將小鼠進(jìn)行呼吸誘導(dǎo)麻醉(異氟烷)后,以仰臥位固定于操作臺(tái)上,繼續(xù)維持麻醉,常規(guī)消毒,備皮,取頸部正中切口,分離右側(cè)頸部總動(dòng)脈(CCA)、勁內(nèi)動(dòng)脈(ICA)和頸外動(dòng)脈(ECA),結(jié)扎ECA遠(yuǎn)心端,在ECA起始端留置結(jié)扎線,用動(dòng)脈夾將ICA遠(yuǎn)心端、CCA近心端夾閉。在ECA遠(yuǎn)心端結(jié)扎線外離斷,將ECA拉至與ICA成一條直線,于結(jié)扎線近端用顯微剪剪一斜口,將MACO栓線緩緩送入,栓線通過(guò)ECA近心端結(jié)扎線進(jìn)入ICA后,單道結(jié)扎ECA近心端結(jié)扎線,使栓線與血管相對(duì)固定,隨即松開(kāi)ICA上的動(dòng)脈夾,緩慢上提ECA近心端結(jié)扎線,將栓線緩慢送入,進(jìn)線至線栓刻度位置。 缺血后再灌注:栓線插入40 min后拔出,隨后將ECA近心端結(jié)扎線結(jié)扎,松開(kāi)CCA近心端動(dòng)脈夾,碘伏消毒后逐層縫合切口。注意縫合時(shí)不要將線栓帶出,*后根據(jù)評(píng)分來(lái)判斷成模性。南京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型企業(yè)
在成功建立小鼠腦梗模型后,認(rèn)知功能的檢測(cè)可以通過(guò)以下方法進(jìn)行: 1. 迷宮測(cè)試:這是一個(gè)常用的方法,通過(guò)讓小鼠在迷宮中尋找食物,觀察其尋找食物的速度和正確性,來(lái)評(píng)估其認(rèn)知功能。 2. 物體識(shí)別測(cè)試:給小鼠展示兩個(gè)相似的物體,觀察其是否能夠正確識(shí)別并記住這兩個(gè)物體。 3. 社交互動(dòng)測(cè)試:觀察小鼠與其他小鼠的互動(dòng)情況,包括是否能夠正確識(shí)別其他小鼠,以及是否能夠進(jìn)行正常的社交行為。 這些測(cè)試可以幫助評(píng)估小鼠的認(rèn)知功能,從而了解腦梗對(duì)其認(rèn)知功能的影響。線栓法腦梗MCAO模型價(jià)格通過(guò)迷宮實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)等,評(píng)估動(dòng)物的認(rèn)知功能是否受到影響。
迄今為止,缺血性腦卒中模型覆蓋各種小型動(dòng)物(小鼠,大鼠等)和較大型動(dòng)物(兔、犬、豬、猴等),并應(yīng)用于卒中治*藥物的臨床前藥理藥效研究。然而,自1970年代以來(lái),大量在動(dòng)物模型上得到驗(yàn)證的受試藥物均未能在人體臨床試驗(yàn)中獲得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相對(duì)簡(jiǎn)單的動(dòng)物模型不能準(zhǔn)確模擬人類(lèi)卒中的病理生理過(guò)程;2)臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的藥效評(píng)價(jià)方法尚難以成功轉(zhuǎn)化到復(fù)雜的人體臨床試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。2009年國(guó)際公認(rèn)的“腦卒中治*學(xué)術(shù)工業(yè)圓桌會(huì)議”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)發(fā)布了臨床前缺血性腦卒中藥物研發(fā)準(zhǔn)則,提出提高臨床前藥理藥效研究質(zhì)量的具體要求。近年來(lái)隨著更深入的基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),更多符合人類(lèi)發(fā)病機(jī)理和病理生理過(guò)程的缺血性腦卒中動(dòng)物模型已被開(kāi)發(fā)。
1、大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型-嚙齒類(lèi) 誘導(dǎo)方式:線栓法堵塞大腦中動(dòng)脈動(dòng)物種屬:大鼠模型特征:模型可高度再現(xiàn)的MCA梗死、具有明確的缺血半暗帶(有梗死風(fēng)險(xiǎn)但潛在可恢復(fù)的低灌注組織)、可再現(xiàn)的感覺(jué)運(yùn)動(dòng)和認(rèn)知缺陷、可用于評(píng)估神經(jīng)保護(hù)藥物、不適合溶栓藥物研究、動(dòng)物會(huì)有死亡,尤其是缺血時(shí)間越長(zhǎng)時(shí)、分缺血再灌注模型和永jiu缺血模型 缺血再灌注模型與永jiu梗死模型差別:缺血再灌注模型包括原發(fā)性腦組織損傷和缺氧再灌注后由能量代謝紊亂引起的繼發(fā)性損傷,兩種損傷之間存在時(shí)間差;永jiu梗死模型無(wú)此特征、永jiu梗死模型梗死核*區(qū)相比缺血再灌注模型更大,缺血半暗帶可能更小、永jiu梗死模型動(dòng)物死亡率相對(duì)更高穩(wěn)定且成功率高的小鼠腦梗模型可以模擬人類(lèi)腦梗的病理過(guò)程,為研究腦梗的發(fā)病機(jī)制、預(yù)防提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
腦梗MCAO模型成功的評(píng)判方法主要包括以下幾個(gè)方面: 1.腦梗死面積的評(píng)估:通過(guò)TTC(2%,17分鐘)染色法對(duì)腦梗死面積進(jìn)行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對(duì)切片進(jìn)行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,通過(guò)比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評(píng)估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評(píng)分:參照Z(yǔ)ea-Longa評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)估。評(píng)分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。通過(guò)對(duì)不同處理組的神經(jīng)功能缺損評(píng)分進(jìn)行比較,可以進(jìn)一步驗(yàn)證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過(guò)激光多普勒血流儀檢測(cè)相對(duì)腦血流動(dòng)脈減少情況,評(píng)估梗死血管的狹窄程度。同時(shí),觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)他們可以幫助科研人員制定實(shí)驗(yàn)方案、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程、提高實(shí)驗(yàn)效率等。上海大小鼠腦梗MCAO模型Y迷宮
研究腦梗死發(fā)病機(jī)制、藥物開(kāi)發(fā)、神經(jīng)康復(fù)等方面發(fā)揮著重要作用,同時(shí)也為神經(jīng)精神疾病的防治提供支持。南京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型企業(yè)
此外,實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)還具備專(zhuān)業(yè)的技術(shù)知識(shí)和技能。他們能夠根據(jù)科研人員的具體需求,提供針對(duì)性的技術(shù)支持和解決方案。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,他們能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決問(wèn)題,確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。 除了技術(shù)方面的支持,實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)還能夠?yàn)榭蒲腥藛T提供其他方面的幫助。例如,他們可以幫助科研人員制定實(shí)驗(yàn)方案、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程、提高實(shí)驗(yàn)效率等。同時(shí),他們還能夠協(xié)助科研人員撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告、整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、進(jìn)行數(shù)據(jù)分析等。 總之,實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)在科研領(lǐng)域中扮演著重要的角色。他們具備較高的學(xué)歷和豐富的實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn),能夠?yàn)榭蒲腥藛T提供專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。在科研過(guò)程中,與實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)的合作能夠幫助科研人員更好地完成實(shí)驗(yàn)任務(wù),提高科研成果的質(zhì)量和水平。南京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)X梗MCAO模型企業(yè)