局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動脈栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠腦血管解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,大腦中動脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位,同時,采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu(持續(xù))和短暫性損傷等多種狀態(tài),在評價藥物量效關系和確認治*時間窗等方面有一定優(yōu)勢,因此,MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。將尼龍線由大(?。┦蟮念i外動脈(ECA)插入,經(jīng)頸內(nèi)動脈(ECA)阻斷一側(cè)MCA起始端,導致一側(cè)(局灶性)腦缺血。術后再使用激光散斑血流儀或多普勒血流儀對造模效果進行驗證和確認。穩(wěn)定且成功率高的小鼠腦梗模型可以模擬人類腦梗的病理過程,為研究腦梗的發(fā)病機制、預防提供實驗基礎。北京本地腦梗MCAO模型TTC染色
腦梗MCAO模型成功的評判方法主要包括以下幾個方面: 1.腦梗死面積的評估:通過TTC(2%,17分鐘)染色法對腦梗死面積進行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對切片進行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實驗過程中,通過比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評分:參照Zea-Longa評分標準,對實驗動物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進行評估。評分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴重。通過對不同處理組的神經(jīng)功能缺損評分進行比較,可以進一步驗證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過激光多普勒血流儀檢測相對腦血流動脈減少情況,評估梗死血管的狹窄程度。同時,觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。南京快速制作腦梗MCAO模型模型檢測實驗外包團隊可以根據(jù)科研人員的需求,設計并執(zhí)行各種實驗。
動物卒中模型的制作也是臨床前實驗研究的前提,缺血性卒中的動物實驗模型具有針對性與多樣性的特點,并被不斷地進行改進與創(chuàng)新,力爭制作的動物模型能無限接近真實的人類腦卒中。目前,大鼠、小鼠、猿、猴、犬、兔、羊、豬等多種動物被用于制備局灶性腦缺血模型。線栓法、開顱法、栓子栓塞法、光化學法、FeCl3誘導法、內(nèi)皮素-1誘導法和自發(fā)性卒中法為常用方法,其中線栓法大腦中動脈栓塞(MCAO)為制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。
腦梗MCAO模型關于禁食:很多動物實驗都是要求在開展實驗的前一天對動物進行禁食,但小編查閱文獻后認為可根據(jù)實驗目的靈活調(diào)整。當大鼠血糖濃度高或者低時,腦損傷程度加重、梗死面積增大、腦水腫加重、梗死后出血率增大,因此需要檢測大鼠的血糖狀態(tài)。必要時可在實驗前12-24h禁食。然而嚙齒類動物代謝率較高,一旦空腹超過6小時可能會導致動物體重減輕和肝糖原耗竭,影響動物的生理狀態(tài)和手術耐受性,以及候選藥物的神經(jīng)保護作用。缺血性腦梗死具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的特點。
SD大鼠MCAO模型作為世界上*通用的模型之一,在其制作時為了達成較高的成功率也需要不斷的探索和努力,我們再次總結(jié)了難點和問題點,希望這篇文章可以為大家制備模型提供參考。 (1)麻醉時間,麻醉程度適中,過淺影響操作,過深導致死亡。 (2)血管分離,在分離右側(cè)CCA、ECA、ICA時,要注意迷走神經(jīng)的保護, 減少對迷走神經(jīng)的損傷, 盡量避免對迷走神經(jīng)的直接牽拉。 (3)術中狀態(tài)監(jiān)護,例如發(fā)現(xiàn)呼吸異常,用鑷子將大鼠舌頭牽拉至嘴角一側(cè),防止舌頭根部堵塞呼吸道出現(xiàn)窒息情況。 (4)手術視野,可以制備金屬勾,用橡皮筋纏繞連結(jié)金屬鉤固定在固定板上,從而使手術切口左右上下拉開,擴大手術視野。研究腦梗死發(fā)病機制、藥物開發(fā)、神經(jīng)康復等方面發(fā)揮著重要作用,同時也為神經(jīng)精神疾病的防治提供支持。南京快速制作腦梗MCAO模型模型檢測
通過迷宮實驗、水迷宮實驗等,評估動物的認知功能是否受到影響。北京本地腦梗MCAO模型TTC染色
小鼠缺血性腦梗死模型在藥物開發(fā)方面具有重要應用。通過模擬腦梗死的發(fā)病過程,可以評估各種潛在藥物的治*效果,篩選出具有療效的藥物進行臨床試驗。同時,模型還可以用于研究藥物的副作用和毒性,為藥物的安全性和有效性提供評估依據(jù)。神經(jīng)康復,小鼠缺血性腦梗死模型在神經(jīng)康復方面也有重要應用。通過觀察模型中神經(jīng)細胞的再生和修復過程,可以了解神經(jīng)康復的機制,為制定有效的康復方案提供理論支持。同時,模型還可以用于評估各種康復手段的效果,為臨床實踐提供指導。北京本地腦梗MCAO模型TTC染色