在實驗過程中,動物的表現(xiàn)會被詳細記錄。例如,它們是否能保持平衡,是否出現(xiàn)跌倒,以及跌倒的頻率和持續(xù)時間等。這些數(shù)據(jù)將被用于分析腦梗對動物平衡和協(xié)調(diào)性的影響。 這種實驗方法有助于我們深入理解腦梗對神經(jīng)系統(tǒng)的影響,以及可能對治*方法和康復(fù)策略的改進提供重要信息。例如,如果發(fā)現(xiàn)腦梗后的動物在轉(zhuǎn)棒實驗中的表現(xiàn)明顯下降,這可能表明腦梗影響了動物的平衡和協(xié)調(diào)能力。這可能會引導(dǎo)研究人員尋找新的治*方法,以改善或恢復(fù)這些功能。在實驗過程中,應(yīng)建立嚴格的質(zhì)量控制體系,包括實驗操作規(guī)范、數(shù)據(jù)記錄和分析等環(huán)節(jié)。上海腦局部缺血再灌注損傷腦梗MCAO模型大概價格
動物卒中模型的制作也是臨床前實驗研究的前提,缺血性卒中的動物實驗?zāi)P途哂嗅槍π耘c多樣性的特點,并被不斷地進行改進與創(chuàng)新,力爭制作的動物模型能無限接近真實的人類腦卒中。目前,大鼠、小鼠、猿、猴、犬、兔、羊、豬等多種動物被用于制備局灶性腦缺血模型。線栓法、開顱法、栓子栓塞法、光化學(xué)法、FeCl3誘導(dǎo)法、內(nèi)皮素-1誘導(dǎo)法和自發(fā)性卒中法為常用方法,其中線栓法大腦中動脈栓塞(MCAO)為制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。 北京小鼠腦梗MCAO模型市場價格這種模型有助于研究腦梗的發(fā)病機制,并尋找新的治*策略。
檢測方法 造模完成后等待大鼠蘇醒,依據(jù)Zea longa 5分制標(biāo)準(zhǔn)篩選出2分或3分的腦缺血模型進入后續(xù)實驗。0分:無神經(jīng)功能缺損癥狀,活動正常;1分:不能伸展對側(cè)前爪;2分:爬行時出現(xiàn)向左轉(zhuǎn)圈;3分:行走時身體向偏癱側(cè)傾倒;4分:不能自發(fā)行走,意識喪失。行為學(xué)指標(biāo)目前常采用跳臺法、避暗法、穿梭箱法來測定動物一次性被動回避反射能力 ; Y 形水迷宮實驗、Morris水迷宮實驗等測定動物空間分辨學(xué)習(xí)記憶能力。研究血管性癡呆、腦卒中抑郁癥等可以選擇曠場試驗作為行為學(xué)檢測指標(biāo)之一。病理檢測常用HE染色觀察組織水腫炎癥反應(yīng)等,尼氏染色可以反應(yīng)神經(jīng)元細胞情況。
腦梗MCAO模型成功的評判方法主要包括以下幾個方面: 1.腦梗死面積的評估:通過TTC(2%,17分鐘)染色法對腦梗死面積進行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對切片進行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實驗過程中,通過比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評分:參照Zea-Longa評分標(biāo)準(zhǔn),對實驗動物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進行評估。評分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴重。通過對不同處理組的神經(jīng)功能缺損評分進行比較,可以進一步驗證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過激光多普勒血流儀檢測相對腦血流動脈減少情況,評估梗死血管的狹窄程度。同時,觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。將動物放在一個有階梯的平臺上,觀察動物是否能順利爬上爬下,以評估動物的肢體運動能力和協(xié)調(diào)性。
迄今為止,缺血性腦卒中模型覆蓋各種小型動物(小鼠,大鼠等)和較大型動物(兔、犬、豬、猴等),并應(yīng)用于卒中治*藥物的臨床前藥理藥效研究。然而,自1970年代以來,大量在動物模型上得到驗證的受試藥物均未能在人體臨床試驗中獲得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相對簡單的動物模型不能準(zhǔn)確模擬人類卒中的病理生理過程;2)臨床前動物實驗的藥效評價方法尚難以成功轉(zhuǎn)化到復(fù)雜的人體臨床試驗標(biāo)準(zhǔn)。2009年國際公認的“腦卒中治*學(xué)術(shù)工業(yè)圓桌會議”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)發(fā)布了臨床前缺血性腦卒中藥物研發(fā)準(zhǔn)則,提出提高臨床前藥理藥效研究質(zhì)量的具體要求。近年來隨著更深入的基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),更多符合人類發(fā)病機理和病理生理過程的缺血性腦卒中動物模型已被開發(fā)。行為學(xué)檢測是評估腦梗MCAO模型動物行為變化的一種方法。北京小鼠腦梗MCAO模型市場價格
建立大腦中動脈閉塞(MCAO)再灌注模型動物模型是研究此類疾病的*重要工具之一。上海腦局部缺血再灌注損傷腦梗MCAO模型大概價格
采用Longa等的5級4分法標(biāo)準(zhǔn)對模型動物進行評價,0分:無神經(jīng)功能缺損癥狀;1分:出現(xiàn)左側(cè) Honer征,輕度神經(jīng)功能缺損;2分:提尾對側(cè)前肢內(nèi)旋,肩內(nèi)收,中度神經(jīng)功能缺損;3分:向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈、向?qū)?cè)傾倒,重度神經(jīng)功能缺損;4分:不能自發(fā)行走,部分意識喪失。鼠側(cè)傾倒,評分為3分。 沿腦橋上界面切斷,去除嗅球,稱全腦重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做連續(xù)冠狀切片(切片厚度2 mm)。將腦切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒溫振蕩器中,37℃避光染色30 min,將腦切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出腦片,相機拍照,用 Motic Images Plus 顯微圖像分析系統(tǒng)計算腦梗死面積和梗死體積。上海腦局部缺血再灌注損傷腦梗MCAO模型大概價格