血清培養(yǎng)基主要問題:血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌有毒的等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。動物個體不同,血清產(chǎn)地、批號不同,每批質(zhì)量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產(chǎn)生潛在影響,可能導致實驗失敗或?qū)嶒灲Y(jié)果不可靠性。大規(guī)模生產(chǎn)中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構(gòu)成動物細胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。培養(yǎng)基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器
微生物限度:細胞培養(yǎng)基不是無菌產(chǎn)品,其中的微生物在一定條件下會吸收細胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖,導致細胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效。控制細胞培養(yǎng)基中細菌和霉菌,是延長細胞培養(yǎng)基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華人民當?shù)厮幍洹?005版二部附錄第100頁的口服給藥制劑的微生物限度標準,并嚴于該標準,規(guī)定細胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的細菌數(shù)每1g不得超過200個,霉菌數(shù)每1g不得超過50個。稱取樣品1g,加入無菌純化水10mL溶解,混勻即得試樣。按中華人民當?shù)厮幍?005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進行,檢查項目為細菌數(shù)、霉菌數(shù)。檢查法采用平皿法。吉林Systec培養(yǎng)基制備器制備培養(yǎng)基的操作要點:易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。
培養(yǎng)基分裝機簡介:TW-AF簡易培養(yǎng)基分裝機流量范圍1-570毫升/分鐘。采用彩色液晶和觸摸屏技術,操作界面簡單,直觀,明了。為了減小不必要的風扇噪音,采用了智能溫控技術。含瓊脂培養(yǎng)基溫度控制在45-48°C,接觸碟培養(yǎng)基分裝1分鐘大約分裝15個,沉降菌培養(yǎng)皿培養(yǎng)基分裝1分鐘大約10-15個。做無菌用的液體培養(yǎng)基分裝等。物品效價測定碟子培養(yǎng)基分裝等。觸摸屏技術,方便改寫任意體積,任意份數(shù),任意時間間隔,任意速度??梢苑盅b微生物檢驗稀釋劑:先分裝225ml稀釋劑,一次幾個樣品,分裝幾份;再分裝9ml稀釋劑到試管,較后分裝培養(yǎng)基(營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、霉菌和酵母菌培養(yǎng)基等)一機多用,體積小,不占地方,方便移動。
全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):1.一鍵選擇培養(yǎng)皿類型;整合數(shù)據(jù)庫,預設培養(yǎng)皿尺寸選擇程序。2.全自動程序,無人值守;分裝過程無需人工干預。3.運行過程順滑無聲;大程度的削減了噪音。4.鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進去。5.兩個存儲器;存儲器高度可選;220或440個培養(yǎng)皿(高為16.5mm的培養(yǎng)皿)預裝培養(yǎng)皿方便;旋轉(zhuǎn)存儲器,可整個從Mediafill上取走,方便預裝培養(yǎng)皿。6.整合蠕動泵(主泵);*確分裝培養(yǎng)基。7.整合蠕動泵(附加劑泵);*確添加附加劑(可選)。8.一體化控制;主機和選配件(附加劑泵)可通過Mediafill觸摸屏一起控制。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。
培養(yǎng)基的類型-根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實際中用得十分多方面。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數(shù)、保藏、生物測定等。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。平板培養(yǎng)基要除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器
全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:具有快速升溫和迅速冷卻功能。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基溶化,將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水攪拌均勻。如準備的北京中海培養(yǎng)基較多,在不銹鋼鍋中融化加熱,可以用溫水加熱,需不停攪拌,防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象,則制備好的培養(yǎng)基將無法使用,必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基,因為銅或鐵容器可能會導致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標,影響實驗結(jié)果,其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升,細菌不適宜生長。鐵含量超過0.14毫克每升,防止細菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應和沉淀的藥物應單獨溶解,然后加入培養(yǎng)基中,如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器