培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等,有點還添加克菌素、色素、和血清。為方便長期保管,培養(yǎng)基的成分均制成粉末狀。使用時再配制成可用的培養(yǎng)基,整個制備過程培養(yǎng)基需要嚴格的滅菌。目前對培養(yǎng)基滅菌通常使用高壓蒸汽法,因為蒸汽具有很強的穿透能力,能夠殺死各種微生物,微生物受熱死亡的原因,主要是因高溫使微生物體內(nèi)的一些重要蛋白質(zhì),如酶等,發(fā)生凝固、變性,從而導致微生物無法生存而死。滅菌中加熱溫度和受熱時間與滅菌程度和營養(yǎng)成分的破壞都有關系。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:滅菌-加熱-攪拌-混合-冷卻一體化控制。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器
固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基的過濾澄清,液體培養(yǎng)基必須一定澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內(nèi),裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養(yǎng)基加入1~2個雞蛋的蛋白,強力振搖3~5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121°C加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。培養(yǎng)基的分裝,培養(yǎng)基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。湖北全自動培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器滅菌鍋關閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈。
培養(yǎng)基的質(zhì)量測試:每批培養(yǎng)基制備好以后,應仔細檢查一遍,如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應挑出棄去。并測定其較終pH.將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過夜,如發(fā)現(xiàn)有菌生長,即棄去。用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基,培養(yǎng)24~48小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次,如結果仍同前,則該批培養(yǎng)基即應棄去,不能使用。培養(yǎng)基的保存:培養(yǎng)基應存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內(nèi)。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標簽。
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后.還應進行一次檢查。2.培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。培養(yǎng)基制備器注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應按照廠商提供的說明使用。
培養(yǎng)基的配置應該注意的幾大步驟:常用玻璃儀器的準備制備培養(yǎng)基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷后用清水沖洗干凈,晾干后備用。(1)平皿用紙或布包好,或裝在金屬盒內(nèi),于121℃高壓蒸汽菌3min后烘干,備用。(2)試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好,再用布或報紙包扎好,121℃高壓蒸汽滅菌20℃后烘干,備用。(3)吸管及滴管先用少許棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽內(nèi)的氣體污染),然后用紙包后或裝入金屬吸管筒內(nèi),于121℃高壓蒸汽滅菌20min后烘干,備用。其他玻璃器皿均應按上法處理,也應裝金屬筒內(nèi)160℃干熱滅菌2h后,備用。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:水蒸氣高溫滅菌,保證整個制備過程在無菌下進行。中國臺灣自動培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基是生物制品領域中常用的物質(zhì),在細菌和細胞培養(yǎng)中十分必要。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器
Systec培養(yǎng)基準備器的滅菌:Systec培養(yǎng)基準備器能夠保證快速溫和的制備標準和高敏感性培養(yǎng)基。的加熱冷卻系統(tǒng)加上均勻的攪拌,大程度上減低了對培養(yǎng)基的熱應力,保證了培養(yǎng)基的營養(yǎng)性。Systec培養(yǎng)基準備器的操作高度安全:滅菌開始前,會有一個程序自動檢查整個系統(tǒng)的氣密性,例如:鍋蓋的密封圈是否完好,這能夠避免培養(yǎng)基在滅菌過程中突然漏氣引起卸壓,此外,Systec培養(yǎng)基準備器有4個溫度/壓力檢測器,保證用戶及工作環(huán)境的高度安全。鍋蓋上裝有的過壓安全保護裝置,在電子檢測系統(tǒng)失效時,自動卸壓以保障安全。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器