(wèn)題。同時(shí)，他們還具備嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)態(tài)度和科學(xué)的方法論，能夠確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項(xiàng)進(jìn)栓長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng)，易造成蛛網(wǎng)膜下腔出血，死亡率較高、模型制備失敗。

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，動(dòng)物的表現(xiàn)會(huì)被詳細(xì)記錄。例如，它們是否能保持平衡，是否出現(xiàn)跌倒，以及跌倒的頻率和持續(xù)時(shí)間等。這些數(shù)據(jù)將被用于分析腦梗對(duì)動(dòng)物平衡和協(xié)調(diào)性的影響。 這種實(shí)驗(yàn)方法有助于我們深入理解腦梗對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的影響，以及可能對(duì)治*方法和康復(fù)策略的改進(jìn)提供重要信息。例如，如果發(fā)現(xiàn)腦梗后的動(dòng)物在轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)明顯下降，這可能表明腦梗影響了動(dòng)物的平衡和協(xié)調(diào)能力。這可能會(huì)引導(dǎo)研究人員尋找新的治*方法，以改善或恢復(fù)這些功能。

將小鼠進(jìn)行呼吸誘導(dǎo)麻醉（異氟烷）后，以仰臥位固定于操作臺(tái)上，繼續(xù)維持麻醉，常規(guī)消毒，備皮，取頸部正中切口，分離右側(cè)頸部總動(dòng)脈（CCA）、勁內(nèi)動(dòng)脈（ICA）和頸外動(dòng)脈（ECA），結(jié)扎ECA遠(yuǎn)心端，在ECA起始端留置結(jié)扎線，用動(dòng)脈夾將ICA遠(yuǎn)心端、CCA近心端夾閉。在ECA遠(yuǎn)心端結(jié)扎線外離斷，將ECA拉至與ICA成一條直線，于結(jié)扎線近端用顯微剪剪一斜口，將MACO栓線緩緩送入，栓線通過(guò)ECA近心端結(jié)扎線進(jìn)入ICA后，單道結(jié)扎ECA近心端結(jié)扎線，使栓線與血管相對(duì)固定，隨即松開(kāi)ICA上的動(dòng)脈夾，緩慢上提ECA近心端結(jié)扎線，將栓線緩慢送入，進(jìn)線至線栓刻度位置。 缺血后再灌注：栓線插入40 min后拔出，隨后將ECA近心端結(jié)扎線結(jié)扎，松開(kāi)CCA近心端動(dòng)脈夾，碘伏消毒后逐層縫合切口。手術(shù)有一定技術(shù)難度，血管結(jié)扎不緊或結(jié)扎線脫落，會(huì)出血導(dǎo)致病理生理狀態(tài)改變或增加死亡。

腦梗MCAO模型成功的評(píng)判方法主要包括以下幾個(gè)方面： 1.腦梗死面積的評(píng)估：通過(guò)TTC（2%，17分鐘）染色法對(duì)腦梗死面積進(jìn)行分析和量化。在染色后，利用ImageJ圖像分析軟件對(duì)切片進(jìn)行處理，從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，通過(guò)比較不同處理組之間的腦梗死面積，可以評(píng)估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評(píng)分：參照Z(yǔ)ea-Longa評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)估。評(píng)分越高，表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。通過(guò)對(duì)不同處理組的神經(jīng)功能缺損評(píng)分進(jìn)行比較，可以進(jìn)一步驗(yàn)證模型的成功。 3.梗死血管的觀察：通過(guò)激光多普勒血流儀檢測(cè)相對(duì)腦血流動(dòng)脈減少情況，評(píng)估梗死血管的狹窄程度。同時(shí)，觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況，以判斷血管阻塞的效果。采用Longa等的5級(jí)4分法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行評(píng)價(jià)。上海定制腦梗MCAO模型課題研究

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在成功建立小鼠腦梗模型后，認(rèn)知功能的檢測(cè)可以通過(guò)以下方法進(jìn)行： 1. 迷宮測(cè)試：這是一個(gè)常用的方法，通過(guò)讓小鼠在迷宮中尋找食物，觀察其尋找食物的速度和正確性，來(lái)評(píng)估其認(rèn)知功能。 2. 物體識(shí)別測(cè)試：給小鼠展示兩個(gè)相似的物體，觀察其是否能夠正確識(shí)別并記住這兩個(gè)物體。 3. 社交互動(dòng)測(cè)試：觀察小鼠與其他小鼠的互動(dòng)情況，包括是否能夠正確識(shí)別其他小鼠，以及是否能夠進(jìn)行正常的社交行為。 這些測(cè)試可以幫助評(píng)估小鼠的認(rèn)知功能，從而了解腦梗對(duì)其認(rèn)知功能的影響。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項(xiàng)